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lidonghong 各位坛友：大家好！请教一个问题：提取幽门螺杆菌基因组用哪个公司的试剂盒最好，试剂盒最好是越便宜提取效率越高越好！谢谢啦！freecell 哪个最好，取决于使用者自身感受。国产试剂盒大同小异，价格也没有多大差别。lidonghong freecell wrote:哪个最好，取决于使用者自身感受。国产试剂盒大同小异，价格也没有多大差别。谢谢本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方 ...

wymderek 本人目前在做肺癌基因检测，靶标方面的研究，手上的标本均为05---08年肺穿刺、气管镜的组织标本，既往曾经过福尔马林固定，石蜡包埋等处理，切片后行LCM（显微切割）选出肿瘤区域。小片组织细胞数约为50个细胞，我们的后续方法为从这样的标本组织中提取DNA（应用蛋白酶水解过夜，在蛋白酶失活方法，经过验证新近标本，均可成功），然后巢式PCR扩增，最后测序比对可能出现的突变或者缺失。我们检测的基因为EGFR及K ...

yin_xl 请教各位专家：对于终止密码突变，导致基因转录至下一个终止码才停止，这种突变引起的遗传性疾病，能否通过反义核苷酸特异性地结合在终止密码下游附近来强行终止翻译、以期产生正常的氨基酸序列？查了一下文献，没有看到资料。谢谢大家！zhujoker 这种技术在理论上现在是不行的，因为通过反义核苷酸会影响整个mRNA的稳定性，但是基因治疗是可以的yin_xl 谢谢！请问“用于基因治疗是可行的“这句话怎么去理解？是不是说通过载 ...

joo 如题，要做衰老，没有决定定哪家的SA-bata-gal的检测试剂，请教大家都用什么呀？另外看到碧云天很便宜，谁用过他家这个产品吗？joo 求助！joo 自己顶！zmz_1 I am using this in Boston, works very well. check the data sheet.applied biosystemshttps://products.appliedbiosystems.com/ab/en/US/adirect/ab?cmd=catNavigate ...

qiangshou2010 我想问个这几天一直想不明白的事情。现在人类基因组测序早就完成了，也开始了其它物种的测序，包括猴子---恒河猴，rhesus,这几天我查了猴子的几个基因，发现在它的序列里包括了一部分的N。这些N表示什么意思呢？是当时没有测出来？还是不能找到合适的样本，才测不出来的？在哪里可以查到序列完全测出来的物种呢？就拿猴子来说，哪种猴子的序列是测全了的呢？zhujoker N表示的意思就是Nucleosid ...

diving 做转录因子的WB必须要用核蛋白提取吗？平时的总蛋白提取包括核蛋白吗还是核被离心掉了？有时候好像有人直接提取总蛋白做磷酸化的检测了，为什么？xhjggl 还是选择使用专门的核蛋白提取试剂盒吧，一般而言，总蛋白提取时核蛋白的提取效率不高diving 提取总蛋白然后做的磷酸化水平比如P-Stat 有意义吗xhjggl 总蛋白然后做的磷酸化水平效果不好diving 谢谢！paroxysm 看情况吧。比如STAT3是通过705和 ...

daydayblue212 小菜鸟求助各种大虾gene amplification 、gene gain、gene loss、gene deletion都是什么意思啊DNA copy number gain 和DNA amplification刚开始学看文献，不知道两者的区别是什么万分感谢zhujoker 都不想回答了，自己不会google一下吗？freecell gene amplification : 基因扩增gene gain：给缺乏某种基因的细胞“添加”上去gene ...

huangaiyou 请问miRbase里的miRNA前体的图是用什么软件画出来的？感觉简单明了，很好。有些文章里的图也很好，见附件。但不知道怎么画的LoftyMan 哥，这好像不能称为图片吧，这个东西用Word或者Powerpoint就可以做出来吧huangaiyou 不是吧？难道手动画的？本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiong ...

伊果 目前我通过原核表达系统获得一个可溶性蛋白，是一个原核生物蛋白，目的是想看看它是否为一真核生物死亡受体的配体。请问需要做什么实验，提供怎样的证据才有说服力？谢在先！LoftyMan 1. 该蛋白刺激细胞，观察受体和受体下游分子的表达情况有没有变化2. 该蛋白刺激细胞，该死亡受体的激活会引发什么？知道的情况下看该情况是否发生3. Luc4. IP加IB5. confocal和FRET伊果 若用蛋白直接刺激细胞，蛋白需要在固相包被么？死亡受体是 ...

yums 由骨髓间充质干细胞逐渐分化为成骨细胞，有那些信号通路参与，其中最关键的细胞因子是什么？希望大侠们帮助解答。zmz_1 Wnt signaling,LRP5Runx2check out Dr. karsenty paper, most of them are in Cellandi1949 发错了，不好意思本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

cdduanshui 请教各位大虾一个问题：胞质分裂失败的细胞能存活吗？有说能活的，也有说不能活的，因为很多肿瘤细胞都是多核的，通过抑制胞质分裂来抑制肿瘤生长可行吗？请大家不吝赐教，谢谢。lincky2011 关键是看你的细胞的性质而定的！cdduanshui 肿瘤细胞zhujoker 这的确取决于你的细胞系以及细胞的特性，不是所有的肿瘤细胞一概而论。但是作为肿瘤细胞，一般胞质分裂失败不会影响其生存，因为其异质性的特点很显著。 ...

