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1试剂(1)小鼠腹水(2)饱和硫酸铵溶液的配制:　　称(NH4)2SO4(AR)400～425克，以50～80℃之蒸馏水500ml溶解，搅拌20分钟，趁热过滤。冷却后以浓氨水(15N　NH4OH)调PH至7.4。配制好的饱和硫酸铵，瓶底应有结晶析出。(3) 0.06M, PH4.8醋酸盐缓冲液配制:) `0 }2 j2 v. ^　　贮存液:' ~. o6 \5 o5 W1

分子病毒及生物制药实验室标准操作规程（SOP）血凝抑制试验的标准操作规程酶联免疫吸附（ELISA）试验的标准操作规程聚合酶链式反应（PCR）的标准操作规程引物设计的标准操作规程质粒提取及纯化标准操作规程质粒线性化及纯化的标准操作规程限制性内切酶酶切反应的标准操作规程T载体克隆标准操作规程蓝白斑筛选标准操作规程DNA琼脂糖凝胶电泳标准操作规程CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞标准操作规程核酸连接试验标准操 ...

开个帖子和大家探讨一下“靶向干扰素”这一热点话题。请多多指教！靶向治疗是指借助能与靶部位高度特异性结合的物质作为载体，以有药物活性的物质（如放射性核素、化疗药物、毒素、酶、生物反应调节剂、基因以及病毒等）作为“弹头”，依靠载体高度特异的亲和性，将“弹头”物质尽量集中于靶部位，发挥其生物学功能，减少对正常组织或细胞的副作用。靶向治疗具有以下的优点：利用载体的靶向性提高靶部位的药物浓度，提高了疗效；减少了给药剂量；降低了毒副 ...

５月份ELISA讨论区【求助】Problem of Elispot 【求助】做免疫的各位高手，用什么方法测效价比较好？急！ 【求助】ELISA中某缓冲液中的巴比妥的作用 【请教】这种方法可行么？竞争法ELISA 【求助】请问ELISA能否检测细胞的膜蛋白 【求助】求助：间接竞争ELISA方法建立 【求助】细菌对所测蛋白质的影响大吗 【求购】关于Elisa标准曲线优化的问题。 【求助】大鼠IL-1、IL-6试剂盒的说明书 免疫组化讨论区 【请教】免疫荧光标本的保存 【求 ...

外文综述翻译一篇，可在这找到全文，http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?holding=npg&cmd=Retrieve&db=PubMed&list_uids=11007358&dopt=AbstractKnowledge about transplantation tolerance gained in primatesStuart J KnechtleS. Knechtle. Current Opinion ...

一、核酸分子杂交技术1961年Hall开拓了液相核酸杂交技术的研究，其基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基顺序，通过碱基对之间非共价键的形成，出现稳定的双链区，形成杂交的双链。自此以后，由于分子生物学技术的迅猛发展，特别是70年代末到80年代初，分子克隆、质粒和噬菌体DNA的构建成功，核酸自动合成仪的诞生，大大丰富了核酸探针的来源，新的核酸分子杂交类型和方法不断涌现。按其作用方式可大致分为固相杂交和液相杂 ...

虽然不算是新文章，而且个别实验在有的实验室没有重复出来，但是还是值得一读。Regulation of humoral and cellular gut immunity by lamina propria dendritic cells expressing Toll-like receptor 5该文章发表于2008年Nature Immunology.http://www.nature.com/ni/journal/v9/n7/abs/ni.1622.htmlTLR由13个 ...

(1)原理：T淋巴细胞与有丝分裂原在体外共同培养时，受到后者的刺激可发生形态学和生物化学的变化，部分小淋巴细胞转化为不成熟的母细胞，并进行有丝分裂，这种方法称为淋巴细胞转化试验(lymphocyte transformation test)。(2)试剂：①1640培养液：广州威佳科技，临用前加入20%犊牛血清（灭活），青链霉素各100IU／ml，用5.6%NaHCO3（经高压灭菌）校正pH7.2～7.4，是为应用培养液。②PHA溶液：上 ...

HLA分型技术主要组织相容性复合物（MHC）是脊椎动物体内最复杂且具有高度多态性的基因群。1984年George Snell 首次发现小鼠MHC即H－2，1958年Dausset 发现了人的MHC即HLA基因。MHC的表达产物称为主要组织相容性抗原，MHC抗原是有核细胞表面膜蛋白分子，对抗原递呈和免疫信号传递起关键作用。HLA基因，位于6号染色体上短臂上，长约4000Kb。HLA是目前所知人体最复杂的遗传多态性系统，有几 ...

抗体工程的新纪元 —— SELEX技术王全立 邵宁生（军事医学科学院野战输血研究所）詹林盛、孙红琰、刘晓达（军事医学科学院基础医学研究所）　回顾20世纪，分子生物学及其相关学科的发展给科学研究和人类生活带来了日新月异的变化，同时也更新了一些传统概念。比如，自20世纪30年代以来，人们一直认为"所有的酶都是蛋白质"。1986年，Lerner等首次研制成功催化水解羧酸酯的抗体，称之为抗体酶（Abzyme）。1987年，Cech等发现了具 ...

