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PFGE技术简介：1984年Schwartz和Cantor发明了交变PFGE技术，解决了大片段DNA （＞40 kb）差异的问题，同时提高了DNA的分辨力。此后,随着PFGE技术的不断改进,现已具有分辨出高达10Mb级DNA的能力。这一独具的高分辨力使PFGE的应用范围已涉及到几乎所有生物基因组结构的研究。工作原理：大小不同的DNA 分子在交替变换方向的电场中做出反应所需的时间不同，一般较小的分子重新定向较快，在凝胶中移 ...

在细胞和组织培养领域，从上世纪70年代起二维（2D）培养科学家已经看到其局限性，并且更多地关注三维（3D）培养的优点，目前越来越多的研究从细胞培养的平面环境中转变到三维培养。当前，虽然对基于细胞的效应研究和毒性测试中，制药工业如今最常用的依旧是2D方式，3D培养技术已在学术研究中被广泛应用。细胞增殖，分化和代谢等生理活动都严重受到微环境的影响。当前细胞生物学研究大多还是在二维平面培养进行，这种平面培养、生长方式与 ...

恶性肿瘤可通过多种途径导致血栓发生，影响肿瘤患者的生活质量和预后，血栓的形成又可以早期预示着肿瘤的发生，所以恶性肿瘤与血栓的相互关系越来越受到重视。恰当的预防血栓治疗不仅可减少并发症的发生，还可以改善肿瘤患者的预后。多种因素可以影响VTE发生，包括患者的年龄、既往是否患过VTE；肿瘤大小、肿瘤分期、手术切缘情况、血凝系统状况；治疗方式，如手术、放疗、化疗、激素治疗等。肿瘤本身会增加DVT和PE的风险，并且成为围手术 ...

EndNote 通过将不同来源的文献信息资料下载到本地，建立本地数据，可以方便地实现对文献信息的管理和使用。是一种很好的文献管理工具。在和revman5.0软件 的文献互动方面，和战友们交流一下我的经验。即通过截图来说明，如何很好的将endnote库中的文献轻松的导入revman5.0软件中，不在为参考文 献输入发愁，做到方便快捷、省时省力。希望对从事于循证的战友们有所帮助。1. 首先将endnote中已建立的文献数据库（关于此 ...

很多实验者都不bother自己洗手，酒精一喷就去实验了。我告诉大家，这是极端错误。个人经验是，你仔细洗手比喷酒精效果还好。最好的是肥皂/香皂仔仔细细的洗手，一直到手腕，指甲缝都要洗。洗两遍是一个不错的选择。然后手上喷酒精。有人穿半截袖的白大褂去做实验，每次我看到都想骂。白大褂袖口要长，最好是袖口扎紧的那种，如果不能的话，把袖口窝向手臂。裸露的手腕部分一定也要喷酒精。戴上手套后手请避免接触工作台外面，如果不得已接触，那 ...

qPCR的数据相对定量分析其实很简单。我做了很多的qPCR实验，也看了很多的资料，包括Nature protocol， AB官方的分析教程，MIQE，甚至包括一些商业化软件使用的教程及教程里面记述的原理。我在这里跟大家分享一下自己的经验，最常用，最普遍的相对定量方法就是2^-△△Ct法，该法最最简单的说就是：首先将一次实验的所有基因Ct值整理好，之后用每一组样本自身的目的基因Ct值减去自身内参基因Ct值，得到的数就是△Ct ...

近日，赛业生物科技（Cyagen Biosciences）宣布推出其全球专利技术TetraOneTM KO，一种不仅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9（把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6个月），而且避免了TALEN、CRISPR/Cas9脱靶效应困扰的革命性技术。TetraOneTM KO的出现，是ES打靶技术制备基因敲除鼠的一个重大突破。基因组编辑的技术进展传统ES打靶、TALEN和CRISPR/Ca ...

最近有同学问师兄，“最近我要做生存分析，可是我不太会，也不太懂，师兄能不能教教我”，好吧，今天开一贴，讲讲这个。有同样的问题的同学可以一起来看看，毕竟在临床、科研上，这方面知识还是很受用的。有什么想跟师兄讨论的，可以加师兄微信号：shixiongcoming，加我时，注意注明申请理由，如果申请理由是你的名字话，那你就会被师兄忽略掉。就这样吧。让我们开始征程。一、生存分析基本概念1、事件（Event）指研究中规定的生存研究的 ...

一、概述非参数检验对于总体分布没有要求，因而使用范围更广泛。对于两配对样本的非参数检验，首选Wilcoxon符号秩检验。它与配对样本t检验相对应。二、问题为了研究某放松方法（如听音乐）对于入睡时间的影响，选择了10名志愿者，分别记录未进行放松时的入睡时间及放松后的入睡时间（单位为分钟），数据如下笔。请问该放松方法对入睡时间有无影响。本例可以采用配对样本t检验，但由于样本量少，数据可能不符合正太分布，所以考虑用非参数 ...

天热了，心情难免烦躁一些。这一来WB也出鬼了，胶片上不时的出现极高的背景，整张膜上都是黑的，看上去好像是在墙壁上泼墨后留下的污渍似的。跑胶的问题？转膜？显影？……？重复……重复，重复……重复，重复，重复……直到某天早上我咬牙切齿的盯着那几条蓝色的带往下跑的时候，蓦然发现：浓缩胶漏了！从某个梳孔的角落处，溴酚蓝正直接穿过浓缩胶，进入浓缩胶和分离胶的交界处，并顺着交界线平展开来，渗透到整个交界线上。显然这将直接导致样品在整个膜里 ...

