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怪盗小子 我找了很多网站，包括国外的网站都没有找到很多关于这个方面的知识。所以，就只好来求助各位大侠们了……希望能给提供一些图片或者是FLASH的说明，英文的也可以，我看得懂的。谢谢！！！在下只是个医学生，先谢过了！freecell Perhaps the major benefit of split genes is simply the opportunity they provide for making many different proteins from a single gene thr ...

zhuxiangling123 主要有两个问题请高手指教一、我们现有一个单抗，氨基酸序列已知，如何分析其二级结构?如何分析其是否存在游离半胱氨酸及其存在位置。有没有专门分析抗体二级结构的软件？二、现在得到一个新的单抗的重、轻链基因，有没有软件能分析单抗重轻链匹配程度？freecell 1. Try Igblast.http://www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/igblast/2. http://www.lib.cau ...

榴莲宝宝 问一下“氨基酸序列突变 P194_H195dup"代表什么意思?谢谢！zhanglifei 同问同问，**freecell_在194位插入了脯氨酸，在195位插入了组氨酸。dup是Duplication。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

tyuanc 我用MO Bio的soil DNA Isolation Kit提取土壤总DNA，提取的DNA直接跑胶，看不见任何条带，采用细菌16S rDNA通用引物（27F和1492R)进行PCR扩增，也没有结果，有一次我将试剂盒提取的DNA50倍稀释后，进行细菌16S rDNA的PCR扩增，扩增出了目的条带，我所用的酶为Takara的LA Taq，用普通的Taq酶扩增不出来，但隔了一周后再去重复，什么条件都一样，却再也扩不出来了，我重新提取 ...

veer2 急问，怎样才能使前体miRNA 主要表达 star miRNA (miRNundefined)在下正在作star miRNA 的研究，想把前体miRNA 克隆到载体，然后表达成熟miRNA，但有一个问题，怎样才能使前体miRNA 主要产物为star miRNA (miRNundefined)呢，或者说怎样才能构建主要表达star miRNA (miRNundefined)的克隆呢，先谢谢了freecell My suggestion is using antisense inhibitor to block the domina ...

hyxqs 我是在校研究生，刚刚接触这些实验的问题，希望得到大家的帮助，谢谢。版主freecell留言:1、生化版只讨论理论答疑、学科进展、科研思路和教学方法探讨，不讨论实验技术。2、不要写缩写，要写出英文全名，才有利大家帮助你。freecell Asking google for more help.http://ajpcell.physiology.org/cgi/reprint/263/4/C851http://www.google.com/#h ...

lantianshi 想找一些转录因子的归类方面的相关资料，比如各种转录因子的DNA结合区的特征，结合区的序列，不知道有没有什么数据库什么的？我在分子生物学上看过一点，但是数量比较少。我是因为找到一个基因启动序列上面的很多的转录因子的结合，我只能一个一个查找这些转录因子是什么吗？yaoliduli82 我也想请教这方面的问题lantianshi 顶一下，看是否有回答sunpingli ：转录因子结合位点(Transcrip ...

ykzj1981 请教各位，我曾查阅文献，有人已经证实口腔鳞癌中存在STAT3的高表达，但Tca8113中是否存在，至今未查到相关文献，是Tca8113中不存在，还是没有人做，请教各位！qingguyouquan Tca8113是国产口腔癌肿瘤细胞株，好像是二医的，国外认可度低，楼主用它做实验效果可能不太好，并且最多发国内期刊。http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez建议更换细胞株。by ...

角色方向 我想问一下，基因转染是什么意思啊？例如Apt6i转染脊髓基质干细胞 能否详细解释一下？多谢！freecell 基因转染，通俗地说就是将核酸分子导入细胞。说得学究一点，就是将具有生物功能的核酸转移或运送到细胞内并使核酸在细胞内维持其生物功能。小舟儿 补充一点，我个人理解是：1.转染是把目的基因转入靶细胞（真核细胞）后，进而研究该基因功能的一种常见方法。2.与此过程相似的一个名词“转化”——把目的基因转入原核细胞后，进而研究该 ...

ws88523758 小弟对于实验处于纯菜鸟，糊里糊涂的做了半年多了，结果数据参差不齐，临近毕业，焦虑万分，特停高手们指导求救！我做的是大鼠的系膜细胞，用TNF-α刺激后，再用中药干预24h，测细胞上清中的ikb和NF-KB,用的都是ELISA法。ikb测值很低，据查当IKBα被磷酸化后分解后，P65和P50才能解离激活。所以，当刺激开始的时候，磷酸化的IKBα上调，IKBα下调。由于P65活化后又可以上调IKBα表达， ...

