以下是我收集的一些资料:蛋白质数据库SWISS-PROT或TrEMBLhttp://www.ebi.ac.uk/swissprot/http://www.expasy.ch/sprot/PIRhttp://www-nbrf.georgetown.edu/pir/PRFhttp://www.prf.or.jp/PDBSTRhttp://www.genome.ad.jp/dbget-bin/www bfind?pdbstr-todayProsit ...
在网上见到的一篇关于免疫沉淀的文献,较详细,现译之共享:免疫沉淀材料1,蛋白A 或蛋白G2,一抗3,免疫沉淀缓冲液:20 mM 磷酸钠, pH 7.5, 500 mM NaCl, 0.1% SDS, 1% NP40, 0.5% 脱氧胆酸钠 and 0.02% 叠氮化钠.( NOTE: 50 mM 醋酸钠缓冲液, pH 5.0,. 500 mM NaCl, 0.1% SDS, 1% NP-40 and 0.02%叠氮化钠 也可作为免疫沉淀的缓冲液,能提高蛋白G的结合功效)4,洗脱液:0.1 M 甘氨酸-HCl buffer, pH 2.55,SDS-PAGE 上样缓冲液 (pH 6.8): 2% SDS, 62.5 mM Tris 碱, ...
超声波是物质介质中的一种弹性机械波,它是一种波动形式,因此它可以用于探测人体的生理及病理信息,既诊断超声。同时,它又是一种能量形式,当达到一定剂量的超声在生物体内传播时,通过它们之间的相互作用.超声波是物质介质中的一种弹性机械波,它是一种波动形式,因此它可以用于探测人体的生理及病理信息,既诊断超声。同时,它又是一种能量形式,当达到一定剂量的超声在生物体内传播时,通过它们之间的相互作用,能引起生物体的功能和结构发生 ...
一、原理考马斯亮蓝G-250(Coomassie G-250)是一种甲基取代的三苯基甲烷,分子中磺酸基的蓝色染料,在465nm处有最大吸收值。考马斯亮蓝G-250能与蛋白质通过范得华相互作用形成蛋白质—考马斯亮蓝复合物蓝色溶液,引起该染料的最大吸收λmax的位置发生红移,在595nm处有最大吸收值。由于蛋白质—考马斯亮蓝复合物在595nm处的光吸收远高于考马斯亮蓝在465nm处的光吸收,因此,可大大地提高蛋白质的测定 ...
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳一、原理细菌体中含有大量蛋白质,具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用,通过加热使蛋白质解离,大量的SDS结合蛋白质,使其带相同密度的负电荷,在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)上,不同蛋白质的迁移率仅取决于分子量。采用考马斯亮兰快速染色,可及时观察电泳分离效果。因而根据预计表达蛋白的分子量,可筛选阳性表达的重组体。二、试剂准备1、30%储备胶溶液:丙烯酰胺(Acr)29.0g ...
由于要做酶活性实验,所以选择真核表达His标签蛋白进行非变形的纯化。(避免了原核表达可能得到没功能的蛋白。)先上图上真相:这个说明了:细胞超声裂解后,离心沉淀的碎片里含少量His标签的过表达目的蛋白(第一道),上清里含大量His蛋白(第二道)。之后用特殊的含有镍的树脂小球纯化His蛋白,由于裂解液体积太大了,就分了两次加到柱子里。第一次加进去之后4度孵育1h,然后弃流出液(第三道),第二次把剩下的裂解液加进去,同样4度 ...
蛋白定量是生物学实验不可缺少的一部分。为验证细胞裂解是否成功,或为了将多个样品进行平行实验比较或标准化保存,需对细胞裂解液进行蛋白定量;为了判定蛋白的产量,需对纯化好的蛋白进行定量;为了将纯化好的蛋白用生物素或者报告酶进行标记,同样需首先对蛋白样品进行定量,以保证标记反应在适当的化学浓度下进行。现今有很多商品化的蛋白定量试剂盒,如BCA定量试剂盒等,操作起来,简便快捷。当然也有不少实验室,还是采用传统的方法进行 ...
世界著名生物技术公司特色简介(转自基因库)一、分子生物学Promega:Promega 公司是分子生物学研究工具的经典品牌,已有接近30年的历史,是生命科学这个朝阳产业中的“老字号”。该公司所特有的萤光素酶生物发光技术,灵敏度高,信号/背景比率低,在基础研究和药物筛选领域内得到广泛的应用和认可。应用范围涉及报告基因检测;细胞学活力、细胞毒作用、细胞凋亡检测;蛋白酶、蛋白激酶、核受体检测,以及描述药物先导物的吸收、分布、代谢、 ...
