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iceman340 本人现在实验，需要要用到MIFsiRNA用来干扰小鼠，请问各位高手，有谁做过这方面的实验，这个MIFsiRNA的用量是多少啊？？急求！！不胜感激iscience 你自己看看文献，不就知道了吗？再者说，你如果做这个试验，应该需要做不同梯度的siRNA吧？我告诉你，每只小鼠用0.01ng siRNA， 你相信吗？你就按照这个去做？iceman340 iscience wrote:你自己看看文献，不就知道了吗？再者说，你如果做这 ...

学习着 启动子上可以有多个不同的非经典的TATA-box吗？thomasz TATA有一个就够了。如果有多个TATA，就会有多个TFIID的结合位点，就会在多处装配出RNA合成机器。对于一个启动子来说，就算有多个TATAAA序列，同一时间也只有一个起作用吧。一个基因可以对应多个启动子，搜索一下关键词alternative promoter。启动子上可以有别的转录起始元件，比如Inr，DPE等等。学习着 在同一时间确实应该只有一 ...

girl19860627 E.coli修复DSB损伤与真核DSB方式比较？？版主freecell留言:提问的时候，要在标题说清楚问题。小长 DNA 双链断裂（DNA double-strand break, DSB）发生双链断裂的染色质部位被泛素化修饰后能够招募修复蛋白质到该部位对DNA损伤进行修复。DNA损伤反应信号网络（DNA-damage response (DDR) signalling network）可以依DNA损伤的不同而介导不同的修复 ...

荷满堂 想研究下肿瘤细胞的信号通路，不知道研究信号通路的方法可否与流式细胞术结合起来？请大家知道下！littlepiggie 这是一个不错而且可行的想法。细胞经过固定/穿透（fixation/permeabilization)之后，荧光标记的抗体可以进入细胞浆以及细胞核中，识别，比如说，蛋白质的磷酸化位点。之后，通过流式细胞仪检测荧光强度，就可以分析信号激活的程度。而这种方法的主要优点就是，可以同时标记细胞的表面抗原，进而 ...

yanjinghou 请问各位高手，怎么比对多个物种的同源蛋白序列？freecell google.com: multiple protein sequences alignment梧桐纷飞 dnaman dnasistthomasz 进入这里：http://www.ebi.ac.uk/Tools/muscle/yanjinghou 我下载了其推荐的软件，好像不能用。郁闷zhongkui 不是吧，google一下会有一大堆的了。用过几个，都挺好的，不过，几年前 ...

下沙 各位战友，关于NF-kB的激活，我查了一些资料，有人认为通过western研究P65的表达量可以反映NF-kB的激活。因为P65的磷酸化和IkB的磷酸化可以反映NF-kB的激活，我比较困惑的是到底采用western检测P65、磷酸化P65还是IkB呢？是检测胞浆中的蛋白吗？如果是检测P65，NF-kB激活时，P65是升高还是降低呢？谢谢！magichunter 1、提取细胞全蛋白，然后测定磷酸化的P65表达，如果表达 ...

hongandwang 平时交流中，发现对DNA转录成RNA的片段长度问题不是很明朗。究竟起始密码子前多长的一段DNA可能被转录成RNA？而终止密码子后又是多长的一段DNA可能被转录成RNA？从现有分子生物学教材看，似乎应该是起始密码子前的DNA不被转录成RNA（注：假设离前后基因距离较远），转录仅从起始密码子开始；而终止密码子后的40-50bp左右可能被转录成RNA，直至茎环结构前停止转录。不知此理解是否正确，请 ...

jiangxiaozi76 Highly specific gene silencing by artificial microRNAs in Arabidopsis。p1123页中，Figure2.B图中，箭头上方的分数表示什么呢？:)zhujoker Because ARGONAUTE (AGO) proteins cleave targets invariably opposite of positions 10 and 11 of the small RNA (Kasschau et al., 2003), the 5’ ends of ...

dxs_jhr 想做关于该课题的，请问哪位高人能够提供PKCβII是否在肝和肠组织有所表达，正常的生理情况下是否存在？非常感谢中licanming 建议查一下文献，我这里提供一张图给你参考：dxs_jhr 谢谢了，这个表我已经看见过，但是和您的有些出入，βI的表达好像是少数组织licanming 表我是在一篇文献上截下来的。文献我挂上来，你看看吧！dxs_jhr 非常感谢您的无私帮助本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前 ...

magichunter 我的药物现在已经证明能够减轻abeta诱导的细胞毒性。并且能够降低abeta诱导的JNK和p38 MAPK的磷酸化。我想接着用JNK和p38的抑制剂进行验证。但是不知道实验怎样设计？我的初步设想是：Group 1： 空白对照Group 2：abeta损伤组Group 3：abeta+药物 （低浓度）Group 4：abeta+药物 （中浓度）Group 5：abeta+药物 （高浓度）Group 6：abeta+JNK抑制剂Group 7：a ...

