全部

一 、标准管 待测管01020408016012 试管号1，23，45，67，89，1011，1213，1415，16 标准品（不同浓度）100100100100100100 待测血清100100 抗血清（二抗）100100100100100100100100 分析试剂100100100100100100100100 混匀，37℃温育2h 125I－胰岛素100100100100100100100 ...

载体两性电解质必备的条件：1. 可溶性要好，为了保证等电聚焦过程中PH梯度的形成和蛋白样品的迁移，载体两性电解质必须具有很好的溶解性能。2. 紫外吸收低，不发荧光。由于制备分离时，检测蛋白质的方法通常是测量280cm的吸光度，因此要求载体两性电解质在280cm的吸光度尽可能低。3. 在等电点处必需有足够的缓冲能力，以便能控制pH梯度，而不致被样品蛋白质或其他两性物质的缓冲能力改变pH梯度的进程。4 ...

主要仪器试剂仪器：微型电泳系统、电源、注射器、固定和染色用容器试剂：丙稀酰胺、双－丙稀酰胺、载体两性电解质、尿素、过硫酸胺、TEMED、TritonX－100、2－巯基乙醇、溴酚蓝、磷酸、氢氧化钠、氯化钾、三氯乙酸、考马斯亮蓝、甲醇、乙酸。　　储存液：1）30％（w/v）丙稀酰胺，1％（w/v）双－丙稀酰胺；2）20％Triton X100；3）10％三氯乙酸；4）1％三氯乙酸；5）1％溴酚蓝；6 ...

一、放射免疫标记技术 放射免疫标记技术是将同位素分析的高灵敏度与抗原抗体反应的特异性相结合，以放射性同位素作为示踪物的标记免疫测定方法，由于此项技术具有灵敏度高 (可检测出毫微克(ng)至微微克(pg)，甚至毫微微克(fg)的超微量物质，特异性强(可分辨结构类似的抗原)、重复性强、样品及试剂用量少、测定方法易规范化和自动化等多个优点。因此、在医学及其他生物学科的研究领域和临床实验诊断中广泛应用于各 ...

造成误差的可能来源有以下几个方面： 一、各种仪器：设备的准确性、稳定性、效率以及被污染等情况带来的误差。 如：①由于放射性测量仪器的稳定性、效率、样品试管的材料和均匀性及被测物的放射性强度等原因。②由于样品的自吸收，本底校正，测定时间，可能的污染等原因。③在试验室中所有的移液管、微量取样器以及天平的刻度、校准和使用方法等原因。④由于反应试管、移液管以及测定用试管等表面清洁度和所引起的不同吸附等原因 ...

放射免疫分析（radioimmunoassay，RIA）是以放射性核素为标记物的标记免疫分析法。于1960年由美国学者Yalow和Berson创立，并首先用于糖尿病患者血浆胰岛素含量的测定。这是医学和生物学领域中方法学的一项重大突破，开辟了医学检测史上的一个新纪元。它使得那些原先认为是无法测定的极微量而又具有重要生物学意义的物质得以精确定量，从而为进一步揭开生命奥秘打开了一条新的道路，使人们有可能 ...

如果要进行天然等电聚焦电泳，要做一些修改：1. 胶过程中配的凝胶中不需要加尿素；2. 上样缓冲液（2×）5ml：其中1.8ml水，200ul载体两性电解质（同制胶成分），3ml甘油，上样时候于等体积样品混匀，10000×g离心5敏即可上样；3. 室温下电泳，接好电极，恒压下先200V电泳1.5h，再400V电泳1.5h。 ...

一、基本原理 所谓平衡饱和，是指抗原和抗体反应达到再不结合，也不解离的平衡状态，称为饱和状态，即平衡饱和。所以，有人称此为饱和分析法。这意味着抗原或被测抗原、标记抗原、抗体三者一起温育。 二、加样程序 一般先加标准物或被测样品，再加抗血清，最后加标记物。这样的顺序是让标准物或被测物与抗体有短暂的结合，提高抗原的竞争抑制能力。 在小分子半抗原的放射免疫分析中，标记抗原和未标记抗原与抗体结合的亲合力常 ...

等电聚焦有以下几点需要注意： 1. 等电聚焦后可用一根染色的细线（0.1mm）标出染料前沿的位置；2. 不同品牌的载体两性电解质性质上有细微的差别，使用不同来源的载体两性电解质凝胶时候蛋白质分离样式略有差异，若要获得最好的重复性一般不要更换载体两性电解质的品牌；3. 通常，窄范围的pH梯度可以提高分辨率，但是需要时间也比较常，pH梯度范围为2是较好的选择；4. 由于电源和凝胶冷却系统的限制，最长的 ...

固相pH梯度等电聚焦是80年代建立起来的一种等电聚焦技术，其所用的介质是一些具有弱酸或弱碱性质的丙稀酰胺衍生物，它们于丙稀酰胺和甲叉双丙稀酰胺有相似的聚合行为。固定化电解质一端的双键可以在聚合中共价结合到聚丙烯酰胺介质中，其另一端的R集团为弱酸或弱碱，可在聚合物中形成弱酸或弱碱的缓冲体系，利用缓冲体系滴定终点附近 ...

