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在做病毒包装实验中，有科研工作者常遇到：用同样一个病毒载体系统进行病毒包装实验，为什么有人做的很好，次次成功，有人却是时常做不出来，稳定性很差，不是滴度低就是根本不出毒?从我们对不同载体系统病毒包装的多年经验总结，主要以下几个方面心得：第一，病毒包装的几个关键节点就是细胞因素、载体系统(尽量使用成熟的商业化载体系统)、构建重组的质粒正确与否、质粒抽提纯化情况、包装转染控制(24、48 小时的细胞及荧光状态判断)、目的基因 ...

细胞培养技术中，细胞计数是一项基本功，对于标准化培养条件以及需要精确定量的实验来说都非常关键。这里介绍使用血细胞计数器对细胞进行计数的经典方法以及中间一些需要注意的细节。制备细胞悬液：对于贴壁生长的细胞，我们需要首先使用胰酶消化的方法使细胞从培养皿表面脱落根据需要加入合适体积的培养基，将细胞进行中和及稀释，以得到均质的细胞悬液。要求尽可能将细胞吹打散开，不要残留任何细胞团准备血细胞计数器：使用70%乙醇将盖玻 ...

以六孔板中的1孔为例，每个样品需要1×106个293FT细胞。1、取1.5 ml灭菌EP管，加入1.5 μg包装混合质粒和0.5 μg表达质粒以及250μl的无血清Opti MEM。轻柔混匀，室温孵育5 min。2、取1.5 ml灭菌EP管，取9μl 脂质体2000l溶于250 μl无血清Opti-MEM I培养基中。轻柔混匀，室温孵育5min。3、将DNA溶液和脂质体溶液轻柔混匀。室温孵育20 min。4、用胰酶消化并记数293FT细胞。用含血清的DMEM ...

随着生命科学的迅猛发展以及基因工程、分子克隆和基因芯片等一系列分子生物学技术应用的不断深入和完善，检验医学作为临床医学中的一门新兴学科完成了从临床实验医学中医学检验到检验医学的转变，也使检验科的工作定位和观念发生了变化。 检验医学为疾病的诊断、治疗、康复和预防提供实验室依据，临床检验质量对于检验医学的重要性不言而喻。3月13-14日，由易贸医药主办的2015（第六届）国际体外诊断产业高峰论坛在深圳成功举办，论坛有 ...

循环肿瘤细胞——前景美好，广泛应用仍需期待 天津市宝坻区人民医院检验科副主任技师 王彦平 传统的医学理论认为，肿瘤起源于局部，是由于局部组织或器官的细胞受到各种内外因素的影响，比如放射线、化学致癌物等刺激，而产生遗传特性的改变，也就是基因上的改变而发展为肿瘤细胞。然而现在越来越多的理论却支持肿瘤起源于全身。 在遗传学理论中，基因不总是稳定的，偶尔会发生突变。每个胚胎干细胞都具有发生基因突变的能力，而基因决定细胞的性质，突变后的细 ...

1. 如何降低背景流式细胞实验优化过程中的一个关键步骤是试剂（抗体）的滴定。为了达到最佳效果，实验者必须确定抗原结合达到饱和所需抗体的最低量。这将帮助实验者提高荧光信号特异性和强度，同时尽量降低背景。如果需要同时使用多色时，滴定这一步骤也可以让实验者发现一抗和二抗之间意想不到的交叉反应。2. 如何选择对照Mouse IgG2a Isotype Control Fluorescein 010-0241千万记得设置与标记抗体同型的阴性对照， ...

自20世纪70年代DNA重组技术诞生，以重组DNA技术为核心的现代生物技术产业蓬勃发展，已有十多个基因工程药物上市。以基因工程药物为主的各种基因工程产品和细胞工程产品陆续商品化。在基因治疗中，基因载体是外源基因得以进入受体细胞的关键，其中，阳离子脂质体目前被认为是靶向性好，副作用小，稳定性好和转染效率较高的理想载体。阳离子脂质体通常由一种阳离子脂质和一种中性辅助脂质在适当的条件下复合而成，阳离子脂质体转染效 ...

与其他微粒给药系统相比，脂肪乳具有许多优点：主要辅料植物油和蛋黄卵磷脂对人体无毒，安全性好；可使用现有非胃肠道营养用脂肪乳生产线进行工业化大生产；能耐受高压蒸汽灭菌；载药量比脂质体高。脂肪乳粒径多在200-500nm之间，为亚微乳体系，药物溶解于油相，或处于磷脂壳膜层中。目前，已有包括脂溶性维生素在内的八个药物采用了脂肪乳载药技术。分别是丙泊酚、依托咪酯、前列地尔、氟比洛芬、地西泮、棕榈酸地塞米松、丁酸氯维地平以及脂 ...

海南省临床检验中心 符生苗 在向社会主义市场经济转轨过程中，医院如何沿着质量和效益的正确道路运行和发展，是目前亟待回答的问题。我国已加入世界贸易组织(ＷＴＯ)，外资的加入，使医疗市场的竞争更趋激烈。所有医院，尤其是中小医院将面临更大的挑战。医院如何在市场竞争中站稳脚跟，我觉得作为一名医院管理者，除了注重医疗质量的提高外，必须尽快增强市场意识，以营销理念来经营和管理医院、管理科室。营销观念作为企业进行市场经营决策的指导思想 ...

