DNA及寡核苷酸探针在原位杂交组织化学中的应用 一、DNA探针的应用 虽然一般认为DNA探针敏感度不如cRNA探针,但在病毒的检测等领域中DNA探针仍得到广泛的应用。 在原位杂交细胞化学的操作步骤方面与cRNA探针基本相同,所不同的是:(1)杂交时需先在高温80~95℃短时处理,使DNA探针及细胞内靶DNA变性,解离成单链,迅置于冰上冷却。然后置于37℃~42℃杂交过夜。(2)RNA酶的溶液的冲洗不能减低背景,因此,在操作步骤中 ...
基因诊断和基因治疗北京大学医学部 李本富 基因(gene)是细胞核内DNA螺旋链上的功能性片断,指示细胞去完成某一种特殊使命,它也是遗传的基本单位。1985年美国科学家率先提出人类基因组计划(HGP),并于1990年在美国正式启动,英国、法国、德国和日本的科学家相继加盟,中国也于1999年获准加入该计划。经过众多科学家的艰辛劳动,终于于2000年6月26日国际人类基因组计划公益协作组宣布:人类生命的蓝图—基因组序列“工作 ...
中华人民共和国国家标准GB 15193.12一91体外哺乳类细胞(V79/HGPRT)基因突变试验V79/HGPRT gene mutation test-------------------------------------------------------------------------1主体内容与适用范围1.1本标准规定了体外哺乳类细胞(V79/HGPRT)基因突变试验的基本技术要求。1.2本标准适用于需要进行食品安全性评价的用作或用于食品的化学物质。2原理2.1细胞在正常培养条件下 ...
詹姆斯·沃森《双螺旋——发现DNA结构的故事》双螺旋——发现DNA结构的故事(1)双螺旋——发现DNA结构的故事(2)双螺旋——发现DNA结构的故事(3)双螺旋——发现DNA结构的故事(4)双螺旋——发现DNA结构的故事(5)沃森和克里克:核酸的分子结构——脱氧核糖核酸的结构沃森和克里克:脱氧核糖核酸结构的遗传学意义斯坦特 NA双螺旋与分子生物学的崛起首页 新书推荐 阅览室 诺贝尔奖 院士录 人与医学 生殖医学 中医 讨论区詹姆斯·沃森《双螺旋——发现DNA结构的 ...
生物通报道 为准确评估血浆中的miRNA水平,来自丹麦的研究人员对市场上常用的三个miRNA表达谱平台进行了比较。该研究成果发表在近期的《BMC Genomics》上。近几年来,microRNA(miRNA)的研究持续升温。在临床上,miRNA有潜力成为癌症的生物标志物。尽管miRNA在组织中很丰富,但它们在血浆中还是很稀少的。据报道,血浆中的总RNA水平大约在6-300 ng/ml,而miRNA只占了极小的一部分。因此,对于 ...
反义技术一个更为“狡猾”策略:RNA错折叠科学家发明了一种新型的反义技术,从而为敲除RNA提供了一种更为便利而费用也更为低廉的方法。研究人员已成功在试管中从一种引起鹅口疮(一种发生于口、舌和喉部的真菌感染)的细菌中除掉了一个RNA分子。这项新技术是由罗切斯特大学的化学家们发明的,该机彻底改变了整个RNA分子的动力学,有点象靠改变风筝的尾巴来改变风筝在风中的飞行路线。罗切斯特大学已就这一技术提出了专利申请。有关 ...
DNA和命运——人类行为的天性和教养DNA and Destiny : Nature and Nurture in Human Behavior格兰特·斯蒂恩(R. Grant Steen) 著李恭楚 吴希美 译作者简介格兰特·斯蒂恩于加利福尼亚大学获得博士学位,然后在约翰霍普金斯和加利福尼亚技术研究所完成了进一步深造。如今,斯蒂恩博士是田纳西州圣尤地儿童研究院的资深学者,主要从事血液病和癌症的研究。他于1993年创作的《细胞的阴谋》被《新书目》赞誉为“对每个人都十分 ...
来源大鼠(RAT)学名Rattus norvegicus,在生物分类学上属脊椎动物门、哺乳动物纲、啮齿目、鼠科、家鼠属、褐家鼠种。生活习性生长发育:新生大鼠体重约5-6克,45天体重可达180克以上,此时可供试验用。成年雄性大鼠体重可达300-800克,此行可达200-400克。活动规律:大鼠喜啃咬,白天常挤在一起休息,夜间活动,晚上活动量大,采食量多,食性广泛,喜肉食。对光照、噪音敏感。繁殖特性:大鼠2月龄性成熟,性周期4-5天, ...
最近我在做一个E.coli genomic library construct,遇到一些问题,向论坛上的大侠请教。请帮忙看看问题出在哪里。万分感谢!我的方法流程如下:1。用SDS和蛋白酶K提取E.coli genomic DNA (用的是E.coli的一个突变菌株)2。insert: Sau3AI digest E.coli genomic DNA, partail digestion, to get 2kb-5kb, 这一步我摸过酶切时间梯度,用0.1unit Sau3AI,40ul 反应 ...
