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问：大鼠卵巢颗粒细胞的分离方法？ 答：大鼠颗粒细胞的分离方法一：分离23天的SD大鼠，皮下注射DES（2.5 mg/只），连续三天。于最后一次注射24h后，颈椎脱臼处死动物。无菌收集两侧的卵巢，置于盛有PBS的EP管中清洗。将PBS清洗的卵巢放在盛有培养基的平皿中，在体视显微镜下，用25号针头刺破卵泡，释放出颗粒细胞。后吸取平皿中的细胞悬液，镜下计数，接种细胞。培养基（McCoy's 5A Med ...

Sample Buffers: Dehydrating Solution 30% Methanol-2.5% glycerol Linear Acrylamide make up a 3% solution in distilled water (stir overnight). Use 1.2 ml/12 mls gradient ...

一、目的 同工酶是指能催化同一种化学反应， 但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组 酶。它们是 DNA编码的遗传信息表达的结果。最近的研究表明，同工酶与生物的遗传、生 长发、代谢调节及抗性等都有一定的关系。因此，测定同工酶在理论上和实践上都有重要的 意义。用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定同工酶，方法简便、灵敏度高，重现性强，测定结果便于 观察、记录和保存。 过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高 ...

Antibiotic Stock Solutions Ampicillin Beta-lactam-antibiotics are not very stable when dissolved. Slow but steady degradation happens even when frozen to -20℃. Therefore commercial beta-lactam-antibio ...

This is a method for the separation and identification of proteins in a sample by displacement in 2 dimensions oriented at right angles to one another. This allows the sample to separate over a lar ...

(The following protocol is for use with the LIBRARY transformation only) Day 1: Grow an overnight culture of a single colony of yeast transformed with bait vector in 2.5 ml of SD-Trp medium Day 2 1.Th ...

Immobilization of ligands on cuvette surfaces and measure the interactions of ligand which is immobilized on the cuvette and the ligate which is added to the immobilized cuvette. Immobilization of lig ...

This section describes how to amplify a library with minimal danger of substantially reducing its diversity.Amplification is accomplished by infecting fresh cells with a portion of the librarygrowing ...

Comments: T antigen (131-259)is an MBP-Hisx6-fusion protein constructed by Laura Mizoue (refer to the wisdom page for details on the construct). i.Pick a single colony from freshly transformed cells ( ...

Adapted from W.C.CopelandProtein Exp.& Purif 9(1997)1-9 and Schneideret.al.JBC 273:34 (1998)21608-21615. Obtained from Fanning lab and revised by LSM7/23/01 Obtained cell stock of BL21(DE3)cells c ...

Comments: pSV281 RPA70AB Constructed by L.Mizoue; May '02.This plasmid encodes RPA 70 subunit residues 181-422 as a fusion protein with an NT 6His tag.The tag can be cleaved off with TEV protease (rec ...

J.MoviusKCoachmanand S.Hahn (Hahn Lab) last modified 10/9/00 Induction of BRF in bacteria and purification on Ni-NTA agarose Transform BRF plasmid into strain BL21 DE3 (pLysS)or JM25 (DE3 containing t ...

Materials Expression plasmid (e.g.pET/Ncd in BL21(DE3)pLysS host cells) ZB = 10 g NZ-Amine A 5 g NaCl 860 ml final volume 10X M9 Salts = 1 g NH4Cl 3 g KH2PO4 6 g Na2HPO4 100 ml final volume M9ZB = 86 ...

George P.Smith Division of Biological Sciences Tucker Hall (573)882-3344 Introduction to B-PER B-PER from Pierce Chemical Co.is a Tris-buffered detergent formulation that lyses bacterial cells without ...

一、血清灭活问题。 1、问：加到培养基中的血清必须灭活吗？ 答：不是必须的，看做什么实验了。 2、问：四季青胎牛血清灭活是56℃30分钟吗？ 回答a：血清都是灭活是56℃30min。每次我都是这样灭活的。 回答b：应该是分血清的吧，若已灭活，就不用灭活了，未灭活，最好还是要灭活的。 回答c：如果用于培养大多数的肿瘤细胞，血清一般是不需要灭活的，这样可以有效保存血清中的生长因子。但是如果用于培养 ...

问：大豆胰蛋白酶抑制剂sigma有type-1和type-2两种，请问他们是怎么分类的，和kunitzbowman-birk有什么关系？他们对胰蛋白酶，凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶抑制的特异性如何？ 答：根据蛋白酶抑制剂所作用于蛋白酶的类型，大致可以将其分为四大类：丝氨酸蛋白酶抑制剂、半胱氨酸蛋白酶抑制剂、天冬酰胺蛋白酶抑制剂和金属蛋白酶抑制剂。丝氨酸蛋白酶抑制剂是研究较多的一大类，其中就包括您提到的K ...

问：请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用！多谢！ 答：1、胰酶是0.25%这是质量体积比，就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS注意，尽量不要用水来溶，因为要保持渗透压。 2、EDTA的工作液溶度是0.02%－0.1%，根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的，容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响，因此使用时要甚重。如果影响贴壁，但消化时必须要用，那么在 ...

问：急需木瓜蛋白酶（papain）和菠萝蛋白酶的核酸或者蛋白序列，可好像在Pubmed里检索不到，不知哪位大虾有这方面的讯息可提供，或者告知哪里可以查到，不胜感激！ 答：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=Protein&cmd=Search&term=AAA72774&doptcmdl=GenPept http ...

问：有谁知道酸性蛋白酶产生菌的筛选方法？谢谢您的帮助。 答：下载这几篇文章看看：1、酸性蛋白酶高产菌株的选育http://www.wanfangdata.com.cn/qikan/periodical.articles/lsyslgy/lsys99/lsys9903/990313.htm2、酸性蛋白酶高产菌株6042（Aspergillus niger6042）的选育和形态鉴定http://eng ...

肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置，首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。 一、组织培养肿瘤细胞生物学特性 肿瘤细胞与体内正常细胞相比，不论在体内或在体外，在形态、生长增值、遗传性状等方面都有显著的不同。生长在体内的肿 ...