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我做质粒小量提取,刚开始的几次实验都没有理想的结果,分析来分析去发现问题可能是培养时间的问题:将菌种从-70度接到LB培养基37度过夜,再用此菌液涂平板获得单克隆,用EP管取1.5毫升LB培养基,用接种环每挑一个菌落每接种一管(将挑到的菌落全洗下去),37度培养约13个小时,直接按照"分子克隆"提供的碱裂法提,结果一无所获.后来在师兄的提醒下我想到是否是因为培养时间过长而使质粒缺失?于是我测了此菌的大致生长曲线,发 ...

1．目的学会用限制性内切酶切割质粒DNA。2．原理II型限制性内切酶能识别双链DNA内部的特殊序列并在识别位点处将双链切断，形成粘性末端或齐平末端，通过电泳酶切后的DNA混合物能够确认和分离酶切片段。3．器材旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，1.5ml微量离心管，双面微量离心管架，水漂，恒温水浴。4．试剂Pinpoint™xa-3质粒，EcoR V，BamH I，内切酶缓冲液（10×），10×电泳加样缓冲液，荧光染料。5．实验 ...

一，酵母表达系统毕赤酵母表达系统（invitrogen公司）：分泌型质粒pPIC9K，宿主菌毕赤酵母GS115分泌型质粒pPICZalpha （甲醇诱导）宿主菌毕赤酵母x33分泌型质粒pHIL-S1二，原核表达质粒表达宿主菌为BL21(DE3)系列带His标签（N端）：PET5-(a)氨苄抗性带His标签（N端）：PET28-(a)卡那抗性带His标签（C端）：PET24-(b)卡那抗性带His标签（C端）：PET21-(a)氨苄抗性 ...

一、防止RNA酶污染的措施1. 所有的玻璃器皿均应在使用前于180℃的高温下干烤6hr或更长时间。2. 塑料器皿可用0.1% DEPC水浸泡或用氯仿冲洗（注意：有机玻璃器具因可被氯仿腐蚀，故不能使用）。3. 有机玻璃的电泳槽等，可先用去污剂洗涤，双蒸水冲洗，乙醇干燥，再浸泡在3% H2O2 室温10min，然后用0.1% DEPC水冲洗，晾干。4. 配制的溶液应尽可能的用0.1% DEPC，在37℃处理12hr以上。然后用高压灭菌除去残留的DEPC。不能高压灭菌 ...

1．目的学习SDS-PAGE的基本操作，学会用SDS-PAGE检测蛋白。2．原理蛋白质在加热变性以后与SDS结合，带上负电荷，在电场的作用下，向正极移动，结果按分子量大小排列在胶板上，含量多的蛋白带纹粗。3．器材旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，1.5ml 微量离心管，双面微量离心管架，台式冷冻离心机，制冰机，超声波破碎仪，电磁炉，电泳仪，垂直电泳槽及配套的玻璃和密封条、梳子等。4．试剂SDS（十二烷基磺酸钠），Acr（丙烯 ...

甲基化特异PCR（Methylation-specificPCR）资料大全关键词：甲基化特异PCR、DNA甲基化、Methylation-specificPCR、甲基化特异PCR文献、甲基化特异PCR引物设计、甲基化特异PCR实验注意事项第一部分：甲基化特异PCR文献5 undefined A! Y" w1 g8 \$ W9 E8 {/ undefined V; t! Z: undefined Q6 ^+ Q4 c( l7 U( F' g, b8 o. K- j: w% a. ?: o7 第二部分：实验protocol第三部分：甲基化引物设计http://www.urogene.org/methpr ...

丙烯酰胺凝胶电泳　　聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳方法。在这种支持介质上可根据被分离物质分子大小和分子电荷多少来分离。聚丙烯酰胺凝胶有以下优点：①聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和N，N'甲叉双丙烯酰胺聚合而成的大分子。凝胶有 格子是带有酰胺侧链的碳-碳聚合物，没有或很少带有离子的侧基，因而电渗作用比较小，不易和样品相互作用。②由于聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的物质，在聚合前可调节单体的浓度比，形成 不同程 ...

本人有大量的资料资源，有需要的朋友欢迎来交换，邮箱：1739507720@qq.com：质粒类别抗性详细信息pGEX4T-1大肠杆菌质粒AmppGEX4T-2大肠杆菌质粒AmppGEX4T-3大肠杆菌质粒AmppGEX-6P-1大肠杆菌质粒AmppGEX-6P-2大肠杆菌质粒AmpPGEX-KG大肠杆菌质粒AmppGEX-6p-Caspase大肠杆菌质粒AmppET3a大肠杆菌质粒AmppET3b大肠杆菌质粒Am ...

ReviewNature Reviews Genetics 8, 573-587 (August 2007) | doi:10.1038/nrg2141Engineering targeted viral vectors for gene therapyReinhard Waehler1, Stephen J. Russell2 & David T. Curiel1 About the authorsTop of pageAbstractTo achieve therapeutic success, transfer vehicles ...