★ 慢病毒包装操作步骤:1. 在转染的前一天,传代准备细胞:用0.25%胰蛋白酶消化293T细胞,以含10%血清的DMEM培养基调整细胞密度后,按照每10cm细胞培养皿接种6~8×106cells到10cm细胞培养皿中,置于37℃,5% CO2 培养箱培养,16h~24h后待细胞密度生长到80%~90%时即可用于转染。 2. 第二天,在转染前2~4h,用5ml不含P/S的完全培养基换液(DMEM+10% FBS)。 3.按照以下实验步骤来进行转染: A、加入500ul ...
一个廉价、稳定的象计算机那样,可以对生命科学与医学中的成千上万的生物化学反应过程进行集成并执行的芯片,成为人们梦寐以求的东西。因为这些芯片能替代重复而烦琐的实验室工作,并做到微型化,微流控制,相对传统实验而言能提供精确灵敏的检测方法,极低的花费,和占用很小的空间,从而实现对DNA、RNA、多肽、蛋白质以及其它生物成分进行高效快捷的测试和分析。而这一切已经由梦成为现实.简单的说芯片技术是通过微加工工艺同时将大量的 ...
摘要:生物通 www.ebiotrade.com 对于富含miRNA的样品,如大部分组织样品,TaqMan和miRCURY平台都很有可能产生好的结果。然而,在对低丰度miRNA样品(如血浆样品)进行图谱分析时,miRCURY平台的高灵敏度和线性似乎更胜一筹。生物通报道 为准确评估血浆中的miRNA水平,来自丹麦的研究人员对市场上常用的三个miRNA表达谱平台进行了比较。该研究成果发表在近期的《BMC Genomics》上。近几年 ...
导读:来自中山大学、中国科学技术大学和哈佛医学院的研究人员在新研究中开发出了一种新型的分子传递平台,利用该平台可克服当前将基于RNA的基因沉默技术用于癌症治疗的一个重要障碍:确保治疗能到达正确的位点并在该处停留。RNA诱导的沉默复合物来自中山大学、中国科学技术大学和哈佛医学院的研究人员在新研究中开发出了一种新型的分子传递平台,利用该平台可克服当前将基于RNA的基因沉默技术用于癌症治疗的一个重要障碍:确保治 ...
首先要确定是要做瞬时转染还是稳定转染?若为瞬时转染,就是一次性转染完毕后检测分析目标的基因表达或者蛋白.若为稳定转染,应先判断是用质粒进行转染还是用慢病毒进行转染。如果选择质粒,就得根据你用的质粒选择筛选药物,做药物筛选浓度就得两个礼拜左右(在做转染之前应先确定最佳筛选浓度)。转染后,将转染的细胞进行药物筛选,挑选出单克隆细胞群.再分个在96孔板,然后继续扩增培养..下面为有关脂质体2000转染的资料:LIPOF ...
短发夹RNA (small hairpin RNA,shRNA)可在细胞中被加工成siRNA。设计shRNA时,shRNA中两个反向重复序列的设计原则与siRNA序列的设计相同(可参考Transheep SiRNA序列的设计方法),需要重点考虑的是shRNA 环序列的长度及组成,而且环序列不能与靶基因内的其它序列具有同源性。1 .shRNA环序列的长度一般来讲,设计shRNA时选择3~10 nt长度的发夹环均可。Brummelkamp等& ...
请按格式修改!!!!关于同裂酶的讨论同裂酶,国内外比较一致的定义,是来源于不同物种但能识别相同DNA序列的限制性内切酶,切割位点可以相同也可以不同。不过国内和国外在同裂酶的定义及其定名上,随不同的人有许多差异。国内外还有另一种定义,称同裂酶是来源于不同物种但能识别相同DNA序列且切割方式相同的酶。经网上检索,这两种定义出现的比例均较大,均具有一定的代表性。国内如宝生物、上海申能博彩等单位的资料上,将上述两种小类又 ...
PurposeMolecular risk stratification of acute myeloid leukemia (AML) is largely based on genetic markers. However, epigenetic changes, including DNA methylation, deregulate gene expression and may also have prognostic impact. We evaluatedthe clinical relevance of integra ...
2006.04月《PLoS Biology》刊登了此项技术:title: DNA Detection Using Recombination Proteinsabstract: DNA amplification is essential to most nucleic acid testing strategies, but established techniques require sophisticated equipment or complex experimental procedures, and ...
各位大侠帮忙分析下!谢谢!gb|ABO31000.1| tumor protein p53 Length=77 Sort alignments for this subject sequence by: E value Score Percent identity Query start position Subject start position Score = 91.3 bits (225),Expect = 1e-20, Method: Compositional matrix adjust. Identities = 43/44 (98%),Posi ...
我们实验室有PLVX 和PCDF 两种慢病毒载体,前者没有其他的辅助质粒,不知道哪些大侠用过这种载体系统,能不能共享下辅助质粒呢。有的话尽快联系我哦,QQ869055498data:image/png;base64,iVBORw0KGgoAAAANSUhEUgAAAh8AAAHVCAYAAABRxpmeAAAgAElEQVR4AeydBVhUXRPH/zSoGGCBqCCC3d3Y3d3dYuf32t0tFmKLL ...