将待处理菌液盛于50毫升小烧瓶,先置于冰浴中30分钟，并在超声仪加入一些冰袋（超声仪预冷30分中）。以直径1厘米内插式探头插入菌液中（探头表面最好光滑），最好进行间歇式超声处理，探头距杯底0.5厘米----1.0厘米处不可接触杯底，也不可接触杯壁以防将杯壁超碎。.设置 开15秒 停45秒,12AM超10次左右。（如效果不佳如此反复以效果最佳定次数)（超声能量是100-350瓦.观察指标具体如下：1. 被处理细菌悬液的透明度和温度（完毕后 ...

1、 丙烯酰胺和N，N’-亚甲双丙烯酰胺，应以温热(以利于溶解双丙稀酰胺)的去离子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和1%(w/v)N，N’-亚甲双丙烯酰胺储存液丙稀酰胺29g，N，N-亚甲叉双丙稀酰胺1g，加H2O至100ml。)储于棕色瓶，4℃避光保存。严格核实PH不得超过7.0，因可以发生脱氨基反应是光催化或碱催化的。使用期不得超过两个月，隔几个月须重新配制。如有沉淀，可以过滤。2、 十二烷基硫酸钠SDS溶液：10%(w/v)0.1gSDS ...

终于把一批小鼠样品的荧光定量实验做完了，可以松口气了。期间吃过亏，也学到了很多经验。今天刚好有时间，就把这些经验写下了，跟大家分享交流，希望对跟我有相同经历的人有所帮助。先说说我吃的亏吧： 提取小鼠心脏RNA，做逆转录，然后用逆转录的CDNA做Real-time PCR。最后发现，Real-time PCR结果CT值都很大，连内参的CT值也超过了32。 当时看到这个结果就懵了。别人的Real-time PCR结果我见过，CT值一般在30 ...

Genome Engineering Using CRISPR-Cas9 SystemLe Cong and Feng ZhangAbstractThe Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats (CRISPR)-Cas9 system is an adaptiveimmune system that exists in a variety of microbes. It could be engineered to function in eukaryotic cel ...

第三军医大学大坪医院神经内科王延江教授课题组与澳大利亚南澳大学（UniSA）Xin-Fu Zhou教授课题组合作，在《PNAS》上发表研究，报道了临床上用于急性缺血性卒中的药物依达拉奉具有防治阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）的作用。AD是一种以进行性、不可逆的记忆力减退和认知功能障碍为主要表现的神经退行性疾病，是最常见的痴呆。目前全球范围有AD患者大概有3650万，预计到2050年AD患者将超 ...

1,T检验和F检验的由来一般而言，为了确定从样本(sample)统计结果推论至总体时所犯错的概率，我们会利用统计学家所开发的一些统计方法，进行统计检定。通 过把所得到的统计检定值，与统计学家建立了一些随机变量的概率分布(probability distribution)进行比较，我们可以知道在多少%的机会下会得到目前的结果。倘若经比较后发现，出现这结果的机率很少，亦即是说，是在机会很 少、很罕有的情况下才出现；那我们便可以有信 ...

1、石蜡切片和冰冻切片的比较？（1）要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片，这是今天我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片，可能会破坏组织的抗原性，如果组织的抗原性较稳定，则可作石蜡切片；但是要求做石蜡切片的，可作冰冻切片。（2）冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性，做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构，可能会使抗原弥散；切片厚度较石蜡的厚，做的片子没石蜡的漂亮。 ...

摘要：摩擦系数是医用手套的一项重要的性能指标，关系到手套使用的方便性与防滑性。本文利用济南兰光机电技术有限公司自主研发设计的MXD-02摩擦系数仪对医用手套样品的摩擦系数进行测试，并简述了设备的参数、适用范围及试验的过程，从而为企业解决如何监测医用手套摩擦系数的问题提供参考。1、意义医用手套具有干净卫生、防止手指被割破、防止病菌交叉感染等作用，是医疗卫生领域不可缺少的用品。医用手套内、外表面的摩擦系数应具有不同 ...

在细胞和组织培养领域，从上世纪70年代起二维（2D）培养科学家已经看到其局限性，并且更多地关注三维（3D）培养的优点，目前越来越多的研究从细胞培养的平面环境中转变到三维培养。当前，虽然对基于细胞的效应研究和毒性测试中，制药工业如今最常用的依旧是2D方式，3D培养技术已在学术研究中被广泛应用。细胞增殖，分化和代谢等生理活动都严重受到微环境的影响。当前细胞生物学研究大多还是在二维平面培养进行，这种平面培养、生长方式与 ...

前列地尔是当今国际上公认的新一代广谱内源性药物，临床用于多种疾病的治疗或辅助用药，我国每年的前列地尔制剂销售额达20亿。前列地尔也叫前列腺素E1，水溶性差，不耐热，对血管有强烈刺激性。前列地尔脂肪乳可以克服粉针剂药物利用度低，副作用大的缺陷。然而，由于前列地尔特殊的理化性质，普通的脂肪乳载药量低，热压灭菌过程中药物会转化为前列腺素A。PC-98T是日本丘比株式会社专为前列地尔而研制出的一款乳化剂，是磷脂酰胆碱含 ...