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全新 ANCA 荧光判读方式 筛查确认一步到位

ANCA血清学诊断产品,可以辅助临床诊断ANCA血管炎系列疾病(例如肉芽肿性血管炎、显微镜下多动脉炎、嗜酸细胞性肉芽肿性多血管炎、急性进行性肾小球肾炎等)、其他ANCA相关疾病如溃疡性结肠炎、原发性硬化性胆管炎。ANCA荧光升级推荐产品(FA 1201-13),选用创新性基质“HEp-2细胞+ 粒细胞”,结合独特生产工艺,实现创新性基质的荧光模型判读,确保结果准确:● 新基质凸显粒细胞,ANCA荧光模式更易分辨●轻松排除ANA干扰, ...

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用于RNAi的慢病毒包装简要程序

慢病毒包装简要程序:以六孔板中的1孔为例,每个样品需要1×106个293FT细胞。1、取1.5ml灭菌EP管,加入1.5μg包装混合质粒和0.5μg表达质粒以及250μl的无血清Opti MEM。轻柔混匀,室温孵育5min。2、取1.5ml灭菌EP管,取9μl 脂质体2000l溶于250μl无血清Opti-MEM I培养基中。轻柔混匀,室温孵育5min。3、将DNA溶液和脂质体溶液轻柔混匀。室温孵育20min4、用胰酶消化并记数2 ...

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提取RNA及用DEPC去除RNase的实验总结

快速的操作,低温环境,少量取上清。主要是抽提之后吸取上清时要特别小心,只要不把蛋白层吸出来就不会有RNase污染。分子克隆第二版343页,上关于提取RNA所用的玻璃容器的处理方法,是用前180度干烤8小时或更长时间;另一种方法是0.1%的depc水浸泡(37度2小时),然后灭菌水淋洗数次,100度干烤15分钟,然后高压灭菌除去depc。我们实验室一直是用170度考4小时,且不准离人,不准过夜,可能是怕烤箱长时间高温, ...

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qPCR 问题集锦 之 武侠版 第一季第1集

师兄有云: 话说,那张无忌在山谷里练了五年九阳神功,相当于读了一 PHD,后来又在明教暗道里搞了个post-doc,出道立马名动江湖,打的第一份工就是接管了一个破落实验室。接手实验室的第一天,无忌就发现手下小昭是个既有心机,又有城府的小姑娘,长得好看且不说,还有一身功夫,还精通八卦五行之术。但就是荧光定量 PCR 老是做不好。咋办捏?一天,无忌君找到小昭无忌曰:“小昭,你觉得现在做实验有什么困难么?”小昭曰:“无忌哥,我好多问题,就是不知 ...

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统计第一篇:SPSS 医学统计基础 认识 αβ

师兄曰:要了解生物统计在临床试验中的应用,首先需从认识α,β开始,就是这两个不起眼的符号贯穿了临床试验生物统计的始终。α和β的定义是比较拗口的,特别是对于那些没学过统计的人来说,这两个东西是怎么也搞不明白具体是怎么回事。虽然比较拗口,但咱还得在这里重复一下α和β的科学定义:α又称第I类错误或显著性水平,指拒绝了实际上成立的H0,β又称第II类错误,指不拒绝实际上不成立的H0。对应β的还有一个概念叫power,国 ...

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RNAi技术讨论

1.在设计RNAi实验时,可以先在以下网站进行目标序列的筛选: http://www.ambion.com/techlib/misc/siRNA_finder.html http://katahdin.cshl.org:9331/RNAi/ http://www.ic.sunysb.edu/Stu/shilin/rnai.html2.RNAi目标序列的选取原则: (1)siRNAs with lower G/C content (35-55%) are more active than t ...

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提取RNA及用DEPC去除RNase的个人总结

快速的操作,低温环境,少量取上清主要是抽提之后吸取上清时要特别小心,只要不把蛋白层吸出来就不会有 RNase 污染。分子克隆第二版343页,上关于提取RNA所用的玻璃容器的处理方法,是用前180度干烤8小时或更长时间;另一种方法是0.1%的depc水浸泡(37度2小时),然后灭菌水淋洗数次,100度干烤15分钟,然后高压灭菌除去depc.我们实验室一直是用170度考4小时,且不准离人,不准过夜,可能是怕烤箱长时间高温,线路 ...

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2年期前列地尔注射液相比于1年期处方上有何不同

2014年1月,日本富士制药株式会社修订了其前列地尔注射液5μg/10μg的药品说明书,其中药品保质期从原来的14个月延长至2年。在困扰市场已久的保质期问题上实现了重大突破,可以视为属于新一代的前列地尔制剂。富士制药的新配方,摒弃了添加大量油酸弥补高纯蛋黄卵磷脂乳化性能不足的做法,采用负电荷磷脂PG取代油酸,安全性和实际效果均获得了很大的提高。以下为1年期前列地尔注射液与2年期前列地尔注射液处方对比:表一:1 ...

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超快荧光寿命技术在蛋白动态结构变化中的应用

Rapid mixing accessories to perform stopped flow measurements have found application in characterising interactions and reactions occurring in solution. Reactants are expelled from syringes, mixed and injected into a flowcell. The flow is then stopped with the ensuing reaction / i ...

