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蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即 Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。蛋白质印迹法（Western Blot）是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物 NC 膜或 PVDF 膜上，然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检 ...

作者：段涛大夫 在最近的一次会议期间，听到几位专家聊天，说现在很多医院的政策是要逐步引进“千人”（千人计划），或者是“青千”（青年千人计划）来做临床科室的科主任。这基本上代表了不少大学附属医院的想法和做法，理由是大学附属医院需要学术型的学科带头人。学术型医院对临床科主任的要求一个理想的临床科主任的要求是医疗、教学、科研、管理样样精通，基本上是按照既要、又要、还要、还TMD要的标准来的。按照某些临床科主任的说法，这种要求有些变 ...

参考区间是目前国际通用的规范术语，通常又被称为“参考范围”、“正常范围”、“正常值”等。在临床实际中，临床检验已成为疾病诊断、预后判断、疗效评价及健康监测的重要手段，检验项目的参考区间则是疾病诊断和健康评估最主要的依据。在临床检验项目中，往往会因种族、性别、年龄、生长发育等因素的差异而导致参考区间的不同，同时参考区间还会受人群所在地域、经济水平、生活习惯、饮食结构等诸多因素的影响。参考区间的准确性、适用性直接影响着疾病的 ...

凡符合卫生部、人事部印发的《预防医学、全科医学、药学、护理、其他卫生技术等专业技术资格考试暂行规定》(卫人发164号)中报名条件的人员，均可报名参加相应级别的考试。临床医学检验专业： 报名参加临床医学检验技士/技师/主管技师资格考试的人员，要遵守中华人民共和国的宪法和法律，具备良好的医德医风和敬业精神，同时具备下列相应条件： (一) 参加临床医学检验技士资格考试取得临床医学检验专业中专或专科学历，从事本专业技术工作满1年。 (二)参加 ...

案例：通过 RNA 测序分析帕金森病中白血球的长链非编码 RNA 及选择性剪接的调控背景：人类寿命的延长伴随着神经退行性疾病的发病几率的增加，因而价格不贵的血液诊断的发展迫在眉睫。通过 RNA-seq 分析血液细胞的转录本是发现新的生物标志物的非常高效的途径。目的：利用 Illumina 测序平台对帕金森病人白血球中 lncRNAs 进行分析，探讨其对 mRNA 选择性剪接的调控机制。结果：通过对帕金森病人的 RNA-seq 结果分析发现，在白血球中有 6000 个以上 ln ...

案例：应用全基因组测序和 RNA 测序来描绘常见的变异型免疫缺陷综合症（CVIDs）的基因图谱背景：常见的变异型免疫缺陷综合症（CVIDs）是机体免疫应答反应中不能产生抗体的最主要原因。CVIDs 变异度很高，大概 5% 的病人是由基因改变引起的。目的：利用 Illumina HiSeq2500 和 HTSeq 测序平台对 CVIDs 进行全基因组及转录水平的研究，揭示并绘制 CVIDs 的信号调控图谱。结果：通过对 CVIDs 基因组和转录组进行测序和综合分析发现， TNFR ...

案例：以结肠癌，卵巢癌，特发性肺纤维化及正常的人组织为例探讨 circular RNAs 的富集与增殖的相关性背景：最新研究表明，circular RNAs 大量存在，是构成生物体 RNA 网络的一部分，而且研究者们推测 circular RNAs 与 miRNAs 一样具有生物学功能。目的：利用 Illumina 测序平台对细胞增殖速度不同的样品（正常组织和细胞，不同肿瘤组织和细胞，非肿瘤疾病组织和细胞）的 circular RNAs 进行分析，探究 circular RNAs 的富集与 ...

六、MTT 结果分析关于如何计算 IC501、改良寇式法：lgIC50=Xm-I(P-(3-Pm-Pn)/4)Xm:lg 最大剂量I:lg(最大剂量/相临剂量)P: 阳性反应率之和Pm: 最大阳性反应率Pn: 最小阳性反应率举个例子：各药物浓度作用于某肿瘤细胞后所得 MTT 值如下公式中的最大最小阳性反应率就是最大最小抑制率抑制率=1-加药组 OD 值/对照组 OD 值，如对于 100ug/ml 的药物，其抑制率=1-0.080/0.614=0.869，各组抑制率如下：代入计算公式：Pm=0 ...

五、MTT 法实验步骤1. 胰酶消化对数期细胞，终止后离心收集，制成细胞悬液，细胞计数调整其浓度至 5~10×104/ml。细胞详细计数方法请参照易生物实验技术中的相关文章。对于初学者而言，要使细胞达到 5~10×104/ml 往往不知从何处着手，我在这里向大家提供一个简单的方法以初步确定细胞数量。以一般细胞培养常用的 25 cm2 为例，1) 细胞密度在长到约 80%~90%（下图所示为 80%~90% 密度时细胞的大致状态），消化离心收集后，将上清去掉，加入 3 ml 培养基使其 ...