1.1 慢病毒技术的原理慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体，与化学合成的siRNA 和基于瞬时表达载体构建的普通siRNA 载体相比，一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用，另一方面，Lentivirus-siRNA 克隆经过慢病毒包装系统包装后，可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞，并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组，进行长 ...

WHITE PAPER: Virotherapy Process Optimization采用一系列方法将病毒工程开发用于疾病治疗已经成为一种新型的应用，该应用广泛的定义为病毒疗法，包括用于基因治疗的病毒载体(Figure 1)和具有溶瘤细胞功能的病毒(Figure 2)。虽然这些产品大部分都处在临床开发阶段，但是药物作用靶点的多样性以及未来机会的财富都是令人鼓舞的。病毒疗法是一门以病毒为基础的技术，一个重要的挑战就是在任何的时间 ...

PromoCell MSCDXF培养墓的主要特点：1、适用于骨髓/脐带/脂肪来源的MSC；2、在更短的培养时间内细胞扩增更多；3、细胞倍增速度更快；4、操作简便，基础培养基和补充剂一次性混合后，即可实现培养；5、更低的接种密度， 4000个细胞/cm2；6、在细胞传代的整个过程中，都可维持免疫表型、多能性及对T细胞的抑制能力；7、无血清、无动物源性，成分已知。优点：1、精确控制MSC的类型，自我增值或定向分化2、更低的使用成本3、降低 ...

形态学检查对细菌鉴定的导航作用 陈东科1孙长贵2 （1卫生部北京医院检验科，2解放军第117医院检验科） 细菌鉴定的原则之一就是用最少的试验完成鉴定。细菌形态学检查是最基本、简单、快速的常规鉴定方法。细菌形态学包括细菌细胞形态学和细菌菌落形态学。细菌形态学正确描述依赖于方法、培养基、培养时间、染色试剂等，培养基和培养时间不同会影响细菌的形态。观察细菌的典型形态，应该是将细菌接种在该细菌最适生长的培养基上、放入该细菌最适生长 ...

1 背景和意义从生命活动的直接执行者——蛋白质的角度研究生命现象和规律（特别是疾病防治和病理研究）已成为研究生命科学的主要手段。而这些研究往往离不开对细胞、组织或器官中含有蛋白质种类和表达量的研究。对处不同时期、不同条件下蛋白质表达水平变化的研究，识别功能模块和路径，监控疾病的生物标志物，这些研究都需要对蛋白质进行鉴定和定量。生物质谱技术的出现和不断成熟为蛋白质差异表达分析提供了更可靠、动态范围更广的研究手段。基于 ...

Q：SWATH技术的原理是什么？我为什么要做SWATH？A：SWATH采集模式是一种新型的MS/MS扫描技术，将扫描范围划分为以25Dalton为间隔的一系列区间，通过超高速扫描来获得扫描范围内全部离子的所有碎片信息，是MS/MSALL技术的扩展。SWATH技术可以用于蛋白质定量或蛋白复合体的鉴定。SWATH定量方法基于提取Transition峰面积计算出肽段含量，通过肽段含量推理出蛋白质含量。SWATH定量 ...

一、SWATH技术简介SWATH（Sequential WindowAcquisition of all Theoretical fragment ions）是瑞士苏黎世联邦理工学院的RuediAebersold 博士及其团队与AB-SCIEX于2012年联合推出的一项全新的质谱采集模式技术，是MS/MSALL技术的一种扩展。以蛋白质组学样品分析中常见的扫描范围400 ～1200 为例，每25 Dalton 作为一个扫描间隔SWATH），每个SWATH ...

蛋白质组（proteome）一词是澳大利亚科学家Williams和Wilkins于1994年首先提出的，它是指一个细胞或一个组织基因组所表达的全部蛋白质总和，是对应于一个基因组的所有蛋白质构成的整体。短短20年间，蛋白质组的研究取得了惊人的进展，这相当程度上要归功于质谱技术在蛋白质组中的应用和不断发展。同时，蛋白质组和基因组的发展是相辅相成的，凡是经过基因组测序的物种，都可以用质谱技术大规模鉴定其蛋白质组成。 ...

SCI文章投稿最重要的莫过于图片的处理。一般杂志对图片要求：图片最低分辨率300DPI，部分杂志要求不低于600DPI，点线图及柱状图部分杂志要求达800DPI甚至1200DPI。杂志要求的分辨率是指原始图片的分辨率，经过Photoshop处理后修改图片的分辨率以达到杂志的要求通常是不可取的。以下介绍组图过程中的一些个人经验。一、图片处理：图片大致包括以下2种：1、拍照的图片（一般是彩图，分辨率不低于300DP ...

不同的培养箱有不同的维护保养方法，我们应如何做好维护保养工作呢？以下是各类培养箱的维护保养方法：一、水套式二氧化碳培养箱日常维护保养：由于该类仪器经常与水和气体接触，气体内的杂质可能会进入气路管道，造成机器无法正常工作。日常工作中需要从以下几方面进行保养：经常检查水套的水 位，假如水位低就要加水;定期检查二氧化碳气瓶，不能让二氧化碳气瓶用空;检查二氧化碳的供气管道和接口有无漏气现象;定期给机器除尘，防止灰尘阻塞气道 及 ...

首先，stata的安装很简单百度上有很多，在此不再赘述。meta模块的安装如下：根据下面这段英文，依次根据顺序，找到相应的位置流程图示如下：1、打开help2、下一步3、进入Stata网站(如下图)，找到stb，再往下就对照我上面的文件一一查找吧。