全部

yy59410 请问，我现在要测线粒体膜通透性改变即JC-1的检测，想问下国产的试剂盒里凯基的好还是碧云天的好。希望高手指路啊。freecell 效果差不多。yy59410 谢谢！还有一个就是我用JC-1测MMP,是不是没必要再用罗丹明测ROS了！我做的是凋亡检测！wudonghui3516010 我现在也是在用JC-1，效果很明显，就碧云天就可以。平时-20保存，用时稀释1000倍。美可爱的土豆 请问一下楼主有没有做用碧云天的试剂盒 ...

百分之7大脑 IP10（ interferon-inducible protein-10），即CXCL10，是1985年Luster等在研究IFN-γ诱发的免疫应答时从U937细胞中克隆到的。我想问的是IFN-γ是怎么诱发产生IP10的？IFN-γ的信号传导是否只有JAK/STAT途径？是否通过这条途径诱导产生IP10？我只知道的是IFN-gama的JAK/STAT途径，到细胞核，然后就不知道了，有哪位大侠给我解惑解惑？或者提供 ...

sounderxu 请问谁有clone manager软件，发给小弟一份，实验急用，万分感激邮箱sounder001@126.comfreecell 自己为何不在丁香园搜索一下？http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/2991955_0.htmlsounderxu 这个下载不了啊本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号 ...

tyw5668 请问是不是免疫组化、免疫荧光、Elisa？谢谢lianhongli 应该是酵母双杂、免疫共沉淀和共定位吧。gingivalis 不管答案是什么，千万不要以为这就是权威。方法是无限的。不怕做不到，就怕想不到。summityoung 1.酵母双杂交是初筛2.筛到得蛋白要用Co-IP、GST-Pull down进行验证bioyangyu tyw5668 wrote:请问是不是免疫组化、免疫荧光、Elisa？谢谢应该是楼上几位说的酵母 ...

yu_ting 现在,急需知道MDA-231是P53野生型的还是突变型的?多谢iscience 我用“MDA-231 p53”在google里面检索了一下，初步得知该细胞株系P53突变型（The human breast cancer cell line MDA-MB-231, which has high levels of a mutant p53...）。请参考：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16785993zhujoker The cell line is an ...

dongyunzhao 请问：http://pictar.bio.nyu.edu/网址打不开，是不是链接改了？freecell http://nematoda.bio.nyu.edu:8080/NBrowse/N-Browse.jsp?last=falsehttp://pictar.mdc-berlin.de/dongyunzhao 谢谢斑竹lya2009 这两个网址好像还不行。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的 ...

happylimi 请教：如何提取细胞中的cAMP？和普通蛋白的裂解buffer一样么？happylimi 知道和裂解普通蛋白的buffer不一样了，要用TCA将蛋白沉淀下来除去，但是后续报道有用乙醚洗然后用60度氮蒸干的，但是这个我们实验室没有条件做，还有其他的后续处理方法么？ylcui 如果实验室有进口的探头式超声破碎仪的话，直接加PBS超声破碎悬浮细胞即可。有时要加磷酸二酯酶抑制剂。贴壁细胞可以用一般的蛋白裂解B ...

vondolf 麻烦大家了！iscience 细胞内钙离子浓度很低，约为10-7mol/L,而细胞外钙离子浓度要高4个数量级，约为10-3mol/L，内外相差1000~10000倍。因此，当一种刺激能使细胞外有少量的钙离子进入细胞内时，就会使细胞质钙离子浓度大幅度增加，继而使与某些蛋白质或酶结合使其激活，引起生理反应，实现对细胞功能的调节。钙离子的细胞生物学功能在很大程度上是建立在细胞内、外钙离子的不平衡分布上，细胞质中的 ...

eeflying 目前有两种化合物，分别为Bcl-2和PARP的抑制剂，虽然这两个指标通常作为细胞凋亡的指标常用于分子生物实验，但是，如何证明这两个分子被抑制的实验却第一次碰到，请各位战友支招，我要直接检测哪个蛋白的WB 或者做什么实验合适？magichunter 用western检测bcl-2的含量变化，检测PARP活性裂解片段的含量变化以及原型态PARP的含量变化。eeflying 你和我犯的一样的错误，目前不是看PAR ...

丁一凡 近来看到关于重叠基因的资料，但是我看到很多资料有两种：1. 重叠基因都是存在于病毒等简单的生物的基因组中，而像高等的生物等复杂生物基因组中不含有重叠基因2.哺乳动物中的重叠基因(比较基因组)信息来源：生物中国人　更新时间：2004-6-20 17:26:00人的基因组有32亿左右碱基，但却只有约3万5千个编码蛋白的基因。按道理来说，每个基因应该可以“分到”比较多的长度，但是，令人不解的是，在哺乳动物基因组中存在大量的重叠基因（ ...