Amaxa Nucleofector转染平台一览表高级平台96孔平台高通量平台基础平台设备4D Nucleofector 系统96孔 shuttle转染仪HT Nucleofector系统Nucleofector II 转染仪通量低-中通量（1-16孔）低-中通量（1-96孔）高通量（384孔）低通量（1孔）体积20μl+100μl20μl20μl100μl电极材料导电聚合物导电聚合物导电聚合物铝离子小细胞数(20μl)2 x 104 --- 1 x 1062 x 104 --- 1 x ...

光度计测量的转换:双链DNA (ds DNA)：A260 = OD260 = 1 相当于50 µg/ml溶液单链DNA(ss DNA)：A260 = OD260 = 1相当于33 µg/ml溶液RNA：A260 = OD260 = 1相当于40 µg/ml溶液参考文献：Freifelder, D., Physical Biochemistry: Applications to Biochemistry & Molecular Biology, W.H. Freeman and Company, CA, 1982, p. 494-536.核酸分子量计算方程式：吸光度 ...

Single Nucleotide Polymorphisms: Methods and Protocols 第二版已经可以下载到了。奉献给大家。Single Nucleotide Polymorphisms: Methods and ProtocolsAnton A. Komar "Single Nucleotide Polymorphisms: Methods and Protocols"Humana Press | English | 2009-09-15 | ISBN: 1603274103 | 464 pages | PDF | ...

本内容需要回复后才能下载！ 本书版权归作者所有，请于下载后24小时内删除基因的分子生物学（2013高清英文版）Molecular Biology of the Gene, 7th Ed名称Molecular Biology of the Gene作者James D. Watson, Tania A. Baker, Stephen P. Bell, Alexander Gann,Michael Levine, Richard Losick版本7, 插图版出版商Benjamin-Cummings Publishing C ...

各位师兄师姐，本人在实验当中碰到一问题，不知道如何让解释好，想请教一下。实验设计向一肿瘤细胞株中转入一外源基因，采用瞬时转染的方法，流式检测对细胞周期的影响，结果如下：转染48hG0/G1（%）S（%）G2/M（%）未转染组62.1630.117.72空载体组52.3828.7818.84目的基因组54.1520.8525.00G0/G1（%）S（%）G2/M（%）未转染组65.8529.424.73空载体组53.4034.4012.21目 ...

Some DNA Replication animations:http://www2.kenyon.edu/Depts/Biology/courses/biol14/slides/slides-2.htmlhttp://www.irn.pdx.edu/~newmanl/DNArepl1.movhttp://www.mhhe.com/biosci/genbio/animation_quizzes/graphics/lem6s2b.ramFrom t ...

第一作者之一的宋尔卫(Erwei Song)是我们熟知的，他是中山大学附二院的医生，现在哈佛大学医学院血液研究中心Judy Lieberman教授组进行博士后研究。他曾发表用尾静脉快速大剂量法向小鼠体内输注siRNA成功实现耐受抗Fas单抗诱导的暴发性肝坏死。http://www.nature.com/nbt/journal/v23/n6/abs/nbt1101.html;jsessionid=EFF86FD58B3B573 ...

绝版分子生物学实用技术分享:I: 20 种用于各种DNA marker 制备的PLASMID:P1: 2k+1.5k+1k+800+700+600+500+400+300+200X2+100X4 (100BP ladder)P2: 3k+1.5k+1k+900+700+500+300X2 (200BP ladder 奇数)P3: 3k+2k+1.4k+1k+800+600+4X2 (200BP ladder 偶数) (P3\P4\P5 组合, 可拓展为1KB ladder)P4: 4k+2k+1.4k+1k+800+6 ...

Modified Yeast TransformationInoculate cells from an overnight culture into 50 ml YEPD and incubate at 30°C with shaking. Typically, add 0.1 to 0.2 ml saturated culture in the evening to get an of OD600 = 1 to 2 the next morning.Transfer enough of this culture to 300 ml YEPD to produce an OD6oo=0.2 (ca. 20 mls.). Inc ...

1.Human embryonic stem cells express a unique set of microRNAs • ARTICLEDevelopmental Biology, Volume 270, Issue 2, 15 June 2004, Pages 488-498Mi-Ra Suh, Yoontae Lee, Jung Yeon Kim, Soo-Kyoung Kim, Sung-Hwan Moon, Ji Yeon Lee, Kwang-Yul Cha, Hyung Min Chung, Hyun Soo Yoon, Shin Yong Moon et al.SummaryPl ...

The race to the US$1,000 genome heated up today as Life Technologies, based in Carlsbad, California, announced that it will debut a new sequencing machine this year that will eventually be capable of decoding entire human genomes in a day for less than $1,000. The machine, called the Ion Proton, will be the s ...