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pengchen628 各位前辈现有一个问题请教。我是将Tie2/LacZ小鼠的骨髓单个核细胞移植到FVB小鼠身上，现在骨髓移植已经成功。我想鉴定FVB小鼠身上是否有LacZ基因，应该采取什么方法？注：转基因的Tie2/lacZ小鼠可以在内皮细胞专有启动因子Tie2的转录调控下持续表达β-半乳糖苷酶，可与X－gal染色成蓝色，被广泛用于细胞谱系分析。十分感谢！wbald 你都已经说了，X－gal染色呗。pengchen6 ...

kexuely 各位：我在园里里溜达了一下，基本没发现做植物miRNA的。我是做植物的，拟南芥和大豆。我查到的文献中从没见过植物中miRNA的knockout和knockdown，我想请各位讨论一下原因。先说说我的观点,因为对动物几乎很无知，说的可能不靠谱，敬请批评指正：首先说动物里miRNA的knockout和knockdown的方法，基因组水平的可能还是07年那个基因敲除的小鼠，用的是基因重组的原理，其他的像L ...

oliver1981 请问P53与磷酸化P53有何区别？ 多谢！freecell 野生到P53蛋白在维持细胞正常生长、抑制恶性增殖中起着重要作用，因而被冠以"基因卫士"称号。P53基因时刻监控着基因的完整性，一旦细胞 DNA遭到损害，P53蛋白与基因的 DNA相应部位结合，起特殊转录因子作用，活化 P21基因转录，使细胞停滞于G1期；抑制解链酶活性；并与复制因子A（replication factor A）相互作用参与DNA的复制与修复；如果修 ...

antonio2001 细胞里的beta catenin 好检测吗？？ 用 western blot 和免疫细胞化学 ？？2008851029 细胞里的beta-actin非常好检测（我用的是ST的抗体）littlebee83325 什么细胞呢？胞浆蛋白么？magichunter beta catenin 好检测，细胞全蛋白裂解液上样20uL（15ug左右），8% SDS-PAGE就能够分出来，另外在检测beta catenin 的同时一般还要检测磷酸化的beta catenin ...

hj841023 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/224514928?report=genbank&log$=seqview&from=11637691&to=11820525刚开始着手实验前期工作，有很多不懂的，请教论坛里各位高手，如何看懂GenBank里的ATM基因DNA序列,以上是相关链接。谢谢各位指教了。:)freecell 请参考这个帖子：http://www.dxy.cn/bbs/pos ...

qinna767 系膜细胞中活性氧对一氧化氮的影响有种这方面的同志不？目前的文献有氧化应激下NO升高，也有活性氧升高，NO生物利用度降低，eNOS解耦联产生活性氧，NO降低的为什么会有矛盾的报道有人做这方面的研究不？大家交流一下新手上路，欢迎指教苏叶 我们目前做的类似实验验证了你的后一个观点，氧化应激引起eNOS脱偶联，NO生物利用度降低，同时也观察到NO产量降低，因为超氧阴离子消耗了NO，阻碍了其生理功能。不过在炎 ...

水可 RT，是用全透明的，还是黑色不透明的，还是白色布透明的。谢谢啦，michaelmichael 普通的96孔板就可以了。sosorunning michaelmichael wrote:普通的96孔板就可以了。:X透明的会有干扰的，黑色的会降低灵敏度，所以一般大家都用全白不透的板子。ffyy8888 晕，如是读板器直接读板的话，要选择底透明，壁不透明的96孔板:Dffyy8888 因为只有这样才能不干扰检测，且机器可直读荧光:o)mo ...

molrep 有哪位战友知道怎么做全基因组的基因knock-down,我听说有全基因组的shRNA文库,怎么用这个东西呢,谢谢bigbang_0_0 做转染，然后看你们所期待的表型有什么变化即可freecell 何不参考一下这篇文献？http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B8G3Y-4TT80P4-1&_user=10&_rdoc=1&_fmt=&_orig=sear ...

magic10号 今天刚买了merck公司的Tubulin Polymerization Inhibitor II但是里边没有使用说明书在网上也没有查到希望哪位高手可以给我相关信息也可以提供用过这种试剂的文献感激不尽！！freecell 你要什么样的说明书？它的产品说明里有篇参考文献，可参考之。magic10号 谢谢你啊不过我想要的是使用说明书就是用量之类的昨天查了文献也没找到具体的说明版主freecell留言:它的产品说明后 ...

mayingsheng 我想给慢病毒转染的RNAi带上抗药性筛选靶位和生物素酶的基因，有公司说不能同时带上两个标签，我的问题是：1、能否同时带上两个标记？2、那家公司可以做到：既设计RNAi及构建慢病毒载体，并带上以上两个标记？谢谢版主freecell留言:"那家“和”哪家“是不同的指代名词。ztxia 这里面主要有一个基因大小的问题，慢病毒载体一般要少于4KB，最好在2KB以下。同时带这两个标签可能超出的这个范围.版主f ...

