二、缓冲液 免疫细胞化学中应用的缓冲液种类较多,即使是同种缓冲液,其浓度、pH、离子强度等也常常不同。在此介绍几种最常用的缓冲液的配制。 1.0.2mol/L(pH7.4)磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB) 试剂: NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O 配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不 ...
多肽知识汇总
常用的免疫酶染色方法又分为以下两种方法:-酶标抗体法直接法间接法-非标记抗体酶法酶桥法PAP法(1) 酶标抗体法通过共价键将酶结合在抗体上,制成酶标抗体,与标本进行反应后,再用酶组化法将酶显色,使之生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,以供光镜和电镜观察。-优点:切片能长期保存、反复观察,适于镜下半定量分析。-缺点:酶与抗体形成的共价键,可损害抗体和酶的活性;易产生非特异染色。(1) 酶标抗体法——直接法将酶直接标 ...
在密度梯度离心结束后,我们常需要收集感兴趣区域的组分,如何精确的收集组分成为广大科研者所关注的内容。科研工作者们开始寻找一种全新的方法能避免以上缺陷。
说在前面关于生存分析的相关概念,请参见:点击这里Kaplan-Meier 是用于估计生存的函数,允许有一个分组变量进行生存率的组间比较,还容许一个分层变量。若不考虑其他混杂因素下,他是生存分析的常用方法。实例操作要研究某种新药治疗相对于常规药物治疗对生存率有无改善,收集以下数据:months:生存时间(单位月),为连续变量。group:1=治疗组,2=对照组status:0=出现结局,1=失访,2=实验结束时仍存活操作步骤菜 ...
一、Hp感染主要诊断方法Hp感染的诊断有多种较为可靠的方法,可从检测原理、检测意义以及对人体有无创伤等多角度进行各种不同分类。一般依据对人体有无创伤分为侵入性和非侵入性诊断方法。侵入性诊断方法主要是依赖胃镜活检的方法,包括:快速尿素酶试验(RUT)、胃黏膜直接涂片革兰染色镜检、胃黏膜组织切片染色镜检、Hp培养、Hp基因检测方法(如PCR、寡核苷酸探针杂交等);但活检钳消毒不严格可造成交叉污染。而非侵入性检测方法主要 ...
最近关于BiTE双特异性抗体传出重大利好消息,FDA决定批准安进公司开发的治疗白血病的新型免疫疗法blinatumomab上市。这一决定耗时仅2个月,比其预计的审核期足足早了5个月之久。Blinatumomab是一种基于安进公司双特异性T细胞衔接系统(bispecific T cell engager, BiTE)开发而来的免疫疗法。这种疗法能够通过将肿瘤细胞上的CD19蛋白--一种肿瘤细胞通用抗原--呈递给CD3蛋白,进而 ...
概要本研究考察了粘合剂韧性和塑性流变对片剂硬度、脆碎度和顶裂的影响。使用四种不同的粘合剂,即羟丙基纤维素(HPC)、甲基纤维素(MC)、聚维酮(PVP)和预胶化淀粉,以湿法制粒的方法制备对乙酰氨基酚片(圆形弧面,600mg)。使用3个压片速度在旋转压片机上进行压片。通过径向压缩测试检测纯粘合剂片和对乙酰氨基酚片的性质。使用荷载-形变曲线下的面积衡量韧性。HPC显示出最强的韧性。HPC和MC粘合剂片剂的破裂很光洁。PVP ...
【嘉美实验】流式细胞分选技术原理:利用流式细胞分选仪,以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它可根据发射光的荧光强度和波长将发光颗粒亚群分开并可实现单克隆分选,能复杂样本中的细胞进行鉴定、分类、定量和分离,单次可同时对其中一种到四种特定细 ...
XXXX原代细胞干预培养与激光共聚焦蛋白细胞定位实验实验试剂:PBS(磷酸盐缓冲液pH7.4)(实验室常规配置);非免疫山羊血清;Triton X-100(sigma);BSA抗体稀释液(实验室常规配置);A蛋白抗体(Santa cruz);B蛋白抗体(Abcam);Alexa Fluor® 488 donkey anti-goat IgG (H+L)(Invitrogen);AlexaFluor® 555 Anti-Rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment( ...
