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goodlucky 各位战友，小弟想做一个药物干预后信号通路的检测，看药物是否对信号通路有影响，比如ERK、JNK、p38等，请问如何检测这些通路是否被激活或抑制，是否只用简单的磷酸化抗体吗，这些磷酸化的抗体都用商品化的吗？谢谢！zhengfeifei 每个通路需要两种抗体，如ERK通路需要 ERK抗体和 P-ERK抗体，这里ERK抗体起到“内参的”作用，代表ERK的总量，药物干预前后的量通常保持不变；而P-ERK抗体用来检测磷酸 ...

waywin01 急求：ERK-CREB-BDNF信号转导通路的示意图。谢谢！！！yhwangcams http://www-ermm.cbcu.cam.ac.uk/04008403a.pdfwaywin01 有该图的文献出处吗？qianbianbai 感谢异常本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

mike20041120 各位大侠，有谁知道能不能这样叙述：JNK/SAPK和IkB/NF-KB信号通路，特别是IkB/NF-KB信号通路，能这样写吗？谢谢！mike20041120 自己顶一下！weibin0528 IkB/NF-KB没必要吧直接写NF-KB就行了，也可以参考外文文章写法本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

chenglanying 哪位高手能告诉我质谱的研究进展？急急急！dnazyme 问题不具体。如果是仪器问题，去仪器论坛www.instrument.com/bbs.如果是方法建立，去分析版；如果是学术问题，去检索资料。 www3.interscience.wiley.com/journal/49879/homectttongji 楼上说的很对！要具体问题才能具体分析哇~~~shylook chenglanying wrote:哪位高手能告诉 ...

oliver1981 我想知道结肠癌细胞系都有哪些？以及他们的区别是什么？哪个公司或科研机构卖的细胞系最全？急等回信！yhwangcams 结肠癌细胞系多的很，他们都有各自的特点和不同的基因突变，在ATCC上有相关介绍，也可以搜索相关文献得到更多信息。可以直接从ATCC订货，比较贵。根据ATCC有以下：http://www.lgcstandards-atcc.org/LGCAdvancedCatalogueSearch/t ...

wangjinsheng 准备开题了，打算制作动物肿瘤模型，然后加以治疗后，观察肿瘤的凋亡情况，判断凋亡通路。有师兄介绍让我做NFKB、Caspase3、Tunel，可是我觉得这几个指标能够解释得了我的治疗是否促使肿瘤细胞按照某种凋亡通路来凋亡吗？因为我是临床专业的，基础实验方面的知识很欠缺，所以请专家指导一下，如何选择指标来做？谢谢。zhengfeifei 做个MTT、Caspase3、Tunel检测凋亡。 NFkb是转录 ...

relike 如何研究蛋白中的组氨酸残基被磷酸化？现在都有什么手段检测？市面上没有抗磷酸化组氨酸残基的特异性抗体吧？期待战友们的回复。relike 没有人做过吗？我没有检索到相关文献，不知道哪位战友能提供相关资料？多谢！！！！！！！！ningning86 如何研究蛋白中的组氨酸残基被磷酸化？现在都有什么手段检测？可以用western的方法，检测磷酸化和总蛋白，然后做比值。还可以用组织化学染色的方法，对磷酸化的蛋白进行染色。当然，这 ...

dazuo2005 不知有做erk通路的老大没有，本人想做脊髓背角p－erk免疫组化和western blot p－erk1/2，能否给予指点，现在看了写文献，感觉无从下手，很多文献的方法都不同，不知要按照哪个来做。谢谢先了。zhengfeifei 有什么难的地方？dazuo2005 首先，P-ERK免疫组化取材问题，我准备做sd大鼠脊髓，是否作灌注，固定然后取材？此外是要石蜡包埋还是冰冻切片。看了两篇中文文献，方法不同。主要是以前没有 ...

adria 　　试剂盒才买回来，是upstate的那个，rho activation assay kit研读说明书中，我以前从没做过pull down assay的，同实验室也没师兄师姐做过...所以，基本等于小白一个　　问题是这样的，在rho pull down assay的这个步骤中，最后要求短暂离心收集管底物质。在免疫分析这一步又要求讲上清和琼脂糖珠混合，把我弄糊涂了，那前一步收集的管底物质是干什么的？　　试剂盒很贵，实在不敢浪费，请大人们指教了~附上说明书 ...

triny sigma居然没有，也没有troglitazone，是因为是专利药所以不卖吗，不知道那里能买到呢？其他的ppar gamma 激动剂是不是不太适合用于动物实验呢？多谢了，实在是着急啊triny 忘了说不能是国内的，怕发文章的时候人家questionxw2318 刚找到一个公司；看看行不？有消息告诉我，我也准备买http://www.caymanchem.com/app/template/Product.vm/catalog/ ...

