【求助】如何处理钙离子浓度变化数据 参与者:zufu 请教各位战友,我用荧光显微镜测血管平滑肌钙离子浓度变化,用药物刺激后可以得到钙离子时间浓度曲线,但各组之间差异较大。大家是如何处理这些数据的,因为要比较不同浓度药物刺激后钙离子的变化。 用药前钙离子稳定在一定水平,基本是一条直线,但用药后就是一个先升高后降低的曲线了,变化快,如何比较用药前后的变化,大家如何取数值并分析,是一段时间内的平均值还是 ...
【求助】fluo-3 的激发,发射波长疑问 参与者:wjg200022 最近我在测细胞内的钙浓度,用的是fluo-3 探针,但选多大的激发,发射波长很为难,有文献用的是488/515nm,有的用的506/526nm,我打算用流式细胞仪测,有做过这方面的给点指点,谢谢。 此外我找到一段原话:“Fluo-3 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-3 AM的荧光非常弱,其荧光不会随钙 ...
目的 利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立人血清促卵泡激素(hFSH)的检测试剂。方法 采用双抗体技术建立hFSH- TRFIA的检测试剂,对试剂的各项指标进行评价。结果 hFSH- TRFIA检测试剂的测量范围为1~256U/L,灵敏度为0.08U/L,分析内和分析间的精密度分别为26%~42%,6.1%~8.6%,与人黄体生成素(hLH)、人促甲状腺素(hTSH) 和人绒毛膜促性腺激素(hCG)的交叉率分别为0.14%,0.08%和0.01%。30份异常血样用该试剂同类试剂同时检测,其相关系数为0.993。结论 试剂各项指标均达到临床检测要求,可替代国外同类产品。
DGGE,CGGE及TGGE三种方法是基于相同的原理而设计的突变检测方法,它仍均是根据DNA的解链特性而设计.对于同一定序列组成或的DNA片段来说,它具有恒定的解链温度(Tm),但若其序列发生改变时,Tm值亦发生改变,在含有变性因素(变性剂, 高温)的凝胶半进行电泳,当其比链解开形成分叉时,电泳迁移的速度就会改变.Tm值 全要取决于DNA的碱基组成,序列中出现单碱基替换时,Tm亦发生改变,电泳迁移 ...
1.目的 建立一个大连依利特P230高效液相色谱仪的使用、维护保养标准操作程序,使操作过程标准化。 2.职责 质量部QC负责本文件的起草,质量部及QC检验人员负责本标准的实施。 3.范围 本标准适用于大连依利特P230高效液相色谱仪的使用、维护和保养。 4.内容 4.1 仪器组件、型号 4.1.1 仪器组成:P230高压输液泵、UV230紫外-可见检测器、EC2000色谱工作站。 4.1.2 电源 ...
【求助】两个载体做共转染(瞬时转染)时是否需要有相同的复制起点\启动子吗?? 参与者:sunshine046000 各位大侠,我最近准备做共转染,用于分析目的基因的蛋白功能改变,查阅文献发现可以用含目的基因的载体和含有报道基因(b-gal)的载体做共转染以控制转染率。..请问师兄师姐们,如果我的研究目的在于分析目的基因(野生型和突变型)的表达情况以及后续的活性变化。是否最好用含相同启动子,增强子, ...
测定DNA的核苷酸序列是分析基因结构与功能关系的前提。从小片段重叠法到加减法、双脱氧链终止法、化学降解法、自动测序,DNA测序技术发展很快。目前在实验室手工测序常用Sanger双脱氧链终止法。Sanger法就是使用DNA聚合酶和双脱氧链终止物测定DNA核苷酸序列的方法。它要求使用一种单链的DNA模板或经变性的双链DNA模板和一种恰当的DNA合成引物。其基本原理是DNA聚合酶利用单链的DNA模板,合 ...
目的: 本操作规程是关于屏障动物房中饲养小鼠的具体操作规程。 主体内容: 1.提前15分钟用70%酒精喷雾动物笼具交换工作站内表面,同时放入经表面消毒的各种灭菌饲养和实验用品,并打开紫外灯,开启超净工作台风机。 2.关闭紫外灯,打开照明灯。 3.用70%酒精喷雾工作车。 4.用双手轻轻抬起IVC笼盒外端,沿笼架搁挡向外移出笼盒,放在工作车上。 5.将工作车推至动物笼具交换工作站旁。 6.用70%酒 ...
目的 利用时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay, TRFIA)技术建立人生长激素(human growth hormone, hGH)的快速检测方法并研制其诊断试剂。方法 采用双抗体夹心法(一株抗GH的单抗用于包被微孔板,另一株抗GH的单抗用于Eu3+标记)建立hCG-TRFIA。结果hCG-TRFIA的线性测量范围为0.1×10 ~100×10 U/L 0.036×10 U/L 5.3%~8.6% 和7.6%~12.8%,与促甲状腺激(TSH)、卵泡生成素(FSH)、人胎盘催乳素(LH)和黄体生成素(HPL)均无交叉反应,将43份血清标本用本法与Wallac试剂盒同时检测相关系数(r)为0.957。 结论hGH-TRFIA可作为一种具有灵敏度高、特异性强和测量范围宽的新方法 用于临床GH水平的测定。
【目的与要求】 了解IVC系统和超净工作台的原理结构、维护、操作程序和注意事项。 【仪器与材料】 IVC、超净工作台、一次性手套、口罩。 【步骤】 一、师讲述IVC系统和超净工作台的原理结构、维护、操作程序和注意事项。 二、学生在教师指导下进行各项基本操作。 【内容】 一、原理和结构 IVC笼盒由耐高温(至少能耐150~160℃高温以上)的透明塑料材料制成,一套笼盒由上盖、底盒、食槽、水槽、锁紧 ...
