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该方法适用于新鲜和冷冻标本 1.将组织(10-20mm)切成1-2mm的碎片，用缓冲液或培养液浸湿。 2.用1ml缓冲液或培养液预洗Medicon 二遍。 3.将组织和1ml缓冲液或培养液放入到Medicon中，盖上盖子，将Medicon 插入到Medimachine中。 4.降解组织。降解组织的时间长短依赖于组织类型。(参见降解时间表)。 5.用注射器通过 Medicon上的注射器接口将上清吸 ...

线粒体膜电位（MMP）：使用几种染料中的其中一种就可以检测到细胞在凋亡过程中MMP的降低，如双氰基-双己氧基羰基靛蓝，它能够隐藏在活细胞的线粒体内。当MMP体系崩溃时，细胞的荧光就会减少。 磷脂酰丝氨酸（PS）在细胞表面的分布情况： PS一般分布在质膜的内侧上。在细胞凋亡过程中，PS残余物会曝露在细胞表面。这种变化可以通过复合蛋白钙依赖的磷脂结合蛋白V与PS结合来进行检测。所使用的细胞必须是未经修 ...

1.保存血清最好的办法？ 我们建议血清应保存在-5℃至-20℃。若你一次无法用完一瓶，建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。 2.如何解冻血清才不会使产品质量受损？ 我们建议您将血清从冷冻箱中取出后，先置于2-8℃冰箱中使之溶解，然后在室温下使之全溶。但必须注意的是，溶解过程中必须规则地摇晃均匀。 3.血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理？ 血清中沉淀物的出现有许多原因 ...

1．培养液准备：取15ml培养瓶数个，每瓶内分别充入5ml培养液（pH 7.2），内含：1640培养液（含10％～15％小牛血清），PHA 0.1ml，青霉素100单位和链霉素100微克/毫升 培养液 2．抽血针管准备：取2～5ml针管一支，在消毒后的无菌操作台或无菌操作箱中安装好注射器，无菌抽肝素（100 U/ml BBS）少许湿润针管，如动作迅速不用肝素亦可。 3．采血：用棉签75％酒精给患者 ...

Ⅰ、样品准备　准备以下一种或几种样品A、组织单细胞悬浮液（如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞）B、组织培养细胞C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞Ⅱ、反应体系－DNA低渗缓冲液柠檬酸三钠 　 　　0.25gTriton-X 100 0.75mlPropidium iodide 0.025g核糖核酸酶　　　　 　0.005g蒸馏水　　　　　　　　250ml我 ...

直接培养法：（适于培养含纤维少的软组织）1．在含有少量培养液或Hanks液的容器中，用锋利刀片将组织反复切割成碎块。2．把组织碎块连同液体注入离心管中，再补加少许培养液，用吸管吹打片刻，置试管架3～5分钟。吸除上层液可排除非乳腺细胞部分。重复2～3次。3．末次处理结束后，向沉降管中再补加培养液，用吸管稍吹打，使沉降物重悬。不待细胞团块下降立即通过3～4层无菌纱布滤入另管中。4．调整好适宜密度，接种 ...

1）染色体显带 显Q带法 1. 漂洗：取经过干热预处理或已老化的染色体标本，置于pH6.0缓冲液中浸5~10分钟。 2. 染色：浸入pH6.0的GM或QD染液中5~10分钟。 3. 漂洗：浸入新鲜pH6.0缓冲液中漂洗两次，每次5分钟。 4. 观察：向标本染色体面滴1~2滴新鲜缓冲液，覆以盖片（避免出气泡），置荧光显微镜下观察。 显G带法 胰酶-Giemsa混合显带法 1．预处理：取中期染色体标 ...

1）尼龙毛柱的制备 1．取直接3D，长度约10cm的尼龙毛，用0.2mol/L HCl浸泡处理过夜。用双蒸水洗净HCl，置37℃烘干备用。 2．称取50mg尼龙毛，均匀分散，置Hanks液中浸泡。取1ml注射器，出口接塑料管并夹住。将尼龙毛均匀填塞入注射器中，排净空气，柱高约5～6cm。此柱可分离约2×107细胞。将柱置－20℃可保存2～3个月。 2）分离细胞 1．取分离的单个核细胞，用细胞培 ...

1．取材：妊娠后第13天取材，取数个同窝胚胎，去头和内脏，在无菌条件下剪碎至米粒大小，再用0.25％胰蛋白酶（含0.01％EDTA）37℃消化30分钟，滤过、低速离心、吸除消化液、加入营养液、制备成细胞悬液、接种入75cm/培养瓶中，接种密度10～20×106/75cm，37℃培养2～3天，在顺利情况下能迅速长满瓶面。2．贮存：选大批生长状态良好的细胞冻存，储以备用。3．致癌物处理：取冻存细胞，解 ...

