原代细胞(primary cell)是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。细胞株(cell strain)是通过选择法或克隆形 ...
1677年荷兰Antonie van Leeuwenhoek (1632-1723)显微镜学家、微生物学,用简单显微镜观察到动物的“精虫”(细胞)。1665年英国Hooke Robert(1635-1703)博物学家提出细胞和细胞结构的概念。1827年贝尔发现哺乳类的卵子,对细胞本身进行认真的观察。1838年描施莱登述了细胞是在一种粘液状的母质中,经过一种像是结晶样的过程产生的,并且把植物 ...
1. Primary cells from PriCells2. Basal media of primary cellsBasal Medium of primary cells is a sterile phenol red-free liquid tissue culture medium intended for use as one component in a co ...
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概述肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基,10%血清浓度即可,在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物,或原患者血清(1%-2%)以利细胞生长。用细胞生长因子如胰岛素、氢化可的松、雌激素等等。也可以考虑动物媒介培养。,根据细胞种类不同选用不同的促细胞生长因子。肿瘤组织分离为肿瘤细胞原代培养的方法主要有组织块法、酶消化法、钽网法、脱落细胞法等。
PriCells - 正常人脐静脉原代内皮细胞培养
一、实验室设计1、细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。2、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。3、细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,为10万级洁净环境的洁净室。而洗刷消毒工作设在洁净室外,避免物品污染洁净室内环境。细胞洁净室需 ...
PriCells –正常大鼠原代心肌细胞培养一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1×PBS(pH 7.4)+ 1% P/S4、染色液: 0.4% Trypan Blue 5、消化液: PriCel ...
PriCells –正常大鼠原代主动脉平滑肌细胞培养一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液: 0.4% Trypan Blue 5、消化 ...
无血清培养基一些基本配方
PriCells –正常小鼠原代脑星形胶质细胞培养
正常人外周血白细胞的分离
PriCells –正常小鼠原代真皮纤维原细胞培养一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液: 0.4% Trypan Blue 5、消化液: ...
原代肝细胞培养、肝非实质细胞、肝脏干细胞肝实质细胞:指具有执行和完成肝功能单位的细胞。肝非实质细胞:指非具有执行和完成肝功能单位的细胞,这些细胞的功能主要是具有连接和支撑肝实质细胞的作用。如血窦内皮细胞、Kupffer细胞、陷窝细胞(pit cell)及肝脏星状细胞(hepatic stellate cell;HSC)。肝脏干细胞:是一种来源于肝脏Herring狭隙和肝内胆管的具有双向分化潜 ...
正常小鼠原代骨骼肌细胞培养
培养的贴壁原代细胞的蛋白质抽提基本步骤
ELISPOT(Enzyme-Linked Immunosorbent SPOT 酶联免疫斑点法):是一种体外检测特异性抗体分泌细胞和细胞因子分泌细胞的固相酶联免疫斑点技术,是ELISA技术和细胞培养技术结合而发展的新型技术。使体外检测各种细胞产生细胞因子及细胞分泌抗体研究有了新的突破ELISPOT技术优点:1. 特异性和敏感性高:能从 20万-30万 细胞中检出 1个 分泌该蛋白的细胞 ...
PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。在体外培养原代细胞时,为了保证实验结果的可靠性、一致性、稳定性、和可重复性,要求采用单一种类细胞来进行实验,这样才能对某一细胞的功能、形态等变化进行一系列研究,因而培养细胞的纯化就成为 ...
PriCells:原代肺泡上皮细胞(Primary Alveolar Epithelial Cells)的体外分离培养1、完全无血液残留肺脏组织:2、消化肺组织:常用细胞消化酶:胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。 经支气管将酶灌注到完整的肺中消化,或把肺组织剪碎放入消化液中消化。前者比后者更有效。3、分离纯化细胞:原代肺泡上皮细胞的分离纯化主要方法:(1)密度梯度离心法:密度梯度离心分离细胞的原理是 ...
PriCells: 原代细胞分离和培养基本步骤