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细胞凋亡的检测方法，从大类上还可以分为早期检测、晚期检测和mRNA水平的检测。1． 早期检测: 1） PS（磷脂酰丝氨酸）在细胞外膜上的检测2）细胞内氧化还原状态改变的检测3）细胞色素C的定位检测4） 线粒体膜电位变化的检测 2． 晚期检测：1） TUNEL2） LM-PCR Ladder （连接介导的PCR检测）　　当凋亡细胞比例较小以及检测样品量很少（如活体组织切片）时，直接琼脂糖电泳可能观 ...

线粒体跨膜电位DYmt的下降，被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件，它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体DYmt崩溃，则细胞凋亡不可逆转。　　线粒体跨膜电位的存在，使一些亲脂性阳离子荧光染料如Rhodamine 123、3，3-Dihexyloxacarbocyanine iodide、Tetrechloro-tetraethylbenzimidazol c ...

（１）定期对过滤器、水箱、脱泡槽彻底清洗； （２）镜片表面有污物时，先用吸耳球将光学镜片上微细毛尘清除；必要时用镜头纸或少许无水酒精轻轻擦拭； （３）光源、亮度不足时，应更换新光源； （４）每月必须用标准液分档标定一次； （５）经常检查零点和满度的漂移，超差时应调整或修理； （６）按说明书要求安排仪器的工作环境。 ...

（一） 测原理 细胞发生凋亡时，其细胞膜的通透性也增加，但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点，被检测细胞悬液用荧光素染色，利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。 （二） 用价值 流式细胞仪检测有下列特点：（1）检测的细胞数量大，因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确；（2）可用许多相关分析；（3）结合被测细胞DNA含量分析，可确定凋亡的细胞 ...

【原理】 以醋酸纤维薄膜为支持物，用缓冲液润湿后，将微量血清样品点于膜上，再在电泳槽中进行电泳，可将血清蛋白分离成清蛋白、α1、α2、β、γ球蛋白五条区带，将薄膜置于染色液中，使蛋白质固定并染色后，可看到清晰色带，也可将色带分别于碱溶液中进行定量测定，再计算血清中各种蛋白质的含量百分数。 在正常情况下，这些蛋白质各占一定的 ...

实验目的:掌握Southern blotting的原理及操作步骤 实验原理: 1. 转膜的方式: 向上的毛细管转移 向下的毛细管转移 同时向两张膜转移 电转移 真空转移 2. 固相支持物的种类及选择: 硝酸纤维素膜:非共价结合易脆易丢失DNA< 500 bp的DNA无效转膜前的工 ...

实验原理：基本同Southern Blotting，但因RNA是单链分子，必须消除局部区域形成的二级结构，在电场中泳动的距离才能反映它本身的大小，因而需使用变性胶进行电泳；操作过程中应特别注意防止RNA的降解。 实验材料：经检测质量好的RNA样品 实验步骤： 1.制胶： Agarose&nbs ...

a.TBE浓溶液长时间存放后会形成沉淀物，为避免这一问题，可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液，出现沉淀后则予以废弃。以往都以1×TBE作为使用液（即1：5稀释浓贮存液）进行琼脂糖凝胶电泳。但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。目前几乎所有的琼脂糖凝胶电泳都以1：10稀释的贮存液作为使用液。 b.碱性电泳缓冲液应现用现配。 c.Tris-甘氨酸缓冲液用于SDS- ...

单细胞凝胶电泳（single-cell gel eiectrophoresis，SCGE）又称慧星试验（comet assay）是一项较新的电泳方法。自1978年被Rydcbert B。等人成功地用于检验DNA单链断裂以来，经过不断的改进，已成为一种快速、灵敏、简便的检测DNA损伤的方法，广泛地应用于DNA放射损伤、DNA剪切损伤、DNA交联的检测、药物的遗传毒性评价、细胞凋亡鉴定等工作中。&nb ...

可溶性抗原与相应抗体以合适的比例发生特异反应时，在一定温度和电解质存在的条件下，经过一定的时间，形成肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应。沉淀反应的抗原可以是多糖、蛋白质、脂类等。 根据抗原与抗体的不同条件及其它因素，沉淀反应可以分为以下三种主要形式。即：环状沉淀反应(ring precipitation reaction)，凝胶中沉淀反应(precipitation reaction ...