sunny暖暖 Post is deletedsunny暖暖 怎么光看帖，不回帖哪……sunny暖暖 是不是发错地方了哦？应该发在神经版吗？可以转过去不啊？——问版主本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

fanjingol 如题所示！小弟我做的是兔的脊髓缺血再灌的实验！查阅了相关文献是：鼠中使用的量1.0 mg/kg in25% DMSO in PBS！请问有高人告诉我在兔中的量应该是多少啊？万分感谢！dai88 学习了，请问你用什么抑制剂呀，那么大的用量不是很贵吗？yhwangcams 没做过，但可以用关键词PI3K inhibitor, rabbit model在Pubmed搜索。如这篇文章中（http://bja.oxfordjournals.org/cg ...

fanjingol 小弟实在是糊涂，能否有高手帮我理一下？AKT又称蛋白激酶B，是一种丝氨酸/ 苏氨酸蛋白激酶。而JN K是位于胞质的丝氨酸/ 苏氨酸蛋白激酶。请问一下：AKT和JNK的关系是什么？是平行的吗？小弟我的理解是AKT是一个蛋白，JNK是个家族！JNK是MAPK的一类信号通道，AKT是否也就是属于里面的啊？急求解答！谢谢！amygdala AKT又称蛋白激酶B（PKB），是蛋白激酶的一种。JNK是MAPK家族的成员，MAPK ...

liunach2008 请教给位高手，如何进行粘附信号转导设计，如果是体内用药的话，观看药物反应的话。有没有关于造血干细胞和基质细胞粘附方面的信号转导设计？yhwangcams 推荐一个来自Cell的Snapshot，但愿对你的实验设计有帮助。多读相关文献是解决问题的最好办法。可能不太清楚，我在我的skydrive里备份了全文。http://cid-f87ac05d1d6b4fda.skydrive.live.com/se ...

frank595 请问各位老师：JAK-STAT信号转导途径中的ISGF3可以使用Western Blot检测吗？如果可以如何检测？多谢！yhwangcams Activated Stat2 forms a heterodimer with Stat1 and translocates to the nucleus. There, it associates with the DNA-binding protein p48 and forms the transcriptional activator comple ...

licycrystal :D 有两个问题请各位大虾帮忙一下啊:1, 我做的是药理实验想了解Pkc与细胞内钙离子浓度的关系，我知道现在很多人用的是钙敏感性显微荧光测定，就是加个fura什么的，这个具体步骤怎么做的呢，是不是要用到共聚焦啊？2，请问有人做过细胞膜钙离子通道表达的吗 ，比如western ，这个难做出吗？dai88 好像还有一种染料，主要利用与钙结合后，激发波长不一致引起的，好像需要特殊激发显微镜吧，我想测定整体动物的钙离 ...

chichao0000 小弟是个出做实验的新兵，问一个比较初级的问题：计划从活体上去组织，然后检测基因多态性，全部检测，不是针对某个基因，请问各位战友，怎么做呀，是用DNA测序吗？是不是得很贵呀？望各位战友解答！感谢！西门飘脸 基因多态性检测没必要用测序的啊不是很明白你说的是什么意思多态性检测，还全部检测，好矛盾啊suny0354 你是要寻找新突变，还是检测已知的突变，如果是发现新突变可以测序，如果是已知的，也不一定用测序cp ...

dongreyuan 有的抗体名称上面写着Ab-33，比如，β-catenin（Ab-33）antibody，请问，Ab-33是什么意思？bettyzyj 这个抗体是非磷酸化的抗体non-phospho-antibody ，33 代表的是基因位点dongreyuan 谢谢了yhwangcams bettyzyj wrote:这个抗体是非磷酸化的抗体non-phospho-antibody ，33 代表的是基因位点感觉不应该说“33 代表的是基因位点”，准 ...

紫藤星 现在想通过放射性同位素标记法测PKG活性，可是文献关于这方面的不多，所以想请教做过这方面的老师能给些大致的指导和提示下？谢谢了yhwangcams 查到一个日本公司提供检测PKG活性的试剂盒。https://ruo.mbl.co.jp/gtf/1/1/CY-1161.pdf说明书有详细介绍。紫藤星 谢谢yhwangcams 老师的帮助了本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为 ...

panglizi 请教一下，substrate trapping mutant是什么意思啊？yhwangcams substrate trapping mutant通常是指保留特异的底物结合能力而丢失催化底物能力的突变体。就是说STM可以结合底物但不能处理底物，可以用来发现如某些磷酸酶的底物。Substrate-trapping mutants (STMs) are phosphatases mutated to retain specific binding ac ...