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一、拉曼散射的发展历史 1928年，印度物理学家拉曼用水银灯照射苯液体，发现了新的辐射谱线：在入射光频率ω0的两边出现呈对称分布的，频率为ω0-ω和ω0+ω的明锐边带，这是属于一种新的分子辐射，称为拉曼散射，其中ω是介质的元激发频率。拉曼因发现这一新的分子辐射和所取得的许多光散射研究成果而获得了1930年诺贝尔物理奖。与此同时 ...

问：以前拿回细胞后，传代、冻存后复苏过几次都没什么问题，最近因实验室孵箱污染，清洁消毒细胞室后，重新复苏，结果连续复苏6支，细胞均未贴壁，今晚复苏6小时后观察有一瓶相对贴壁细胞数较之前复苏失败瓶多，但贴壁细胞状态不好，形态不佳，透光度亦不好！急求各位大侠会诊指导！ 答：juventus2004认为复苏过程没有问题的，是否是从液氮拿出直接放入温水？培养箱问题，二氧化碳浓度？培养基问题？PH值？要么加 ...

问：复苏的肿瘤细胞传代多久后，弃之不用并解冻新的细胞？在传代的过程中， 有时细胞长得太满， 都开始死亡了才传，对细胞有什么不良的影响，有没有固定的传代间隔时间？ 答：rumex认为培养的代数因细胞不同而不同，肿瘤细胞培养两个月应该不会有问题，但培养的不好就另说了，细胞数量达饱和密度后，细胞遂停止增殖，进入停滞期。停滞期细胞虽不增殖，但仍有代谢活动，继而培养液中营养渐趋耗尽，代谢产物积累、pH降低。 ...

一、无机化合物的分析 化学结构的测定——无机化合物对称性强，用红外光谱法很难解决，而拉曼光谱测无机原子团的结构、以及测络合物的结构是很方便的。 （1）对于汞离子在水溶液中，是以Hg+或Hg2+存在的，用红外光谱是无法确定的。因这两种离子在红外光谱上都无吸收带。在拉曼光谱中可看到（Hg-Hg）2+的强偏振线在169cm-1出现。 （2）铊离子在水溶液中是以一价形式存在。因拉曼 ...

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一、概述\ 气相色谱只适合分析较易挥发、且化学性质稳定的有机化合物，而HPLC则适合于分析那些用气相色谱难以分析的物质，如挥发性差、极性强、具有生物活性、热稳定性差的物质。所以，HPLC的应用范围已经远远超过气相色谱。 通常将液相色谱法按分离机理分成吸附色谱法、分配色谱法、离子色谱法和凝胶色谱法四大类。其实，有些液相色谱方法并不能简单地归于这四类。 ...

我们做蛋白质电泳的人都知道，银染色很灵敏，有很强的说服力，但通常胶背景较深，不易扫描。在这里介绍一下低背景的蛋白质银染方法。 Step Reagent Time/min Fix 50%EtOH 12%HAC 0.1%HCHO 38%H2O 60 Rinse 50% EtOH 5 min 3 times Sensitive 0.02% Na2S2O3 1 min Rinse Double disti ...

Invitrogen提供了大量的涵盖面广的蛋白分离预制胶，包括不同的成分，百分比浓度和格式。使用合适的胶百分比浓度，缓冲系统，上样孔格式以及胶的厚度，对于获得最好的结果非常重要。以下提供了帮助你选择适合你应用的正确凝胶的信息。 E-PAGE™ 96 High-Throughput System是整合的、无缓冲液系统，设计用来检测和分析大量的蛋白样品，时间仅仅需要14分钟。 NuPA ...

总 RNA 的电泳检测，原来我使用 Lambda DNA/EcoR I （或者 Hind III）酶切 Marker，现在基本上不再用 Marker 了。指示剂一定是溴酚蓝加二甲苯氰，胶浓度 1-1.2%。加样后，开始电泳 (电压的选择的唯一依据是，我后面的时间安排。)。 溴酚蓝出孔 2-3cm 后终止电泳，紫外观察。首先能吸引我的一定是非常亮的位置(是否上样过量)，然后观察溴酚蓝到二甲苯氰之间的 ...

凝胶干燥时遇到的主要问题是凝胶的变形和破裂。将凝胶放在Whatman 3MM滤纸上可防止干燥凝胶变形，但凝胶是否破裂取决于凝胶的厚度和干燥器的质量，因此，应尽量使用薄胶并使凝胶干燥器处于良好状态，使其真空压力波动极少。 (1)试剂与配制：固定液：冰醋酸:甲醇:水（10:20:70） (2)电泳后的凝胶用5～10倍体积固定液在室温下固定，酸性固定液扩散后可使凝胶中的溴酚蓝变黄。蓝色全部消 ...