163abcdc 请教大家问题，我在读文献时发现肿瘤细胞有p53 wild type,p53 null和p53 mutation 之分？请问有什么区别？谢谢！jiachengyou2007 p53 wild type: 可检测到基因表达，也具有功能；p53　null:相当于纯合性缺失，既检测不到基因表达，也无功能；p53 mutation 可检测到p53表达，但无功能。一已之见　欢迎拍砖版主freecell留言:非常感谢你精彩的答复，欢迎有空多来生化版做客。wylio ...

gingerdaming 做miRNA的报告基因，用的是miRNA mimics 和miRNA inhibitor转染.结果与对照相比，荧光强度miRNA mimics 对照〉miRNA inhibitor。本人第一次做双报告，望指教！jiachengyou2007 　　结果与想要的正好相反。　　请问你的荧光强度相差多少？建议下次再提问时把问题说得清楚一点。别人更容易直接回答。　　gingerdaming 不好意思，mimics的荧光强度约是对照的1.5倍，对照 ...

163abcdc 请教大家问题，我在读文献时发现肿瘤细胞有p53 wild type,p53 null和p53 mutation 之分？请问有什么区别？谢谢！doctormy P53基因分野生型和突变型，野生型P53基因即抑癌基因，对细胞增殖有控制作用和负调节作用；突变型P53基因丧失抑癌作用，促进细胞向恶性转化。p53 wild type-----表明该细胞的p53基因为野生型p53 null----------表明该细胞p53基因表达缺失p53 mutation ...

zhilan1985 我用抗肿瘤药物处理后细胞发生了凋亡，但是RT-PCR结果显示原癌基因c-myc表达上调，文献上在其它细胞实验中显示有下调的，有不改变的。感觉结果有些奇怪，请问在抗肿瘤细胞生长的情况下，有可能会使c-myc表达上调吗？还望了解c-myc的高手帮忙解答下，谢谢!doctormy zhilan1985 wrote:我用抗肿瘤药物处理后细胞发生了凋亡，但是RT-PCR结果显示原癌基因c-myc表达上调，文献上在其 ...

杨春勇 我想证明两种跨膜蛋白受体之间存在竞争性抑制,但不知道应用何种方法，两者的分子结构也不知在那里可以查到，请热心人给与指点，谢谢!freecell 哪个跨膜蛋白的受体啊？toddy99 如果你不知这两个受体的downstream的话，（就是说你无法通过检测下游effector的激活来看），最直接的方法是做IP受体，在表达和不表达另一个竞争受体的条件下，通过标记你的ligand，看是否存在对ligand本身的竞争。但是受 ...

旺仔小馒头天字号 小女正在动物身上造模，需要一个促凋亡的模型，请问大侠们哪些促凋亡药物效果好点呢，可否推荐些常用的促凋亡药物呢fsq6666 化疗药，如紫杉醇。ikewei 阿霉素 很容易引起经典的凋亡本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

山大真大 :):):)我最近在做一个ncRNA 的项目，希望大家能给我提供几款靶基因预测的软件我自己找过很多但都下不下来。。。最好能顺便提供教程zhujoker 呵呵，ncRNA可是一个大范围啊？你需要什么样的靶基因预测的软件？你做的是什么ncRNA，能否说的明确一点？山大真大 TargetScan miRanda DIANA2MicroT PicTar这之类的软件我在网上找的都不能用十分希望您能帮帮忙……zhujoker 直接在网上预测啊，好 ...

青翠林木 Mean SLR和meanCPV在图中用红圈标出了，不知道是什么意思，它们越大越有意义，还是相反呢？想从中挑一个基因出来，不知挑哪个freecell SLR: Signal log ratiosCPV: Change P-value由文献得知，这是Affymetrix公司提供的某个参数。自己去看吧，上面说得很清楚。http://www.affymetrix.com/support/technical/whitepapers/sadd_whi ...

苦难医生 请教做分子生物学的战友，本人是临床医生，在看篇外文文献，是关于PAPP-A 基因多态性的研究，在实验中提到PAPP-A IVS6+ 95(G/C)PAPP-A IVS6+ 95(G/C)和 rs13290387，我大约知道是这个基因95位的G/C多态性，但IVS6表示什么意思就不知道，另外rs no代表什么意思也想不起来，是基因库的序号吗？请战友给以解释，谢谢wxbing rs13290387 是一个SNP可在NCBI直接查询版主freecell留 ...

zhujoker 2篇文章，美国人做的。1.The Oncogenic microRNA-27a Targets Genes That Regulate Specificity Protein Transcription Factors and the G2-M Checkpoint in MDA-MB-231 Breast Cancer Cells。2.Oncogenic microRNA-27a is a target for anticancer agent methyl 2-cyano-3,11-dioxo-18b-o ...