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做感受态的小女孩刚进实验室，师兄就神秘兮兮的对我说，「小师妹啊，师兄我最近要做一项非常伟大的研究，非常需要你的协助。」我：「（星星眼）好哇，要我做什么？」师兄：「听好了啊，师兄我要将扩增好的启动子序列重组到载体中，再将这个重组 DNA 分子导入细菌体内进行表达喔，是不是非常伟大？」我：「（继续星星眼）嗯嗯」师兄：「这个艰巨的任务现在就交给你啦，很简单的，你先做个感受态出来，再将我构建的质粒转进去就好了。"我：「..........（感受态是什么鬼，能 ...

蛋白质免疫印迹（Western Blot ）可以：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA 相互作用后续分析。实验方法原理———底物化学发光 ECL 法Western 免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。与 So ...

一、ELISA实验中血清的采集、处理和保存1、 真空采血针采集2ml新鲜血液，加入无菌试管中2、 采血后室温静置1小时3、 将采集血液用离心机4℃，2500rpm离心10min，，将离心好的匀浆留上清，弃下面沉 淀。 4、 取上清。 分装冻存备用， 2-8℃下，可放置保存24-48小时； -20℃下，可放置保存1个月； -70℃下，可放置保存6个月5、 根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。 大部分ELISA检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集，应注 ...

对于刚入门的科研小白，免疫组化步骤较为繁琐，而且一步错，步步错，有时候明明觉得自己都按照老师们提供的条件做，可惜就是没有得到预期结果，现我将自己的些许体会分享如下。关于免疫组化的定义，原理，分类，优势等不再一一介绍（丁香园等主流平台都有介绍），我只叙述我认为「比较小」的问题，但这些往往决定了成败，遗憾的是我检索了比较多的资料，都没有详细的提及这些问题。1取材与制片① 一定要按照标本的标本留取要求留取，譬如某组织要求固定前 ...

一些期刊对于稿件的要求还包括了 Graphical Abstract，即图文摘要，用来清晰、简洁地展示研究工作最主要的信息，与论文标题同样重要。尤其是一些影响力大的顶级期刊，大部分都会要求作者提供。有的作者对于论文写作还能从容应对，但制作一张美观且符合审稿人和读者口味的 Graphical Abstract 却着实被难住了。一旦期刊要求他附加提供一张图文摘要的时候，其内心是崩溃的。关于制作图文摘要的注意事项，我们在此提供以下 6 点建议 ...

引言医学综述论文日益受到人们的关注，也变得越来越不可或缺。面对大量的科学出版物，「紧跟文献」已经成为很多人难以逾越的障碍，因此研究人员和临床医生们亟需综述论文。随着综述文章涵盖内容的增加，其质量和可靠性的重要性也随之加强。一篇可靠的综述，不仅会描述其信息的来源和方法的选择，阐明支持关键观点的证据类型和支持力度，也同时会申明来源、成果及利益冲突 。医学综述论文分类本论述所讨论的仅限于医学综述论文，不涉及其他科学领域内 ...

研究论文的讨论部分使作者有机会深入阐述自身的工作，描述其创造性内容和独特见解，并将其发现与现有知识进行比较，承认其局限性，并为进一步研究提出问题。不幸的是，讨论部分往往具有严重的缺陷——作者可能过分夸张或赞美自身的工作；进行过多的文献综述；不必要地重复引言中提供的研究背景；重复给出结果部分中的数据；讨论冗长、篇幅过长。实际上，讨论应该紧紧围绕研究主题。以下是我们关于讨论部分写作的具体说明性的建议：讨论部分，应以阐述 ...

啊啊啊，要怎么样才能 KO 肿瘤小怪？急求，在线等！--日夜奋斗的医学君「嘿嘿，让小编来拯救陷于水火中的你，教你如何四步打败肿瘤小怪，顺利升级。第一步：体细胞变异检测，知己知彼方能百战不殆。第二步：易感基因筛查，铺开战线，地毯式搜索。第三步：NMF 突变频谱和突变特征分析，搞清局势，开始攻城略地。第四步：高频突变基因统计及通路富集分析，见缝插针，顺利 KO！小伙伴们，看明白了吗？贴心的小编将结合真实案例，为大家详细讲解肿瘤对抗攻略，Let's go ...

随着中药科技的不断发展，近年来出现了诸多新技术、新方法，如中药分离纯化技术与测试、仿生提取法、高速离心分离技术等。这些新技术和方法的应用，使得中药分离既符合传统的中药理论；又能达到高效分离和纯化的目的，本文简要介绍了该方法原理及具体的实操方式（实例），这些技术在中药分离纯化的研究方面有着重要的参考价值和运用意义。一、标准物质研究1、指纹图谱研究2、特征成分制备分离3、结构鉴定4、标准物质稳定性研究二、生产工艺研究小试 ...