一、简介 豚鼠属哺乳纲，啮齿目，豚鼠科。豚鼠为草食性动物，嚼肌发达而胃壁非常薄，盲肠特别膨大，约占腹腔的1/3容积，粗纤维需要量较家兔多，不易患腹泻病。喜群居，头大，颈短、耳圆、无尾，全身被毛，四肢较短，前肢有四趾，后肢有三趾，尖锐短爪，不喜攀登和跳跃。习性温顺，胆小，喜干燥清洁。嗅觉、听觉发达，对音响、嗅味和气温突变等均极敏感，在空气混浊和寒冷环境中易发生肺炎 ...

液-固色谱法 液—液色谱法 离子交换色谱法 凝胶色谱法 1.液-固色谱法（液-固吸附色谱法） 固定相是固体吸附剂，它是根据物质在固定相上的吸附作用不同来进行分配的。 ①液-固色谱法的作用机制 吸附剂：一些多孔的固体颗粒物质，其表面常存在分散的吸附中心点。 流动相中的溶质分子X(液相)被流 ...

采用高效液相色谱(HPLC)法分离单糖和寡糖，较多采用氨基柱，乙腈和水作为流动相，此法具有完全分离麦汁、发酵液和啤酒中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和麦芽三糖的优点。本文采用Hypersil NH2柱分析麦汁、发酵液和啤酒中三糖以内的可发酵糖。 至今尚未见到采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法分离测定啤酒中的各种有机酸的报道，本文采用直接RP-HPLC法，应用Nucleosil C18柱，测定啤 ...

质谱仪一般由四部分组成：进样系统——按电离方式的需要，将样品送入离子源的适当部位；离子源——用来使样品分子电离生成离子，并使生成的离子会聚成有一定能量和几何形状的离子束；质量分析器——利用电磁场（包括磁场、磁场和电场的组合、高频电场、和高频脉冲电场等）的作用将来自离子源的离子束中不同质荷比的离子按空间位置，时间先后或运动轨道稳 ...

一、实验目的 脂肪广泛存在于油料植物种子和果实中，测定脂肪的含量，可以鉴别其品质的优劣，也是油料作物选种和种质资源调查的常规测定项目。 二、实验原理 在了解了实验目的之后，关于这个实验有以下几个问题需要大家思考： 1、种子成分很复杂，脂肪的提取如何进行？ 2、什么是粗脂肪？ （答：脂肪不溶于水，易溶于有机溶剂（如石油醚）。利用这一特性，选用有机溶剂直接浸提出样品中的脂肪进行测定。提取物 ...

以米糠油的提取为例，米糠油富含甾醇牗磷脂牘，具有较高的营养价值。通过超临界CO2萃取，从米糠中可以提取油脂和磷脂，降低游离脂肪酸的含量，得到色泽清淡的油脂产品。 方法：将5克米糠放入分提器中，超临界CO2的压力通过限流器控制在7000～9000psi，温度为70℃～100℃，调节其温度和压力使超临界CO2通入分提器，反应时间为90min，反应结束时，提取出的米糠油及磷脂通入收集器，回收超临界CO ...

GENERAL PROCEDURE The most popular extraction procedure is that of Folch (Folch et al. J Biol Chem 1957 226 497): Folch method The tissue is homogenized with chloroform/methanol (2/1) to a final vol ...

PROCEDURE 1. Resuspend tissue/extract in 5 volumes of 1:1 chloroform/methanol by vortexing (to homogeneity or as close as possible) 2. Add the same volume of a 1M KCl 0.2M Phosphoric acid solution a ...

Several extraction procedures may be found in books and articles aiming at the improvement of lipid recovery from any kind of organisms tissues or cell types. After the first famous studies of Chevreu ...

食品中脂肪的存在形式有游离态的，也有结合态的。游离态的脂如动物性脂肪和植物性脂肪。结合态的脂如天然存在的磷脂、糖脂、脂蛋白等中的脂肪与蛋白质或碳水化合物等成分形成的结合态。对大多数食品来说，游离态的脂肪是主要的，结合态的脂肪含量较少。 一、 提取剂的选择 脂类的结构比较复杂，到现在没有一种溶剂能将纯脂肪萃取出来，也就是说提取出来的都是粗脂肪。（大部分是脂肪，还有一些其他成分）。 前面讲性质时讲到， ...