线粒体荧光探针信息大全 （Probes for Mitochondria）包括各种常用探针，如JC-1，JC-9，TMRM，TMRE等Mitochondria are found in eukaryotic cells where they make up as much as 10% of the cell volume. They are pleomorphic organelles with ...

1．细胞：选对数生长期细胞，收集细胞24小时前换液一次。2．计数：按常规方法把细胞制成细胞悬液，计数，令细胞密度达5×106/ml，离心去上清，吸入离心管中。3．冻存液：先用培养液9分＋DMSO 1分（或甘油）配成10％的DMSO冻存液，按上法一滴滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。4．分装：分装入无菌安剖中，每安剖加1.5毫升细胞悬液。5．封口：用塑料安剖时拧紧瓶口即可；如用火焰封闭安 ...

一、原理 骨髓染色体标本制备通常用于白血病患者，特别是慢性或急性粒细胞性白血病，因为骨髓反映粒系统细胞增生情况，这些病人不宜用外周血。即使是淋巴细胞性白血病，也不主张用外周血，因为加PHA刺激外周血培养，只能获得正常淋巴细胞分裂相，并不能反映那些病理淋巴细胞的染色体改变。 骨髓细胞属不断增殖的细胞，培养可分短期培养和直接制片法，无论哪种其培养液中均不需加PHA。 二、用品和试剂 同外周血染色体制备 ...

一、原理 1976年Goodpasture等应用银染色技术，使9种哺乳动物的核仁组织者区（NORs）特异性的染为黑色，该技术被称为Ag-As的银染技术，银染色阳性的NORs被称为Ag-NORs，与Hsu等人用原位分子杂交得到的结果比较，表明Ag-NORs就是18S+28S核糖体基因（rDNA）的分布区，后证实染色的不是rDNA基因本身，而是与rDNA转录有关的一种酸性蛋白。因此，银染色的是 ...

摘要目的: 进一步探讨促凋亡蛋白Bid 在肝癌发生发展过程中的作用.方法: 应用基因毒性化学剂二乙基亚硝胺(diethylnitrosamineDEN)制备肝癌动物模型通过阻断肝细胞凋亡信号传导途径观察肝癌发生过程中肝细胞的增生指数(BrdU LI)与凋亡比率(AI)及与肿瘤发生的关系.结果: (1)在DEN用药后的第3 d 和第10 d 野生型小鼠肝细胞BrdU标记指数和凋亡细胞百分比分别明显高 ...

一、配制用水 培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。 二、培养基 培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2～7.4，若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能 ...

广东省中医院麻醉科（广州市，510120） 项红兵 招伟贤华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科（武汉市，430030） 董航 疼痛敏化调控的细胞机制尚未阐明。丝裂原活化蛋白激酶(mitogen　activated protein kinases，MAPK)家族是将胞外刺激信号转换至胞核内产生转录和翻译后效应的细胞信息传递的共同通路之一，其在疼痛敏化调控的病理生理变化中起了重要作用。 MAPK； ...

基本原理 ：本方法是通过促细胞分裂剂与细胞表面受体相互作用，在体外触发细胞的多克隆激活。根据所使用的促细胞分裂剂的不同，应答细胞可以是T淋巴细胞、B淋巴细胞，或两者同时，或者是单核细胞。 细胞激活可以通过细胞增殖、细胞因子分泌、表面抗原表达和/或细胞体积的增加进行检测。例如在使用B细胞激活剂时，可以通过多克隆免疫球蛋白的分泌进行检测。表1 常用的促细胞分裂剂和多克隆淋巴细胞激活剂 ...

肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置，首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。一、组织培养肿瘤细胞生物学特性肿瘤细胞与体内正常细胞相比，不论在体内或在体外，在形态、生长增值、遗传性状等方面都有显著的不同。生长在体内的肿瘤细胞 ...

1． 临床意义心肌梗塞、脑血管血栓形成、深静脉血栓形成、脑栓塞和肺栓塞等血栓性疾病在中国有很高的发病率，也是致死的重要原因。血小板活化是血栓形成的重要环节，检测血小板的活化状态可辅助诊断和监控血栓性疾病，对判断血栓前状态意义也非常重大。2． 检测原理静止状态的血小板内分布着多种颗粒，如a颗粒、溶酶体颗粒等。这些颗粒表面存在着一些特定蛋白，如a颗粒表面有CD62p抗原，溶酶体颗粒表面有CD63抗原。 ...

细胞分裂素在植物生长和发育过程中通过调节细胞分裂和细胞分化起着非常重要的作用。尽管经过几十年的生物化学和遗传学研究，对细胞激动素作用机制和信号转导途径的了解仍极为有限。我们采用一个新颖的功能获得性遗传筛选系统，已分离鉴定了数个拟南芥的细胞分裂素信号转导突变体（pga突变体）。pga属于条件性功能性获得性突变，其靶位基因的表达受到化学诱导剂（哺乳动物雌激素；雌激素对植物的正常生长发育无可检测到的影响 ...