实验目的: Morris水迷宫试验(water maze test,Richard Morris,1981)及其它行为学实验(跳台试验、避暗试验等)是近二十几年建立起来的判断动物学习记忆的重要实验方法,近年来正成为神经药理学、神经生理学、神经心理学、老年病学等的常用研究手段。 原理: 通过动物的行为来判断动物的智力情况,达到研究的目的。 具体步骤: 设计特制的水迷宫主要由一圆柱型水池和一可移动位置 ...
一、高效液相色谱仪的结构: HPLC的出现不过三十多年的时间,但这种分离分析技术的发展十分迅猛,目前应用也十分广泛。其仪器结构和流程也多种多样。典型的高效液相色谱仪结构和流程可用下列方框图表示(图3-2)。高效液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、梯度洗提装置(用双泵)、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、记录仪等主要部件。 1 .高压泵 HPLC使用的色谱柱是很细的(1~6 mm),所用固定相的粒度也 ...
实验动物(特别是大型实验动物)的饲养对设备有许多特殊的要求,以确保实验动物的生存条件完全正常,为实验提供正确的结果,另外还要考虑到动物保护组织的意见。EHRET公司的大动物饲养设备正是根据欧美严格的要求,凝聚多年技术经验设计制造而成。 IVC兔笼系列 ●笼体可以经高温(121~165℃)高压灭菌。 ●耐酸碱。 ●易于操作。 ●圆滑的角部设计便于清洁。 ● 兔子生活舒适。 ●在一个笼中有 ...
【摘要】基于可溶性抗原和抗体在液相中特异性结合,形成一定大小的抗原抗体免疫复合物,使反应液出现浊度。采用流动注射光度分析法联用单片机,优化了实验条件;采用合并带技术节省试剂与试样,寻找到了抗原抗体反应的最佳浓度比与最佳反应时机,从而建立了流动注射免疫比浊测定人体血清免疫球蛋白A(IgA)的新方法。整个测试系统联用单片机,使测试过程实现程序操作。本法简便、快速,节省试剂和试样,进样频率高,每小时进 ...
对自制时间分辨免疫荧光法定量检测癌胚抗原(CEA)试剂盒进行临床应用研究,为该试剂盒临床应用及临床疗效评价提供科学依据。方法 收集血清标本326份,用自制试剂盒按试剂盒操作说明书对血样进行测定,并以化学发光法(Roche)为对照方法,WALLAC公司的CEA时间分辨免疫测定药盒(AutoDELFATM hCEA)作为复核试验,获取相关目标实验数据,并计算得“真实性”和“可靠性”等统计学数据。结果 以化学发光法为对照试验,其阳性符合率为95.83%,阴性符合率为98.73%,检验无显著性差异;自制试剂盒的定量测定值与化学发光法的测定值较为一致,相关系数达0.93,相关性好。结论 试剂盒检测性能与现在临床广泛应用的方法相仿,能满足临床应用的需要。
由于SPF级动物需要投入大量的经费和时间,投资者必须保护这些动物免受污染。关于隔离水平,存在着以下几种不同的水平:房间水平,弹性膜隔离和笼具水平的隔离。其中,笼具水平的隔离是最具有可塑性和实用性的装置,它由一个带顶层过滤的微隔离动物笼和一个100级超净工作台组成。 配合使用严格的无菌操作技术,笼具水平的隔离技术能保证动物免受微生物污染及免于得病。 绝大多数局部的隔离系统设计的基本原则是:既要保护动 ...
摘 要:当今生物学领域的研究一个热点之一是细胞凋亡。开展对细胞凋亡的研究,首先要解决是方法学问题。作者从凋亡细胞的特征性核DNA片段检测着手,阐述了多种凋亡细胞核DNA片段检测方法以及近年来的一些新进展。 细胞凋亡(apoptosis)又称细胞凋谢或称程序性细胞死亡(Programmed cell death,PCD),是有别于细胞坏死而受基因控制的一种主动性细胞自杀过程。对细胞凋亡的研究已成为当 ...
类风湿因子(RF)是诊断类风湿关节炎(RA)的一个重要的实验室指标,其检测方法很多,国外主要采用免疫比浊法(ITA)、酶联免疫吸附法(ELISA)、放射免疫法(RIA)等,国内仍普遍采用乳胶凝集试验(LAT),该方法操作简单,不需要特殊仪器,成本低,但只能进行半定量结果分析。本文采用ITA和LAT同时检测了RA和其他结缔组织病(CTD)患者及正常人的血清RF含量,并比较分析两种检测RF方法的结果。 ...
一、目的: 保持动物有舒适的生活环境,避免动物受病源微生物的影响。 二、背景知识: 20世纪80年代,意大利Thcniplast公司,在带空气过滤帽塑料盒的盒帽上方加了一个进风口,希望促进盒内的通风换气,从而出现了第一个独立通气笼盒(Individually Ventilated Cages,IVC)。IVC笼盒经过十多年的使用、研究和不断改进,特别是在材料、净化、微电子等现代技术的带动下,一个全 ...
【摘要】 目的 评价用自动生化分析仪免疫抑制比浊法测定糖化血红蛋白(HbA 1c )的可靠性,并与常规方法(微柱法)作相关比较。 方法 根据美国国家试验室标准委员会(NCCLS)EP5-A、EP9-A文件要求进行方法精密度、准确度和线性范围的评价试验。 结果 该方法的批内和批间CV<4%,试验总不精密度为:x(HbA 1c )为4.85%时,CV为2.8% ...