四、实验所需材料1．MTT 溶液的配制通常 MTT 配成的终浓度为 5 mg/ml, 须用 PBS 或生理盐水做溶剂。市面上一般 MTT 的包装为 100 mg,250 mg 或 1 g1.1 对于 100 mg 这样的小包装，厂家都是将 MTT 放入小管中的，个人建议不要再用天平称量分装，而应该一次性将其全配制成溶液，如 100 mg 用 20 ml PBS 来溶解。具休做法：预先在 50 ml 离心管（没有的话，可用培养瓶替代）加入 20 ml PBS，从中先吸取 500-1000ul PBS 装入含 MTT 的小管中，吹打若干次后将其移入 50 ml 离心管，然后再混匀。可以重复 ...

一、MTT 是什么MTT 是一种粉末状化学试剂，全称为 3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，汉语化学名为 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。二、MTT 法用来做什么简单地说：是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT 主要有两个用途1．药物（也包括其他处理方式如放射线照射）对体外培养的细胞毒性的测定；2．细胞增殖 ...

MTT 原理MTT 全称为 3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，汉语化学名为 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。MTT 比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能够代谢还原 MTT，同时在细胞色素 C 的作用下，生成蓝色（或蓝紫色）不溶于水的甲臜（Formazan），甲臜的多少可 ...

德国易必迪 ibidi 公司专注于细胞培养及功能实验的耗材及仪器开发（见图 1），目前已研制出一系列广受好评的细胞功能实验的相关产品，例如研究细胞迁移的 culture-insert 产品、研究细胞侵袭的 ibipore、研究血管生成以及细胞趋化系列产品等。我们知道在这些功能研究中，除了做好实验部分，数据分析也是很非常重要的一个环节。图像处理往往会消耗工作人员大量精力，而且容易带入人为主观性，导致所得结果的准确性和可重复性稍差。ibi ...

高通量测序技术已广泛应用于植物研究中，但植物材料中较多的蛋白质、多糖以及酚、脂类等次生代谢物质，提取核酸的难度往往比动物或原核生物样本大，因此如何从植物样本中得到高质量的核酸进行后续的测序，成为在植物高通量测序应用中的首要因素。根据核酸类型，可有如下制备方法可参考：1. 植物基因组 DNA主要应用于植物的全基因组测序、重测序等。植物的全基因组测序要求基因组 DNA 量至少在 50~100 μg，可采用经典的 CTAB 抽提方法，配方和步骤如下： ...

二、出国留学博士生的学习体会要在高起点上开展学术研究，阅读英文原文是不可或缺的环节。英文文献阅读的重要性不需赘述，国内多数理工科院校的研究已经实现了和国际的接轨，管理和经济学科相对滞后，但是部分团队已经走在前列。中 文文献看多了之后就会发现很多内容似曾相识，英文文献在内容的广度和深度方面更胜一筹。阅读英文文献的目的不是为了论文增加几个参考文献而看上去好看，当 然国内有些人是这么做的，更有甚者为了增加英文参考文献而引 ...

（三）如何进行文献阅读其实做科研，不 看文献要做好科研，可以说一点可能都没有。只有广看论文，深入学习，才能厚积薄发，写出响当当的文章出来。读文献一定不要心浮气躁，或者就是想着混个毕 业。相反我们要沉下心来，大量阅读文献，在读的过程中有的文献看懂了，但是看不懂的文献也可能会居多。看懂的认真学习借鉴，看不懂的 深入探索，实在不行就暂时放下，过一段时间，随着知识和能力的提高慢慢也就弄明白了一些。即使还是看不懂，但是心里知道有那么回事， ...

（二）如何快速而准确地获得最新的科研信息如何快速准确地从浩如烟海的信息海洋中获取所需的信息，并学会分析、利用信息资源已经成为人们立足于信息社会的一个重要技能.提高自己在当今复杂的信息世界中准确、快速地获取信息的能力, 对我们科研人员是至关重要的. 我们要时时刻刻了解最新的科研成果,最主要的途径还是要了解最新的科研文献, 但是对于我们常用的数据库, 我们又不可能每天都去访问一次数据库来查看是否有最新的文献出来, 而对于许多国外的 ...

通过深度测序分析乳腺癌中microRNA的序列和表达 背景： microRNAs 调控很多对肿瘤发生非常重要的基因。乳腺癌中很多 microRNAs 是下调的，但系统的乳腺癌中 microRNA 的表达分析还没有被报道。

常言道“文不厌百回改”，文章是改出来的，不是写出来的，好文章更是源于不断的修改。一篇成功发表的 SCI 论文在修改这条路上也是千回百转的，今日小编就与手机前的你来分解分解其中之玄机所在。首先，我们大可以根据修改的程度将其分为大修和小修两种情况。小修就表示我们傲娇的审稿大人对你的文章是认可的，在加之一些语句和格式的修改即可走向发表的光明大道，这当然也是广大投稿者们欣欣向往的一种结果。那如果论文要进入大修则表示文章还是有 ...

小编我日夜写作，也称得上是 SCI 编辑中的高产份子了。看过人家的文章的人都知道小编是一个特别接地气的人，清一色的大白话。但是呢，今天在这里要我郑重其事的告知各位，咳咳，人家要是高大上起来，也是专业到不要不要的呢，话不多说，且听 SCI 之作图四大原则！原则一：分辨率多数期刊对不一样的图也会有不一样的要求，一般情况来说（注意咯，要开始拽英文了！），有三种要求：1、line artwork（纯纯的黑白图，没有中间颜色）是要求最高的，1200d ...