我会把他们发到humanpress@56.com这个邮箱里，用户：humanpress密码：humanpress可能要1个月（老爷机太慢）我先从140.Chaperonin Protocols 向后发而后再发1-139，主要是考虑1-139年代较早，需要的人可能不多。METHODS IN MOLECULAR BIOLOGYJohn M. Walker, SERIES EDITORHumana Press Inc. Totowa, NJ www.humanapress.c ...
100本最新分子生物学书籍Methods in Molecular Biology Volume 201-300http://rapidshare.com/files/58795488/201_Combinatorial_Library.pdfhttp://rapidshare.com/files/58796259/202_Thyroid_Hormone_Receptors.pdfhttp://rapidshare.com/files/5879 ...
上周送了一个考染的蛋白质点做PMF质谱鉴定，我自认为点取准了，质谱的蛋白量足够，可公司的人说我送去的样品太少，PMF做不出来，但是可以做MALDI-TOF-TOF。没办法，做了一个月的实验不能白做吧！狠下心多加了200元做了MALDI-TOF-TOF。（鉴定一个蛋白质的钱可以买一台三星的17寸显示器了）结果如下：Accession Mass Score Description1. gi|34903780 51933 67 unnamed prot ...
网络来源，蛋白质组学电子书 小书库 ，希望其中一本或几本对各位有用。:D1、Cancer Proteomics: From Bench to BedsidePublisher: Humana Press | Language: English | ISBN:1588298582 | 300 pages | Data: 2007 | PDF | 3.5 MbDescription: This book provides the reader with broad perspectives and breadth of knowledge on current top ...
Transformation of plasmid DNA to competent E. coli cellsTransformation is the process of getting the recombinant vector from a reaction mixture or vector solution into E. coli cells. To enable the cells to take up circular vector DNA they have to be made competent. The method for the preparation of co ...
做生物的出国特别容易，因为做生物的赚钱少；职位大把大把的，就看你找不找；PS. 不能长期做，当个跳板不错；另：加密10，挡住小马甲~~~1. Postdoctoral Research Fellow, University of Maryland, Rockville, Maryland Postdoctoral Research FellowUniversity of MarylandDepartment: Center for Advanced Research in Biotechno ...
随着SELDI技术从美国的引进，有部分战友已经接触到了这个技术，现把园里有关的帖子总结于下。SELDI 芯片的再现性http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=1115005&sty=3&keywords=SELDISELDI和飞行质谱所能检测的蛋白质的分子量范围是多少？http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=749497&sty=3&keywords= ...
很多免疫教科书上描述，人和兔子，还有猪的抗体可以用proteinA亲和纯化。小鼠腹水单抗用protein G亲和介质进行纯化。但是在实际科研中，我们发现用新的rProtein A也可以对小鼠腹水进行有效纯化我和不少人说起过这个事，但是还是有很多怀疑和种种疑问挑战经典理论确实是件难事我摘抄了实验室一次实验与大家分享，希望对大家有所帮助简单的实验步骤，适合没有层析仪，又希望快速得到抗体的实验室（此次纯化实验耗时约2小时） ...
呵呵希望让大家查询的方便一些也希望版主给适当加分裂解液的问题http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=3291558&sty=3&keywords=%C1%D1%BD%E2%D2%BA求教RIPA裂解液http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=3391456&sty=3&keywords=%C1%D1%BD%E2%D2%BA求助：胞浆蛋白的提取必须要用到裂解 ...
前段时间在别人实验室学做western，做了若干次，感觉很容易呀！当然了，别人那试剂都是现成的，技术也成熟，每次都有结果呀！然后回自己实验室来也学着别人的样开始搞。我们这是个新的实验室，什么都没有啊，只有仪器，我买瓶瓶罐罐啊、试剂啊，然后刷刷洗洗，配各种溶液～～～～～～溶液真是多啊，我配了3天才完全配好！特别是调pH太耗时间！开始做了！做胶：别人实验室是用琼脂粉封底，我记得他们是5％，我自己一配，怎么这么稠啊(加热中）！完全搅不 ...
是该公司结合自己产品的一个说明，但其中有些知识我自己认为很有用，转下来。下面的步骤适用于通过Xcell Ⅱ转印系统进行蛋白印记的大部分应用。为达到最佳效果，用户的优化是必要的。I. 所需材料： • Xcell SureLock™或Xcell Ⅱ™ Mini-Cell以及Blot Module（Cat. Nos. EI10001, EI9001及EI9051）• 电泳后的迷你胶（mini-gel）（最大的尺寸9cundefined9cm）• 预先切割好的印记膜：硝酸纤维素（Cat. no. LC20 ...