原位末端凋亡法(Tunel)实验服务TUNEL实验技术简介:TUNE技术,即脱氧核苷酸末端转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT )介导的2dUTP 缺口末端标记(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL ) 技术是目前原位检测细胞凋亡最敏感、快速、特异的新方法, 已广泛用于生物、医学研究领域。TdT-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL)是一 ...
原代细胞培养服务:原代肝细胞定制服务原代细胞培养服务:原代细胞定制服务原代细胞培养服务:原代细胞分离培养鉴定以及检测等整体课题服务Case:新生SD大鼠原代心房肌细胞分离与药物刺激培养冰检测相关蛋白与基因实验设计一、细胞:分离大鼠原代心房肌细胞二、细胞培养分组:a)对照组:正常大鼠原代心房肌细胞72h培养b)高糖72h培养 c)高糖+氧化应激抑制因子72h培养d)正常培养48h+氧化应激刺激因子再培养24h e)高糖培养 ...
背景:真核生物的基因组DNA以染色质的形式存在,研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达机制的基本途径。与传统的EMSA技术相比,染色质免疫沉淀技术(CHIP)能真实完整地反映结合在DNA序列上的调控蛋白,是目前研究体内DNA与蛋白质相互作用的最佳方法。原理:是在活细胞状态下以甲醛固定蛋白质-DNA复合物,超声将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后加入目的蛋白抗体,通过抗体沉 ...
【嘉美生物】随着免疫荧光技术的不断发展,荧光染料及其标记的抗体偶联物也被广泛的应用于生物学实验中。目前,市场上抗体及蛋白标记的荧光染料主要有CFTM系列(BIOTIUM, USA); Alexa Fluor®系列(Life technology, USA); DyLight系列; Cy系列; IR Dye系列等等。使用最多的为Alexa Fluor®系列和CFTM系列。一、CFTM系列染料的核心对比Alexa Fluor®系列具有以下几点优势:1、新型罗丹明核心 ...
【嘉美生物】开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全。细胞与试剂方面:1、细胞(单层细胞,镜检适合)2、培养液(MEM-0.2%LH 培养液或MEM 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)3、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1 万单位)4、7.5%NaHC03 溶液5、0.25%胰蛋白酶6、PBS 洗液。实验小用具方面:1、小方瓶(100m1)2、克氏瓶3、胶塞4、吸管(10ml、1m1)5、细胞吹打管(20 ml)(以上用具需经121℃至少15 分钟 ...
一、亚硫酸氢钠修饰过程中可能出现的问题及应对措施【嘉美生物】亚硫酸氢钠修饰DNA的目的是将DNA序列中未甲基化的胞嘧啶完全转化为尿嘧啶,而甲基化的5一甲基胞嘧啶保持不变。影响此过程的主要因素有修饰试剂的浓度、反应温度、反应环境的pH值及反应时间。其中任何一个环节出现问题都将导致MSP扩增失败,体会如下:(1)亚硫酸氢钠的浓度最好控制在3.0~3.9 mol/L为好,其pH值必须用NaOH精确调整至5.0;(2)修饰时间应 ...
【嘉美生物】北京嘉美生物就eBioscience公司的产品 (#00-5523 Foxp3 staining buffer set使用方法,也适用于胞浆和核内抗原的同时检测)浅谈流式核内蛋白染色步骤:1、染表面抗体按说明书条件孵育全血样品孵育抗体后加入不含固定剂的溶血素(按厂家说明操作)溶血完毕。2、用2ml预冷流式染色缓冲液(Flow Cytometry Staining Buffer)洗涤细胞300-400g离心5分钟,去上清。3、用3倍体 ...
先讲讲什么是 Friedman 检验Friedman 检验是利用秩实现对多个总体分布是否存在显著差异的非参数检验方法。其原假设是:多个配对样本来自的多个总体分布无显著差异。SPSS 将自动计算 Friedman 统计量和对应的概率 P 值。如果概率 P 值小于给定的显著性水平 0.05,则拒绝原假设,认为各组样本的秩存在显著差异,多个配对样本来自的多个总体的分布有显著差异;反之,则不能拒绝原假设,可以认为各组样本的秩不存在显著性差异。基于上述基本思路, ...
Fmr1基因敲除小鼠前扣带回中受损的突触前长时程增强效应
打造细胞外囊泡(细胞微粒、外泌体)检测新趋势