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        RNA提取与Northern杂交

        这里介绍了组织RNA的提取方法、Northern杂交步骤、相关试剂的配制说明,内容详尽,易于操作。

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        单细胞基因表达分析

        多数基因表达分析靠多细胞反应或扩增达到观察目的。原位分析绕过这些过程得到单细胞表达信息,它仍是核酸定位的利器。

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        Bio-rad凝胶成像系统的使用

        Imaging the Quansys Q-Plex multiplex ELISA array using the Bio Rad Chemi Doc XRS imaging system.

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        ELISA实验操作步骤演示

        优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。ELISA 的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式ELISA。

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        单克隆抗体制备

        单克隆抗体由可以制造这种抗体的免疫B细胞与骨髓瘤细胞融合后的细胞产生的,这种融合细胞即具有瘤细胞不断分裂的能力,又具有免疫细胞能产生抗体的能力。

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        利用实时定量PCR分析基因相对表达量

        2-△△CT方法是相对定量real-time PCR的一种简便方法。本文介绍了该方法的推导,假设及其应用。本文还介绍了两种2-△△CT衍生方法的推导和应用及它们在实时定量PCR在的运用。

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        免疫标记技术

        标记免疫技术是将某种可微量测定或超微量测定的物质(如放射性核素、荧光素、酶、化学发光剂等)标记于抗原(抗体)上制成标记物,加入到抗原-抗体的反应体系中与相应的抗体(抗原)反应,以检测标记物的有无及含量来间接反映样品中待检抗原或抗体的存在与多少。 ...

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        干细胞成骨和成脂诱导方法

        本文来自Cyagen赛业经过多年的干细胞(特别是MSC)研究,已经开发出多种成熟的MSC和ADSC等干细胞的分化诱导产品。

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        新一代Lipid技术

        Attractene Transfection Reagent 高效转染各种贴壁真核细胞 ♦ 高效DNA转染,极低细胞毒性 ♦ 快速、简便的操作流程 ♦ 所有贴壁细胞 (包括难转细胞)的最佳选择 ♦ 非常适用于瞬时转染,稳定转染,共转染和 shRNA载体转染 ♦ 不含来自动物的组分 更高效率转染质粒DNA Attractene 试剂采用非 ...

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        ABGENT:western-blotting

        1. 溶液准备: 转印缓冲液:0.025M Tris base , 0.192 M甘氨酸 , 30%甲醇 10×TBST:250mM Tris-HCl ( pH 8.0 ) , 1.25M NaCl , 0.5%Tween20 封闭液:1×TBST , 3%脱脂奶粉 洗涤液:1×TBST 2. 实验程序: A. 膜的准备: 将PVDF膜切成条浸在甲醇中,室温条件 ...

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        3T3-L1细胞诱导分化

        美国密歇根大学的3T3-L1细胞分化的PROTOCOL(非常详细) 3T3-L1 Differentiation Protocol MATERIALS Dulbecco's Modified Eagles Medium (DMEM; GibcoBRL-Cat# 11965-084: high glucose with L-glutamine with pyroxidine HCl witho ...

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        脐静脉内皮细胞培养

        一、试剂和缓冲液配制 1、胎牛血清(氯化十六烷基吡啶) (1)解冻胎牛血清 (2)在56℃加热30分钟(脱补体作用,盖上瓶) (3)取25ml上述液体放在无菌的50ml的falcon里分馏 (4)在-20℃冰冻馏份 2、磷酸盐缓冲液(PBS) (1)无钙镁离子的100ML的PBS(10×)(生命技术) (2)900ML蒸馏水 (3)2克葡萄糖 (4)在无菌的FALCON里过滤,分馏,在 ...

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        血球计数板细胞计数法

        细胞计数法是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种方法。一般利用计数板(血球计数板)进行。即可用于分离(散)细胞培养接种前计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,也可用于对培养物的细胞数量进行计数。不论计数的对象如何,均须制备分散的细胞悬液。 一、步骤 1、制备细胞悬液:对于悬液培养的细胞,可直接进行下面的步骤2(计数与计算过程)。如果计数对象为贴壁生长的细胞,首先需将培养物按如下步骤制备成细胞悬液。 1)、 ...

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        细胞单克隆的分离方法

        一、有限稀释法 材料: a、96孔细胞培养板等; b、HT培养基; c、活力强的杂交瘤细胞; d、小鼠腹腔细胞。 方法: a、制备小鼠腹腔细胞。同“细胞融合”一节中的方法。 b、制备待克隆的杂交瘤细胞悬液,用含20%血清的HT培养基稀释至每毫升含2.5、15和50个细胞三种不同的稀释度。 c、按每毫升加入5×104-1×105细胞的比例,在上述杂交瘤 ...

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        原代培养结肠平滑肌细胞

        实验步骤 (一)、取SD 大鼠一只,实验时断椎处死。 (二)、在无菌条件下快速自肛门上2cm 取结肠10cm 左右,生理盐水中反复灌肠冲洗。 (三)、移入含300U/ml青霉素、300U/ml 链霉素的HepesRinger缓冲液中浸泡,肠段内外各15min。 (四)、将经抗生素浸泡过的肠段移入含Hepes Ringer缓冲液的塑料培养板中(培养板预先铺上705胶),在体视显微镜下沿肠系膜对侧纵行 ...

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        溶解方法及溶剂问题

        1、舒林酸和尼美舒利的溶解方法的问题: 问:最近在做试验时发现舒林酸和尼美舒利两种药物很难溶解,加入DMSO后可以溶解,但是再加入1640培养液稀释时又出现结晶,而且很难溶解。有什么好的办法吗? 答:(1)可以先把所需药母液加如一个小安剖瓶,再加入培养基,用枪多吹打几分钟就会溶解。 (2)如果还是溶解不了,可以换用乙醇试试。 (3)配制药母液时浓度要尽量高,这样稀释后培养基中的DMSO浓度才越低。 ...

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        溶液的配置问题

        问:盐酸乙醇该怎么配置呢? 答:在丁香园里搜索“盐酸乙醇”,有很多配制的网页,看你选择,比如“0.5%盐酸乙醇液如何配制 分析技术讨论版thank_you” http://www.dxy.cn/bbs/post/search?ei=UTF-8&action=Search&words=%E7%9B%90%E9%85%B8%E4%B9%9 ...

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        寡核苷酸合成的量的问题

        问:本人想合成一端核苷酸,我需要很大的量,但我不知到是不是公司给我合成后,拿回来我自己再扩增,还是公司直接合成我所需要的量? 答:首先的是要明确你合成这段核苷酸的用途。如果是单链引物,用2OD也即是公司合成的量就足够了。是双链则另当别论。 ...

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        寡核苷酸合成原则

        问:寡核苷酸合成有什么原则吗?根据MRNA上的碱基序列,合成的反义寡核苷酸是否每个碱基都要和mRNA严格对应?比如下面的例子(中华系列杂志上一篇文章发表的):根据下面序列 5 ATG CTG CTG CGC TCG AAG CC 3其合成的寡核苷酸如下:AS-ODN 5'- GGC TTC GAG CGC AGC AGC AT-3' NS-ODN 5'- TCA GCT AGC GAG GCT G ...

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        合成小肽时活化羧基

        问:合成小肽时活化羧基是用活化酯法好还是酰卤法好呢想? 答:楼上的兄弟是做液相合成的吧?一般活化脂用的是DIC,DCC,类的东西哦,但是它门容易形成沉淀,让后处理不容易分离,很麻烦,一般用酰卤的方法比较好,再说你是做的小肽,肽的序列3-10个都好用的。希望你实验顺利! ...

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