1 、基本原理先将标准物或血样品与抗血清混匀，免疫反应6～24h，使抗原与抗体充分结合，甚至达到平衡，然后再加入标记抗原，与抗体反应12～24h，最后分离B与F，这称为顺序饱和分析法。 应用顺序饱和加样，可以提高测定方法的灵敏度。Utiger在做人促甲状腺激素（TSH）放射免疫分析时，将标记物延至第2天加入，发现其灵敏度增加两倍。如果缩短最后的温育时间，仍可取得满意的结果。所以一般认为，在顺序饱和 ...

固相pH梯度的优缺点　　固相pH梯度可窄至pH0.1的范围，因此分辨率极高，可达0.001pH；pH梯度稳定，不漂移；灵活性大，可随意选择pH梯度和斜率；重复性好；加样容量大；样品中盐的干扰小；对碱性蛋白质也能很好的分离，无边缘效应，故可用很窄的胶条（如5mm宽）聚焦，特别适合于双向电泳的第一相，但固相pH梯度灌胶技术复杂，只能使用聚丙烯酰胺凝胶，电泳时候需要高电压，电泳时间长，窄范围pH测定困难 ...

INTRODUCTION Phosphoproteins and peptides can be bound with high specificity to immobilized metal ions such as Fe3+ Ni2+ and Ga3+. This technique can be used with either on-line or off-line MS analysi ...

内容提要 用免疫印迹法检测134例SLE患者多肽抗体谱，阳性率71.7%，其中Sm抗体37.3%，RNP抗体21.6%，SS-A抗体24.6%，SS-B抗体20.1%，核糖体20.1%。本法对SLE诊断、分型有一定临床价值。 系统性红斑狼疮（SLE）的血清学特征是出现多种自身抗体，尤其是识别细胞核内各种可抽提核抗原（ENA）是近年来抗核抗体（ANA）研究的一项重大进展。我们应用免疫印迹技术（IBT ...

摘　要: 目的　探讨ENA 多肽抗体谱与L E 细胞(L EC) 检查在SL E、ITP 及肾炎之间检测结果的关系。方法　对同一病人应用免疫印迹法检测ENA 多肽抗体谱以及用改良血块法检查L E 细胞共136 例(SL E 78 例、ITP 22 例、肾炎36 例)。结果 在52 例L EC 阴性SL E 患者中 ENA 多肽抗体谱总阳性率为80.0% (42/52) ; 在26 例L ...

提　要　应用免疫印迹技术( IBT ) 对临床63例常见免疫性疾病进行了检查。其中 疾病组48例 主要为SL E 等自身免疫性疾病 对照组15例。同时观察了荧光ANA、dsDNA、LBT 的结果。疾病组抗ENA 抗体阳性率为58. 3% 同一患者可有2～ 3种抗体。FANA 阳性率为54. 2% dsDNA 阳性率为18. 8% LBT 阳性率为50% 对照组1例阳性(6. 7%)。SL ...

【摘要】　目的　探讨免疫印迹法检测自身免疫性疾病ENA 多肽抗体谱的临床应用价值。方法应用免疫印迹法对系统性红斑狼疮(SL E) 、混合性结缔组织病(MCTD) 、干燥综合征(SS) 、弥漫性硬皮病( PSS) 、多发性肌炎/ 皮肌炎( PM/ DM) 、类风湿关节炎(RA) 等140 例自身免疫病患者进行可提取性核抗原( ENA) 多肽抗体谱检测。一次性同时检测抗Sm、抗U1 RNP、抗SSA、 ...

摘要:为探讨抗ENA 多肽抗体谱检测在诊断系统性红斑狼疮(SLE) 病人中的应用采用间接免疫荧光法测定ANA、抗ds- DNA、免疫印迹法( IBT) 测定ENA 多肽抗体结果抗ENA 多肽抗体谱阳性率为7119 % ANA 阳性率为8618 % 抗ds -DNA 阳性率为6711 %。抗ENA 多肽抗体谱检测灵敏度高特异性强方法简便并与ANA 检测互补提高诊断阳性率对SLE 的诊断有一定的临床价 ...

摘　要:　综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法 主要包括高效液相色谱法、电泳、质谱及核磁共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。 ...

用蛋白质快速层析系统(FPLC)的几种层析技术对啤酒中的含氮化合物组成进行了研究。利用Suprose6/Superose12体积排阻柱对啤酒经透析得到的蛋白质成分分析表明 啤酒多肤物质的分子量范围分布相对较广 包括不连续分布的高分子量组分万(30万、50万)、分子量6万、4万的中分子组分和分子量在5000----2万连续分布的低分子量组分。又对分子量大于4万和界于4----6万的组分进行了进一步离 ...