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超亲和性的新型亲和标签系统“PA Tag System”

大阪大学蛋白质研究所藤井勇树、高木淳一东北大学大学院医学系研究科金子美华、加藤幸成前言在分析蛋白质的功能时最重要的是如何得到高纯度的蛋白。现今提纯蛋白最常用的方法是亲和标签系统。被统称为「Epitope Tag」的肽标签以及其单克隆抗体组成的系统有FLAG、HA、Myc等多种标签。但是,每个标签系统都有优缺点,并不存在完美的标签系统。于是,在克服了众多难关后我们终于开发出有超高亲和性的新型亲和标签系统“PA Tag Sys ...

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你了解基因表达调控吗

作为遗传信息中心法则的三大掌门人,搞不清楚他们之间的那些纷争,怎么在江湖上混呢?

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Persongen 新型 NK 细胞扩增技术

NK细胞又称为自然杀伤细胞,属于大颗粒淋巴细胞,来源于骨髓,占外周血淋巴细胞的5%~15%,是重要的免疫细胞。科学家在1975年首次鉴定到了NK细胞,这类细胞能够在缺少T、B细胞的情况下直接杀伤肿瘤细胞。与具有细胞毒性的CD8+T细胞不同,NK细胞杀伤肿瘤细胞时不需要预先致敏可以直接杀伤MHC阴性的肿瘤细胞,这使得NK细胞在过继细胞免疫治疗中被广泛应用。但NK细胞在外周血淋巴细胞中所占的比例较低,所以有必要建立一 ...

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RT-PCR、QPCR、Real-time PCR、real-time RT-PCR你真的区分的开吗?

多少同学能将 RT-PCR、Realtime-PCR、QPCR区分清楚?有多少同学还在犯晕?今儿这贴,师兄就带你区分区分,人家破除迷信,咱就来个破除 PCR 迷雾。什么是 RT-PCR?逆转录PCR(reverse transcription PCR)或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通 ...

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CCK8 新手村:实验心得整理

一直都像个新手,从未老道过。所有新手的迷茫与无奈我最能体会。看到园子里有一些同学在问有关CCK8试验的事情,当初我也和他们一样,像个被蜘蛛丝缠住头的迷茫苍蝇一头扎进园子里,期待能找到些解决谜团的只言片语。希望我写的这些非专业文字能够帮助那些在实验室里没有前行者指点迷津的筒子们。当然仁者见仁智者见智,我写的只是个人实验心得,仅供参考。欢迎大家拍砖共同进步。实验是简单的,道路是曲折的,时间就是用来浪费的,科研就是自 ...

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师兄攻略:流式细胞术第一期

流式细胞仪和流式细胞术指南历史:从1968年最早的商品化 流式细胞术(FC) 和荧光激活细胞分类术(FACS)诞生以来,它们已得到大大改进。但要成为实验室广泛接受的技术,除成本因素外,还存在不少障碍。技术上的问题主要是细胞内低丰度分子的检测,缺少“通用”细胞通透物质,细胞自发荧光的干扰效应,荧光分子间发射光谱的重叠,以及缺少可识别目标分子的试剂。特别是对于细胞分拣来说,由于液滴的形成收集、分拣细胞重分析或 培养前的稀释,以及为获 ...

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SPRi在核酸适配体开发中的应用

Monitoring of interactions between aptamers and human IgE by Surface Plasmon Resonance imagingG. Lautnera, R. Gyurcsanyia, K. Mercierb, E. Ly-Morinb(a) Budapest University of Technology and Economics, Department of Inorganic and Analytical Chemistry, Budapest, Hungary(b) HOR ...

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如何看流式细胞术结果中的图

FCM数据的存贮的方式是FCS2.0(flow cytometry standard),采用列表排队(List Mode)方式。易于加工处理分析,但缺乏直观性,数据的显示通常有一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等几种;由数据还可以做出标准曲线进行定量分析。Q1:坐标轴的意义?1、 单参数直方图每一个细胞单参数的测量数据可以整理成统计分布,以直方图的方式来显示。在图中,横坐标表示荧光信号或散射光信号相对强度的值,其单位是道数(cha ...

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流式细胞术常见问题集锦

1、流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的?FL2-W是只检测荧光的脉冲宽度, FL2-H是指脉冲高度。通常在做细胞周期分析时应用,用于去除粘连细胞。2、流式同型对照怎样选择?同型对照(Isotype Control):使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白,用于消除由于抗体非特异性结合到细胞表面而产生的背景染色。如果一抗是多抗,可以用an normal serum(与一抗相同的正 ...

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Nature:基于CRISPR/Cas系统通过直接注射单细胞的胚胎来介导大鼠基因编辑

CRISPR/Cas-mediated genome editing in the rat viadirect injection of one-cell embryos通过直接注射单细胞胚胎,利用CRISPR/Cas 技术介导大鼠基因编辑Conventional embryonic stem cell (ESC)–based gene targeting, zinc-finger nuclease (ZFN) and transcription activator–like effector nucle ...

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meta 分析攻略之提高 meta 查全率

文献检索是科研的基本功,阅读文献是科研人员获取科研信息的重要途径。评价文献检索质量的两个最重要的指标是查全率和查准率。查全率指的是检出的相关文献 量与系统文献库中相关文献总量的比率,它反映该系统文献库中实有的相关文献量在多大程度上被检索出来。查全率 = 检出相关文献量 / 文献库内相关文献总量× 100% 。查准率指的是是指检出的相关文献量与检出文献总量的比率,是衡量信息检索系统检出文献准确度的尺度。查全率 = 检出的相关文献篇数/检出的全部 ...

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