样品处理及保存（极为重要）1、悬浮细胞样品：把细胞及培养液一起收集到15ml或者50ml离心管中，1500rpm离心3min，弃去上清；加入10ml 冷PBS轻轻吹打，1500rpm，4℃离心3min，弃去上清；反复2次；第二次弃去上清后，用1ml 冷PBS重悬细胞，移入1.5ml微型离心管，2500rpm（500g），4℃离心5分钟，尽量去除所有残留上清，于-80度或者液氮冻存待用。在避免冻融的情况下，一般保存1年，建议尽快检测。 ...

仅以此贴回馈园子这两年对我的帮助我养树突状细胞一年多了，终于有点东西可以回馈丁香园带给我的帮助。第一：淋巴细胞分离液一定要好，进口的PolymorphPrep（Axis-Shield）很不错。这个分离液可出现白雾状的两层 上面的是单核细胞层下面的是多核粒细胞层，上面的就是含有我需要的DC前体细胞。第二离心力的问题：分离步骤450离心力 洗涤步骤400离心力。这个可以减少血小板。第三：关于细胞少的问题：经过我多次分离血，发 ...

生物通 报道：来自美国弗吉尼亚州立大学，斯坦福—伯纳姆医学研究所（Sanford-Burnham Medical Research Institute）发现了吞噬细胞线粒体膜蛋白Ucp2在细胞吞噬中的重要作用，这对于解释为什么吞噬细胞能接连消化多个凋亡细胞，而不影响其自身活动具有重要意义。这一研究成果公布在Nature杂志上。成人每天能产生大量的凋亡细胞，比如大脑中的神经元，能存活下来的并不多，大部分都被吞噬细胞清除了，但是当 ...

应助后请跟贴说明并将应助的帖子连接附上以便加分。GOOD LUCK!【求助】人胃癌BGC－823细胞相关抗原的表达【求助】大鼠急性脑片培养后将该脑片制成石蜡切片的具体方法 【求助】大鼠的T淋巴细胞亚群的正常值 【求助】原代神经细胞免疫化学染色 【求助】胶体金免疫组织化学 【求助】恶性黑色素瘤免疫组化过程中如何进行脱色和预防脱片 【求助】大鼠MCP-1免疫组化 【求助】作免疫组化时噬菌体的滴度 【求助】肾癌做免疫荧光染色常用的标志物 【求助】小鼠小脑 ...

一、非特异性染色的主要因素组织的非特异性染色的机理很复杂，其产生的原因主要可分为以下几点：（1）一部分荧光素未与蛋白质结合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。（2）抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白，可与组织成分结合。（3）除去检查的抗原以外，组织中还可能存在类属抗原（如Forssman氏抗原），可与组织中特异性抗原以外之之相应抗体结合。（4）从组织中难于提纯抗原性物质，所以制备的免疫血清中往往混杂一 ...

ELISA讨论区：【请教】关于测小分子抗原时c18柱纯化 【请教】一个辅助噬菌体Ｍ１３－ＫＯ７的问题【求助】如何降低Elisa检测中的交叉反应【求助】武汉意德生物公司elisa试剂盒如何【求助】ELISA试剂盒询问【请教】在直条图中如何作出P/N值的曲线图【求助】竞争ELISA抗原保护剂的选择其他试验讨论区：【请教】关于autologous MLR中，一个问题【请教】关节局部温度 【请教】关于噬菌体肽库试剂盒 【求助】哪里能做低温包埋 【请 ...

良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色可以存在各种各样的问题，但从染色的结果看，一般可分为两类：无色片（即无阳性信号）和“杂音”染色片（有阳性信号）。一、 无色 ...

二步法：EnVision SystemEnVision显色系统是将二抗和酶通过一个多聚葡聚糖骨架联接成一个多聚体（即EnVision）直接放大信号40-50倍，把传统的二抗、三抗分别孵育合为一次孵育。特点：敏感、省时、方便、背景低（避免了内源性生物素干扰）。EnVision工作程序：1） 脱蜡、水化组织切片。2） 预处理组织切片（据一抗具体说明而定）3） 蒸馏水漂洗，置于TBS中。4） 阻断内源性过氧化物酶（仅用于EnVisionTM/HRP） ...

免疫组化问题及解决办法1、染色过强原因 解决办法抗体的浓度过高或抗体孵育时间过长降低抗体滴度（一般指浓缩性抗体），抗体孵育时间：室温1小时或4℃过夜孵育温度过高，孵育温度超过37℃一般室温20-28℃DAB显色时间过长或DAB浓度过高显色时间不能超过5-10分钟，以显微镜下观察为准2、非特异性背景染色原因 解决办法操作过程中冲洗不充分每步冲洗3×5组织中含过氧化物酶未阻断可再配置新鲜3%H2O2封闭，孵育时间延长组织中含 ...

在现代生物医学研究及临床应用领域，酶联免疫吸附检测术（Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay，ELISA）的使用越来越广。在免疫学研究中，常见的ELISA应用包括检测体液或培养液中抗原（如细胞因子）或抗体的浓度。虽然ELISA技术的操作流程因具体实验目的不同而有差异，其基本思路均是先将已知抗体（或抗原）固定于酶联反应板上，利用抗原-抗体特异性结合的特点，使待检测样本中相应的抗原（或抗体）联结在酶 ...