会跳舞的蛋糕 请问用于酵母双杂交的cDNA文库有什么特别要求？自己构建好还是公司构建好？iscience 没有什么特别要求。可以给公司做。如果说你自己做好，还是公司做好，那么只能问你自己了。有些人的文库做得比公司的好。zhj008 建议找公司做，自己做浪费时间，关键质量不好，还不会少花钱，我们以前自己做的，发现比公司做的质量差远了，成本也不低。可以找上海海科生物问下，他们做酵母文库很专业，我们实验室在那做过好几个了，都能筛选到 ...

sonny_zan 我实验的关键步骤，现在就是不知道有什么办法可以阻滞LPS刺激后PBMC分泌TNF-alpha，考虑过用p38 MAPK抑制剂SB203580，后来查到一篇文献说SB203580对LPS刺激后p38 MAPK的活性影响甚微或无。请各位大侠给点意见啦！我快急死了~~~xiongran 拿抗体把PBMC表面的TLR4封闭掉试试看！pureclear 可以考虑用TNF-a的中和抗体 可以中和细胞产生的TNF-a R&D公司有本 ...

zjhua 请问，找到一个基因，其蛋白定位在线粒体膜上。如果要进一步研究其功能，有哪些实验方法？谢谢了！iscience 线粒体是细胞进行呼吸的主要场所，在细胞代谢旺盛的需能部位比较集中，其主要功能是进行氧化磷酸化，合成ATP，为细胞生命活动提供直接能量. 催化三羧酸循环、氨基酸代谢、脂肪酸分解、电子传递、能量转换、DNA复制和RNA合成等过程所需要的一百多种酶和辅酶都分布在线粒体中. 这些酶和辅酶的主要功能是参加三羧酸循环中的 ...

paper1983_1983 哪位前辈能告诉我用液氮研磨小球藻，提取RNA的具体步骤？军人的炮 1.准备新鲜的小球藻，必须是新鲜的，否则RNA会降解；2.准备小的研钵，每次到一点液氮，快速研磨；3.每次不要等液氮完全没有，大约研磨3-5次；4.最后专用的RNA提取试剂盒按步骤提取就可以了。5.最重要是时间短，快，低温，不要污染。cffhappy 小球藻是单细胞的，不用研磨液可以吧？好好 cffhappy wrote:小球藻是单细胞的，不用研磨 ...

圈圈儿2009 请问有哪位朋友养有p53野生型白血病细胞吗？若没有，告诉我细胞种类也行，我已经查了很多资料了，白血病细胞大多数是p53缺失型的，只见到几个实体瘤是p53野生型的。课题急需对照细胞，一时找不到，若能帮忙，千恩万谢！alixtardxy No, most leukemia cells, except CLL, have WT p53.The problem is that leukemia cells generally overexpress MDM2 to promotes p ...

girl19860627 在很多教材或资料中，写到端粒的功能是都说“能补偿滞后链5'末端在消除RNA引物后造成的空缺”，那么在前导连复制中5'端也需要RNA引物，它也会被切除，不也会留下空缺嘛，那这种情况怎么解决啊？版主freecell留言:提问的时候，要在标题说清楚问题。iscience 前导连复制中5'端RNA引物切除后，在原核生物中由DNA聚合酶I来补齐。dll20088002 书上说是由端粒酶参与解决的，该酶可提供R ...

yaopeng205 DNA复制时RNA引物是怎么切除的，切除之后又是那个酶作用，将引物部分补上的iscience Discontinuous replication solves one problem but still leaves one matter unsettled: the lagging strand will be composed of individual, unjoined fragments of DNA and RNA. This is where DNA polymerase I comes into pl ...

iceman340 本人现在实验，需要要用到MIFsiRNA用来干扰小鼠，请问各位高手，有谁做过这方面的实验，这个MIFsiRNA的用量是多少啊？？急求！！不胜感激iscience 你自己看看文献，不就知道了吗？再者说，你如果做这个试验，应该需要做不同梯度的siRNA吧？我告诉你，每只小鼠用0.01ng siRNA， 你相信吗？你就按照这个去做？iceman340 iscience wrote:你自己看看文献，不就知道了吗？再者说，你如果做这 ...

学习着 启动子上可以有多个不同的非经典的TATA-box吗？thomasz TATA有一个就够了。如果有多个TATA，就会有多个TFIID的结合位点，就会在多处装配出RNA合成机器。对于一个启动子来说，就算有多个TATAAA序列，同一时间也只有一个起作用吧。一个基因可以对应多个启动子，搜索一下关键词alternative promoter。启动子上可以有别的转录起始元件，比如Inr，DPE等等。学习着 在同一时间确实应该只有一 ...

girl19860627 E.coli修复DSB损伤与真核DSB方式比较？？版主freecell留言:提问的时候，要在标题说清楚问题。小长 DNA 双链断裂（DNA double-strand break, DSB）发生双链断裂的染色质部位被泛素化修饰后能够招募修复蛋白质到该部位对DNA损伤进行修复。DNA损伤反应信号网络（DNA-damage response (DDR) signalling network）可以依DNA损伤的不同而介导不同的修复 ...