zhangzhen66 在一篇文章中看到如下一段话，怎么看也没明白怎么测得基因分型，请教下Activity phenotype methodRates of POase activity and DZOase activity were measured spectrophotometrically in serum according to the method described by Richter and Furlong (24). Briefly, POase and DZOase activities we ...

lantianshi 请教大家一下，如果我在ncbi上查找启动子时，发现基因有很多的mRNA joins和cd joins，那是不是说明该基因有很多的varient,那会有不同的启动子吗？我还是要取这个转录起始位点上游的序列来作为我的研究序列吗？初学者，敬待解答 ，说明一下我要查的这个基因没有相关文献报道过启动子的相关信息。阿呆硕士 基因的具体具有启动功能的序列并不是一定的，有启动功能的序列或许都有着启动功能，而且启动子的功能 ...

euniceyeh 想请问一下各位大侠？:?)做单核苷酸多态性位点分析时，要做Hardy-Weinberg平衡检验的原因是什么？是证明这个抽样样本来自于一个符合Hardy-Weinberg平衡的群体吗？为什么做SNP分析，一定要确保人群符合Hardy-Weinberg平衡呢？另外，是不是只要对照需做Hardy-Weinberg平衡检验，病例组就不必了？hj841023 同问哦freecell 是为了说明研究所选取的样本具有群 ...

dcr_80 细胞内信号蛋白 ：其功能是从细胞浆到细胞核的转位完成，量没有变化。除了SMAD家族外还有那些呢？好心的战友，帮帮我下。toddy99 STAT, nuclear receptors, NF-kB, beta-catinin,dcr_80 谢谢！！zfyyzz00 smad本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

littlekaka 我手头有一个胞浆蛋白，是一个离子通道的辅助亚基，我的实验设计希望它表达后上膜，现在我的初步设想是在这个蛋白的N端挂一个CD4，但是我担心CD4太大会影响我这个蛋白的本身功能（也许通过改变linker的长度可以减小影响），请问是否有人知道，有没有什么比较经典的改造方式，比如连一个其他什么蛋白甚至某段domain，而对蛋白本身的表达和功能没有影响，不胜感激！zhuqueleee 我记得以前看到一篇文 ...

pmlt 我想做nf-kb的激活，请问如果我只用western 做Ikba和p-Ikba的半定量检测可以么？细胞因子 可以，做完WB后用Image软件经行成像分析，可以半定量检测。园子里有很多这方面的帖子，你可以看看。doctormy pmlt wrote:我想做nf-kb的激活，请问如果我只用western 做Ikba和p-Ikba的半定量检测可以么？细胞因子 wrote:可以，做完WB后用Image软件经行成像分析，可以半定量检测。园子里 ...

海边海鸥 偶的题目大致是研究某一细菌产生ESBLs,其基因组中含有耐药基因，但是表型（药敏试验仍对该类抗生素敏感）阴性。可能存在某些机制使该耐药基因未表达。打算进行该两株的全基因组测序，想请教一下主要从哪几方面考虑未表达的可能性。谢谢大家:)海边海鸥 怎么没有建议呢？zhujoker 我来胡说2句吧，不知道细菌基因组有没有甲基化修饰，自己不做细菌，所以不能确定（但是偶刚才查一下的确好像有这个东西）。你的耐药基因存在不表达是不 ...

pengchen628 各位前辈现有一个问题请教。我是将Tie2/LacZ小鼠的骨髓单个核细胞移植到FVB小鼠身上，现在骨髓移植已经成功。我想鉴定FVB小鼠身上是否有LacZ基因，应该采取什么方法？注：转基因的Tie2/lacZ小鼠可以在内皮细胞专有启动因子Tie2的转录调控下持续表达β-半乳糖苷酶，可与X－gal染色成蓝色，被广泛用于细胞谱系分析。十分感谢！wbald 你都已经说了，X－gal染色呗。pengchen6 ...

kexuely 各位：我在园里里溜达了一下，基本没发现做植物miRNA的。我是做植物的，拟南芥和大豆。我查到的文献中从没见过植物中miRNA的knockout和knockdown，我想请各位讨论一下原因。先说说我的观点,因为对动物几乎很无知，说的可能不靠谱，敬请批评指正：首先说动物里miRNA的knockout和knockdown的方法，基因组水平的可能还是07年那个基因敲除的小鼠，用的是基因重组的原理，其他的像L ...

oliver1981 请问P53与磷酸化P53有何区别？ 多谢！freecell 野生到P53蛋白在维持细胞正常生长、抑制恶性增殖中起着重要作用，因而被冠以"基因卫士"称号。P53基因时刻监控着基因的完整性，一旦细胞 DNA遭到损害，P53蛋白与基因的 DNA相应部位结合，起特殊转录因子作用，活化 P21基因转录，使细胞停滞于G1期；抑制解链酶活性；并与复制因子A（replication factor A）相互作用参与DNA的复制与修复；如果修 ...