2D中有很多要现配或者现加的东西,非常烦人,不知道各位是怎么处理这种情况的,比如水化液中现加DTT每次只有几毫克,或者1-2毫克,称量起来难度很大,可不可以配成储存液呢?但是配成储存液后不是和直接分装前就加到水化液中不是一样吗?欢迎大家提宝贵意见! 可以,水化液你可以先配成储液,即不加dtt及两性电解质的溶液,分装好1毫升每管,储存在-20的冰箱里对于dtt ,可以先配成1M的储液,配大约1ml ...
一. 实验目的: 1、 掌握质粒DNA 分离,纯化的原理 2、 学习煮沸法快速提取质粒DNA 的方法 3、 学习DNA的限制性酶切的基本技术 4 、 学习利用琼脂糖电泳测定DNA片段的长度 二、 实验原理 在基因工程中,DNA分子的切割是由限制性内切酶来完成的。限制性内切酶能识别特定的DNA 序列,在一定的条件下切 ...
有的试剂需要60%浓度,如葡萄糖等,这么高的度是质量体积比(w/v)还是什么,是不是就是加60g葡萄糖然后用水补足至100ml啊? 固液的百分比一般是质量体积比(w/v).60%的葡萄糖=60g葡萄糖用水补足定容至100ml. ...
电泳技术(electrophoretic techniques)的应用
中国白兔 ...
心跳频率280(200-360)次/min,呼吸频率90(69-104)次/min,潮气量1.8(1.0-3.9)ml,通气率16(10-28)ml/min,好氧量816mm3/g活体重,血压10-16kPa,红细胞总数5.6(4.5-7.0)×1012/L,血红蛋白144(110-165)g/L,白细胞总数(5-6)×109/L,血小板116×109/L,血浆 ...
项目 正常值 体温(℃) 38.2(37.8-38.7 ...
摘要: 采用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳和质谱技术对天麻染菌球茎皮层和不染菌的新生球茎皮层进行了比较蛋白质组分析与鉴定。双向电泳后在分子量12~97 kD、等电点3~10 范围内 每块胶分离到约900 个蛋白质点。对新生球茎中表达量明显增加的5 个蛋白质点用基质辅助激光解吸P电离飞行时间质谱(MALDI2TOF MS) 进行肽质量指纹谱的分析 并通过检索不同的数据库进行蛋白质鉴定与功能预测 初步认为第4 ...
摘要:目的 建立急性脊髓损伤双向凝胶电泳图谱初步观察急性脊髓损伤组织中蛋白质组的变化与差异表达为进一步探讨急性脊髓损伤分子机制奠定了基础。方法 采用双向凝胶电泳分离脊髓总蛋白银染显色Image Master图象分析系统分析从胶中选取分离蛋白质点基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI2TOF2MS) 分析获取肽质量指纹图谱(PMF) Mascot 软件搜索MSDP、SWISS2PROT数据库鉴 ...
双向凝胶电泳_飞行时间质谱法分析人肺鳞癌细胞NCI_H520蛋白质组成分.pdf ...
摘要 目的:研究小鼠子宫内膜胚泡着床点和着床旁蛋白质表达图谱及其差异。方法:用固相pH 梯度双向凝胶电泳分离5d. p. c. (days postcoitum) 小鼠子宫内膜胚泡着床点和着床旁总蛋白同时分离同龄未交配小鼠子宫内膜总蛋白银染显色PDQuest 2DE 软件分析。结果:图像分析测得三块胶的匹配率达7415 %以上在等电点pI 3~10 、分子量1414~7514kDa 范围内分离得未 ...
背景及目的 抑郁症发病机制不清。结构影像、遗传、神经生化的研究都从不同角度阐述了抑郁症的发病机制,种种证据也显示抑郁症的发病在脑代谢层面是有其器质性基础的,但至今还无明确、统一的结论。蛋白质组学技术为抑郁症发病机制的研究提供了新的手段。本研究通过建立抑郁症的动物模型,利用双向电泳和质谱鉴定技术,分析海马组织差异蛋白质表达,旨在探索抑郁症新的治疗靶点,为建立客观的诊断、治疗、停药指标提供 ...
Description Recent advances in the imaging technique electron microscopy (EM)have improved the methodmaking it more reliable and rewardingparticularly in its description of three-dimensional detail。T ...
This protocol describes the detailed experimental procedure for real-time RT-PCR using SYBR Green I as mentioned in Xiaowei Wang and Brian Seed (2003) A PCR primer bank for quantitative gene expressio ...
定量PCR(Polymerase Chain Reaction)技术有广义概念和狭义概念。广义概念的定量PCR技术是指以外参或内参为标准,通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测,进行PCR起始模板量的定量。 广义概念下的定量PCR技术可以分为五种类型:(1)外参法+终产物分析。所谓“外参法”是指样本与阳性参照在两个反应容器内反应。这种类型没有对样本进行质控监测,易出现 ...
实验中的一些好习惯加入试剂之前把它混匀一下以免放置时间长了浓度不均移液枪用完之后要归到最大计量的位置,防止久而久之弹簧失去弹性一定要记着关水浴箱,切记切记多和大家讨论,同时多关注别人讨论的经验,这几乎是最快提高的捷径了所有的试剂都自己配,出了问题才好找原因一、防止RNA酶污染的措施1. 所有的玻璃器皿均应在使用前于180℃的高温下干烤6hr或更长时间。2. 塑料器皿可用0.1% DEPC水浸泡或用 ...
Joseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne AustraliaDavid W. RussellUniversity of Texas Southwestern Medical Center DallasExcerpted From Molecular Cloning: A Labor ...
发布时间04年07月13日 11时13分 张 蓓 沈立松上海第二医科大学附属新华医院上海儿童医学中心实验诊断中心 多聚集链反应(polymerase chain reactionPCR)技术发明至今已近20年了,在这期间技术得到了不断的发展,近年来出现的实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)技 ...
实验步骤: 1、EB病毒液的制备 复苏B95.8细胞株,使用培养基为10% FCS RPMI-1640 逐步添加培养基至细胞长至对数生长期 细胞计数,调节细胞数量为1×10^6个/ml 在CO2培养箱中继续续培养10天,中间不换液 至第10天收集培养上清,1800rpm,4℃离心15分钟 0.22μm滤器过滤,1ml/支分装,冻存于液氮备用 2、病人外周血液的采集、分离 使用枸橼 ...
器材与试剂: 干粉型培养基、胰蛋白酶,青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。 具体步骤: 一、水的制备 细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水 二、PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制) 1.溶解定容:将药品(NaCl8.0g,KCl0.2g,Na2HPO4•H2O 1.5 ...