月亮欣 miRNA 在同一个靶基因上有两个作用位点，两个位点相距100bp左右，想请问各位战友，这种情况下，做靶位点的缺失和突变的话是不是两个地方都要做呀，如果只做一个的话，是不是说明不了问题，但是如果两个位点全部做突变的话，有可推荐的好方法没，谢谢freecell Refer to this paper:http://www.plosbiology.org/article/info:doi/10.1371/journal.pbio.0020 ...

cakeman 在肽键合成过程中 peptidyl-tRNA的2-OH of final “A”有什么作用？谢谢freecell WHICH "A"? Where did you find it?cakeman 有质子穿梭作用的那个 我也不知道是哪个。。。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

haidi1214 请教：能否利用RNA干扰沉默某一基因（如P53）的启动子进行沉默？这一想法可行吗？急盼回复！非常感谢！freecell Why not?See review below.The gene-silencing process of RNA interference (RNAi) involves the manufacture of short, double-stranded RNA molecules by an enzyme called DICER, which cleaves RNA dupl ...

麻木尔杜斯戈里亚 某基因的T1065G多态性?1065T/1065T基因型频率？-48G/-48G?某基因的（ATTT)n？某基因的G-1251C?freecell This "T1065G" notation means that the presence of a Thymine DNA base (Thymine is referred to as "T") instead of a Guanine ("G") at the DNA base 1065 (this a number is reference to where on the gene this repla ...

nickandjn 请问哪本细胞信号转导的书比较好？比如孙大业的《细胞信号转导》或者刘景生的《细胞细胞信息与调控》，不过都是几年前的了，有新版新版一点的吗？小玩闹 人卫出版的一本《信号转导》不错 最近在看 里面讲的还是比较全的 好像是05年出版的 不知LZ觉得新不新nickandjn 恩，上网查了一下，感觉确实不错，太感谢啦！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：sh ...

新手上路多包涵 查到文献,细胞缺氧可使其中的AKT CREB磷酸化水平下降(与正常组比较),给药后,二者的磷酸化水平升高,而且高过正常组,请问为什么?俺是新手,准备做这方面试验,对这个问题比较困惑.请高手帮忙解释一哈.版主doctormy留言:何种细胞，何种药物，这是信号转导问题的基本要素！？新手上路多包涵 继续请教新手上路多包涵 继续请教michaelmichael 如果该药物是akt和CREB的激活剂，就可以把它们的磷酸化水平提高 ...

mirfac 是EGFR过度表达形成了cancer，还是得了cancer，细胞异化了以后致使EGFR过度表达？另外，EGF会刺激EGFR过度表达么？mirfac 感觉有点糊涂，还是说这就是蛋跟鸡的关系wubuyun2009 原癌基因EGFR位于染色体7P1.1-1.3区域，在Squamous cell carcinoma 和Non-small cell lung cancer表达，其激活方式是突变。也就是说，原癌基因突变后成为癌基因，表达的EGF ...

chenzhicheng 请问每个个体的基因都不完全一样,那人类基因组计划各国科学家测的是同一个体的基因序列吗?还是....知道的请解释,这个问题一直没明白zjubell chenzhicheng wrote:请问每个个体的基因都不完全一样,那人类基因组计划各国科学家测的是同一个体的基因序列吗?还是....知道的请解释,这个问题一直没明白每个基因，大家都是有的，只是会出现很多SNP、突变、还有些染色体异常（插入，重复，缺失等），除去 ...

誓天 如题，本人现在研三，即将到博士报考，现在的导师帮我联系了一导师，我们现在做的是细胞方面的，但是所联系的导师的课题是量子点方面的，对那个不是很了解，故发帖，询问下，这个方向怎么样？谢谢.....zjubell 量子点只是一种技术，一个工具。所以并不要在乎技术工具是什么，关键是他利用这个工具做些什么工作的？现在量子点技术较为成熟，都已经开始商业化了。当然，如果你导师真的就是以量子点为研究对象的，那我想他应该是属于材料方向的，比 ...

beiyanyijiu 首先很感谢丁香园能开通这个版块，让有兴趣的人能聚在一起相互交流我想请教一下各位 “基于化学小分子的信号转导通路研究” ，这方面目前在国内似乎是个空白不知道有没有人了解一些国际的进展，或者影响比较高的综述，亦或者那些人在这方面比较有造诣真心请教，谢谢doge 首先本人非高手，以下仅供参考。这个有点太special了，实际上化学小分子（比如ligand)与受体的结合，引起下游的信号传递（包括小分子信号传递） ...