琼琼qiongqiong 请问各位：买抗体和PCR试剂哪个公司好点？？？希望大家多多推荐，我是新手，没有经验！先谢大家 啊。biolinkphilic 这个看经费和采用的研究手段，以及对结果的要求综合起来再做决定吧。noforever_hh 我们的购买抗体做法是：1；实验室如有人用过，效果不错，就沿用。2；没人用过不了解，就查文献，级别高些的文章，看人家的结果，然后参考他们的试剂选择的公司。PCR的试剂现在很成熟了，几个大公司的都不错， ...

zaiju512 求Ca2+振荡产生Ca2+波通过缝隙连接传递的彩图！！谢谢！！zaiju512 急需！！！zaiju512 自己顶起！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

xying316 站内的各位仁兄仁姐：请问有谁买过上海复蒙的细胞？质量如何，可以给点建议吗？非常感谢！zjubell 买细胞还是去上海中科院的细胞所吧。正规点。xying316 好的，谢谢zjubell本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

noworrynoworry 请问各位前辈，Pyk2（Pyk2信号通路)有特异性抑制剂吗？哪里能买到？noworrynoworry 拜托各位，帮帮忙啊diwen FAK/ Pyk2 tyrosine kinase inhibitor (PF-562271)http://lifesciences.b-bridge.com/products/detail/1440/PF-562271_FAK;_RTKs_Kinase_Inhibitor不知这个公司有无国内 ...

myskite 将以构建的microRNA质粒稳转至细胞系，有人做过吗，分享一下。bioenw 我做过miRNA的稳转实验，我们可以进行交流。版主zhujoker留言:不要轻易留邮箱以及联系方式。可以站内PM，也不要变相打广告myskite 我已经构建了pcDNA3.1(+)-premiR的表达载体，正在准备细胞。据说，这个实验，细胞爱死？还有，用G418溶于培养液后，用滤吗？如何挑单克隆？wingofwind1029 我用pcDNA ...

gaimong 有一个问题想请教一下大家：已知一蛋白N端和C端部分氨基酸序列，如何从基因组中将目的基因克隆出来，并对表达产物进行鉴定？查了一下资料，好像说用简并引物PCR可以，不过对这种方法不太了解，所以也不太确定。希望有高手能指点一下，谢谢bigbang_0_0 用简并引物屁一下cDNAholywater 太简单了，查NCBI blast.,,本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以 ...

miaoduan 如期，我要做wnt通路，欲用licl抑制gsk3β，licl溶液应该拿什么溶剂配置啊（三蒸水？PBS？）谢谢zmz_1 三蒸水可以，不是很容易溶解，然后过滤，一般避光4度保存使用。kailiang 楼主做得怎么样了？我也要做wnt方面的东西，想请教你的LiCl是怎么配的，设定药物浓度梯度的时候是怎么设的，还有楼主做什么细胞系。谢谢！观清 请问，我要做激活WNT经典信号通路，可以用licl抑制gsk3β来激活吗？本文 ...

yaqingxinlan 请问哪位知道Axygen的DNA甲基化的纯化试剂盒在哪里能买到？怎么联系，非常感谢，急急急急急honglian198410 推荐你用ZMYO的甲基化试剂盒，我们用的这个比较好，只需要改良一下他的protocoltyssxlth 我用ZMYO的做不出来，用传统的方法做出来了。贺龙23 请问怎么修改ZYMO公司的甲基化硫化试剂盒的protocol？hugasis 不采用半小时进行亚硫酸盐进行修饰，你真O ...

粘豆包 想研究药物减轻肝脏缺血再灌注并探讨细胞通路。请问有细胞水平的肝脏缺血再灌注模型如何建立？diving 看到有文章在细胞水平用低氧复氧 感觉是缺血再灌注模型的体现外科长征 我目前正在做johnyeungkc 细胞水平的I/R，我们实验室是通过缺氧/复氧来建立的，装置也是自己用乐扣的盒子自制的，chuckdouble 粘豆包 wrote:想研究药物减轻肝脏缺血再灌注并探讨细胞通路。请问有细胞水平的肝脏缺血再灌注模型如何建立？调整3 ...