电泳是在溶剂中通过电场转移带电分子，任何带电的离子或者基团放置在电场中都将会迁移。除非在它们的等电点，大多数生物聚合物在任何pH值时都带有净电荷，它们将会以与电荷密度成比例的方式移动。分子在电场中的迁移取决于电场的强度、净电荷、分子的大小和形状、离子强度、粘度和分子移动介质的温度。作为一种分析工具，电泳简单、快速，并且具有高灵敏度。用来研究单一、带电荷的分子的特性，也用来作为一种分离技术。 支持 ...

在凝胶色谱技术应用之前，许多经典方法都可以测定高聚物的相对分子质量，如端基测定法、渗透压法、粘度法等，但在测定时都有局限。在相对分子质量分布（多分散性指数）成为人们关注的热点后，经典方法却不能同时测定聚合物的相对分子质量分布。凝胶（渗透）色谱（GPC）的应用改善了测试条件，并提供了可以同时测定聚合物的相对分子质量及其分布的方法，使其成为测定高分子相对分子质量及其分布最常用、快速和有效的技术。而GP ...

1. Introduction SDS-PAGE (Section 2.2) is probably the most commonly used gel electrophoretic system for analyzing proteins. However it should be stressed that this method separates denatured protein. ...

电泳法 电泳法是指带电荷的供试品（蛋白质、核苷酸等）在惰性支持介质（如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等）中，于电场的作用下，向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动，使组分分离成狭窄的区带，用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其含量(%)的方法。 各电泳法，除另有规定外，照下述方法操作。 第一法 纸电泳法 1.仪器装置 包括电泳室及直流电源两部分。 常用的水平式电泳室装置如图，包括 ...

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一、试验目的 了解并掌握垂直板凝胶电泳的使用方法。 二、实验原理 聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳是以聚丙烯酰胺凝胶做支持物的一种区带电泳，由于此种凝胶具有分子筛的性质，所以本法对样品的分离作用，不仅决定于样品中各组分所带净电荷的多少，也与分子的大小有关。其次，聚丙烯酰胺凝胶电泳还有一种独特的浓缩效应，即在电泳开始阶段，由于不连续pH 梯度的作用，将样品压缩成一条狭窄区带，从而提高了分离效果。 聚丙烯酰胺 ...

一、目的 蛋白质分子有单链、双链和寡聚蛋白等组成形式，组成蛋白质分子的单条肽链又称亚基。通过对天然蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳和变性蛋白的SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱的比较，可以研究种子蛋白质分子组成和结构。另外，SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳是测定亚基分子质量的好方法。通过本实验，学习SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理、技术和实际应用。 二、原理 用十二烷基硫酸钠（SDS）和还原剂（琉基乙醇或二硫 ...

凝胶色谱属于液相色谱，它是按被分析混合物不同组分分子大小的不同进行分离的，多用于高聚物的分析。它以液体做流动相，以多孔固体做固定相，其中孔是有一定尺寸限制的，而且大小不一。它的分离过程是在装有多孔固定相的色谱柱中进行的。当尺寸大小不同的分子通过色谱柱时，可占据的体积也不同。对流动相分子而言，填料孔的尺寸大得多，因些，流动相可以自由扩散出入；而大小不同的样品分子则要渗透到不同的孔中，较大的分子只能进 ...

一、目的 掌握醋酸纤维素薄膜电泳法分离带电颗粒原理；观察核苷酸类物质的紫外吸收现象。 二、原理 带电粒子在电场中向着与其自身带相反电荷的电极移动的现象，称为电泳。控制电泳条件（如pH 等），使混合试样中的不同组分带有不同的净电荷，各组分在电场中移动的速度或方向各不相同，从而达到分离各组分的目的，这就是电泳分析法。以醋酸纤维素薄膜作支持物进行电泳分析的方法称为醋酸纤维素薄膜电泳法。 在pH4.8 电 ...

原理： 以多孔性物质作固定相，样品分子受固定相孔径大小的影响而达到分离的一种液相色谱分离模式。样品分子与固定相之间不存在相互作用力（吸附、分配和离子交换等），因而凝胶色谱又常被称作体积排斥色谱、空间排阻色谱、分子筛色谱等。比固定相孔径大的溶质分子不能进入孔内，迅速流出色谱柱，不能被分离。比固定相孔径小的分子才能进入孔内而产生保留，溶质分子体积越小，进入固定相孔内的机率越大，于是在固定相中停留（保留 ...