前几天在网上查些水稻蛋白质组学的资料,在日本的一家研究机构(http://gene64.dna.affrc.go.jp/RPD/data/LBY/LBY_extra.html http://gene64.dna.affrc.go.jp/RPD/data/RL01/RL01_list.html?)公布的数据中发现:同一种蛋白质亚基居然可以出现在同一块凝胶的几个位置,pI和Mw相差甚远,但它们的数据库登陆号又一样!跑双向只是让蛋白质变性, ...
Methods2.1. Material and reagentsDuolbecco’s phosphate buffered saline (PBS), Medium 199 with Earle’s salts and 25mM HEPES, collagenase Type II (from Clostridum histolyticum), antibiotic/antimyotic solutuion (containing 10,000U penicillin, 10,000µg streptomycin, 25 ...
多少个香港铜锣湾,才够满足我的潮流控;多少个抗体网站,才够帮我找到品牌抗体?上丁香通(www.biomart.cn),一站帮你搞定!继丁香通ATCC细胞库发布之后两个月,丁香通第一期品牌抗体库正式发布。本次抗体库收集了Abnova、Abcam、CST、santacruze四个一线品牌的抗体库数据,并且可以通过“适用物种”、“应用范围”、“抗体来源”、“是否单克隆”等维度进行深入搜索,以下为使用示意流程。1、输入关键词,比如搜索“ ...
向老外要质粒后的MTA写法向一个牛人要质粒,最后要MTA, 供大家参考:MATERIALS TRANSFER AGREEMENTApril 15, 2008××××× agrees to provide the Recipient Investigator and their Institution identified below (collectively referred to herein as "Recipient") with materials developed at ×××× by ×××× under the foll ...
pdf文件,263页,1.50MProtein Structure,Stability, and FoldingEdited byKenneth P. MurphyUniversity of Iowa College of Medicine, Iowa City, IA© 2001 Humana Press Inc.999 Riverview Drive, Suite 208Totowa, New Jersey 07512下载目录在 /基础医学区/蛋白质技术专业组/pub/PrefaceIn 1995, Humana Press ...
1.内容:Enzymes (Second Edition)(英文)2.格式:PDF3.作者:Robert A. Copeland4.大小:6MB5.出版社:2000 by Wiley-VCH, Inc.7.简介:见下本书经我在本论坛里没有找到有上传的,与大家共享。原先在FTP资源区,经老赵提醒放在专业区,由于好几位战友PM我要这本书,现重新在专业区申请!下载目录在 /基础医学区/蛋白质技术专业组/pub/1 A Brief History of Enzymology 11.1 Enz ...
温度诱导型原核表达载体pBV220工作原理及全序列实验原理PLPR启动子是大肠杆菌l噬菌体中控制早期转录的启动子,具有极强的起始RNA转录的功能,基因工程中常用它来构建高效表达载体,它受抑制物CI蛋白的负调控。在实际中CI蛋白被改造成温度敏感型(CIts),由DNA片段CIts857(857bp长)编码。CIts在30℃时具有抑制启动子的活性,在42℃时失活而失去抑制启动子的活性,因此,改变工程菌的培养温度即可 ...
1.常见问题分析http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=4620021&sty=1&tpg=1&age=0http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=4043308&sty=3&keywords=western+blothttp://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=3861374&sty=3&keywords=western+b ...
最近得到一本关于蛋白组方面的电子,与大家分享一下Edited ByDavid Speicher, The Wistar Institute, Philadelphia, PA 19104.DescriptionThis book explores the current status of proteomics, an exciting new discipline, which is less than 10 years old. This new field has rapidly grown into a major commercial and ...
我这里仅列出排名前10位的文章,可以看出引用率较高的文章大多为方法性的文章。MOLECULAR & CELLULAR PROTEOMICS (IF 9.624)1. Gruhler A, Olsen JV, Mohammed S, et al.Quantitative phosphoproteomics applied to the yeast pheromone signaling pathwayMOLECULAR & CELLULAR PROTEOMICS 4 (3): 310-327 MAR 2005Times Cite ...
我的要表达一个重组蛋白做疫苗研究,原来打算弄全长,但全长707个氨基酸,太大,不好表达。现在想取其中一部分来表达,但不知道如何选择有意义的片段,请各位大侠帮忙,下面是氨基酸序列和其抗原性分析,谢谢各位啦!MKKTLLLSLSLSLSFLLHAEDDGFYTSVGYQIGEAAQMVKNTKGIQELSDNYEKLNNLLNNYSTLNTLIKLSADPSAINDARDNLGSSSRNLLDVKTNSPAYQ ...
Premixed Electrophoresis Buffer CompositionBuffer1x FormulationApplication(s)10x Tris/glycine/SDS25 mM Tris, pH 8.3, 192 mM glycine, 0.1% SDS SDS-PAGE10x Tris/glycine25 mM Tris, pH 8.3, 192 mM glycine PAGE10x Tris/Tricine/SDS100 mM Tris, pH 8.3, 100 mM Tricine, 0.1% SDS Peptide anal ...