友情整理06年3月份无人应助贴，希望大家积极应助！ 核酸理化常数测定方法http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5777507&sty=1&tpg=22&age=0 请教顺乌头酸酶活性的测定方法！！http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5684366&sty=1&tpg=38&age=0 求助NCBI上的一个问题.http://www.dxy.cn/bbs/post/ ...
下列方法已在本实验室验证，复性任何包涵体，必定能得到目的蛋白：菌体为超声法裂解，裂解溶液中含50mM Tris-HCl, pH 8.0，100mM NaCl，5mM EDTA，0.1% NaN3，0.5% Triton-X100，在使用前加入 0.1mM PMSF每250毫升裂解液中加入约50克菌体，工作15s，间隔15秒，超声破碎45分钟，超声后加入10mM MgSO4 和0.1mg/ml 的溶菌酶和Dnase 0.01mg/ml，室温放置20分钟，6000RPM离心15分 ...
原核表达将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点：易于生长和控制；用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵；有各种各样的大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒可供选择。但是，在大肠杆菌中表达的蛋白由于缺少修饰和糖基化、磷酸化等翻译后加工，常形成包涵体而影响表达蛋白的生物学活性 ...
一、名词解释1、 基因：能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列，是决定遗传性状的功能单位。2、 基因组：细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和。3、 端粒：以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒。该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体，仅在真核细胞染色体末端存在。4、 操纵子：是指数个功能上相关的结构基因串联在一起，构成信息区，连同其上游的调控区（包括启动子和操纵基因）以及下游的转录终止 ...
（一）第一向等电聚焦（用自制溶液）1. 从冰箱中取 -20 ℃冷冻保存的水化上样缓冲液（ I ）（不含 DTT ，不含 Bio-Lyte ）一小管（ 1ml/ 管），置室温溶解。2. 在小管中加入 0.01g DTT ， Bio-Lyte 按照如下表格 1ml 的量加，充分混匀。IPGpH RangeBio-Lyte Ampholyte(Stock)Range Conc.(w/v)Sample Solution VolumePer 1ml per 5ml per 50ml3-103-1040%5ul25ul250ul4-74-640%2.5 ...
实验过程：1. 将SIGMA公司HRP标记的羊抗兔1：10，000开始，5倍稀释。点1ul到NC膜上，点完后迅速泡到PBS里。2. 配好发光底物后取出膜，将SuperSignal West Pico与ELC prime 分别加200ul到两块膜上。1min后，在膜表面覆盖塑料膜。3. 照相4. 将照相后的膜使用蒸馏水冲洗，然后加入TMB显色底物显色，看两膜显色深浅有无差别。结果：1. 发光情况30s结果1m30s5m30s20m30s从以上图片可以看出 ...
蛋白质的检测与分析——Western blot 操作步骤一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质（或酶）。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志，检测蛋白质的方法很多，除ELISA法外，也可用与检测DNA和RNA相类似的吸印方法。前两法有“南”和“北”之意，故本法遂被延伸称为Western（西）印迹法，该法能用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨出与专一抗血清结合的专一性蛋白质。将聚丙烯酰胺凝胶上分辨出的蛋白质转移到硝酸纤维素膜上并 ...
看到坛子里最近有好多朋友发贴问膜蛋白的相关问题，尤其是一些新手。其实坛子里以前就有过不少这方面的讨论，只有你搜索一下就会发现好多有用的信息，肯定比你在那焦虑的等待别人回帖效果好。而且好多新人常常迫不及待的就重复发贴，造成了一定程度的资源浪费，而且这也是版规所不容许的。正好本人最近也在准备这方面的课题，所以顺手总结一下过往的一些帖子，希望对大家有所帮助。（数字仅为标号，绝非排名:P）小弟抛砖引玉，冀望各位不吝拍玉:) 小 ...
Current Opinion in Chemical Biology 2000, 4:489-494蛋白质组学对一个细胞或组织所表达的蛋白质进行的系统分析，而质谱是它的关键性分析工具。在过去的两年中，标准蛋白质组技术中的进展增进了更高水平自动化和敏感性的蛋白质识别技术。另外，新的技术促成了鉴定蛋白质功能相关特性的里程碑性的进展，包括它们的定量和在蛋白质复合物中复杂情况。缩写2DE two-dimensional gel electropho ...
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