据估计，因抗体质量不佳， 生命科学领域每年的损失达到 8 亿美元。这也造成了无数的实验失败，浪费了宝贵的资源和科学家的时间。尽管科学界已经意识到这个问题，但目前仍然缺乏抗体验证的整体框架。为了刺激研究界实现更高标准的抗体重复性，国际抗体验证工作组（IWGAV）于 2016 年 9 月份出台了一套抗体验证指南并发表在《Nature Methods》杂志上， 题为「A Proposal for Validation of Antibodies」, 强调了抗体验证需要针对应用和 ...

Western Blot 现在仍然是检测和分离蛋白最常用的一种实验方法，但是要想得到较好的结果并不容易，只有找到合适的实验条件并进行优化，才能以更少的时间得到更多的结果，达到事半功倍的效果！下面是 R&D Systems 品牌为您推荐的免疫印迹优化步骤和实验涉及参考数据：一抗浓度对实验结果的影响抗体：Human/Mouse/Rat RSK1 Antibody (Catalog # AF992)样本：人 HeLa 细胞 (Fig.1)A：5% 脱脂奶粉封闭，一抗浓度：1.0 ...

本文重点讲述 IHC 操作流程中的关键步骤，并提供数据以支持及解释 CST 在实验过程中所提的建议。最后，本指南列出了 CST 科学家内部常用且最适用于与抗体配套使用的 IHC 试剂。抗原修复—热诱导的抗原表位修复 (HIER)缓冲液适用于 HIER 的缓冲液有多种。而 CST 常推荐的两种缓冲液是：pH6, 10 mM 柠檬酸盐缓冲液和 pH 8, 1 mM EDTA 缓冲液。缓冲液是否适用于您的实验取决于您所使用的一抗。请查阅产品说明书中所推荐的用于特异性抗体的修复缓冲液。一般而言，EDTA 缓冲 ...

Toxic, hot, and spicy: Nanodiscs improve membrane protein resolution in cryo-EM毒、热、辣：Nanodisc配合冷冻电镜提升膜蛋白的分辨率(作者：Cube Biotech) Nanodisc结合冷冻电镜应用时，Nanodisc提升了通过冷冻电镜对膜蛋白的解析率，同时揭示了功能性磷脂所扮演的重要角色。The last few years have seen a tremendous increase in high-res ...

每当要搞从未做过的实验时，总会抓狂，到哪找 Protocol 呢？别急，下面让我们一起开启寻找 protocol 之旅。一.搜索引擎不过多解释，想要在网上找东西，就靠 Google。在此给出一点建议：多用 Google.com，多搜英文关键词。推荐搜索引擎：Google.com, Bing.com二.权威 Protocol 网站网上有许多专门以 protocol 为主的网站，现举例最有名的：1. Nature Protocol重点推荐「Discussion Forum」「To ...

1.转染技术介绍近几年，转基因研究已经成为分子生物学领域的研究热点，范围已经渗透到医学，农业等多个领域。在转基因动物的制备过程中需要经历基因克隆、细胞转染、胚胎移植等几个步骤，而细胞转染技术则是此过程中的重要环节。细胞转染技术是采用一定的方法和途径将外源核酸分子如 DNA、RNA 等导入特定的细胞并表达目的基因，产生特定功能的蛋白质分子。在生产转基因动物的研究中，通过结合细胞转染技术与体细胞克隆技术培育转基因动物是一 ...

荧光能量共振转移 （FRET）检测活体中生物大分子纳米级距离和纳米级距离变化的有力工具，广泛应用于生物大分子相互作用分析、细胞生理研究、免疫分析等。原理当供体荧光分子的发射光谱与受体荧光分子的吸收光谱重叠，并且两个分子的距离在 10nm 范围以内时，就会发生一种非放射性的能量转移，即 FRET 现象，使得供体的荧光强度比它单独存在时要低的多（荧光猝灭），而受体发射的荧光却大大增强（敏化荧光）。应用1、生物大分子结构和功能研究：细胞膜 ...

对于科研狗的我来说，文献是每日必备、实验是每日必备、陪男朋友是每日必备、甚至点拨点拨师弟师妹也成了每日必备……然而，我每天只有 24 小时啊，看不完的文献，做不完的实验，毕不了的业。后来，我发现在工作量一定的情况下，我必须提高工作效率。各种「科研神器」「实验技巧」成了我的生活必备。今天和大家安利的是一款实现文献图文一页，快速阅读文献的小软件。以前， 我是这样看文献的科研狗的你，对于这样的情景应该很熟悉吧。下图左边是 Fig3 对应的文字描述 ...

抗体制备是免疫学研究的基础。制备一个合适的抗体将会决定着免疫实验的成败。抗体制备过程涉及到很多个方面，比如免疫原如何设计、免疫过程的优化、目的抗体筛选、抗体纯化、应用鉴定等。接下来我们将会对一些关键的技术难点进行解答。1. 免疫原是如何设计的？有什么原则？解答：免疫原可以是天然蛋白也可以是重组蛋白，甚至是多肽、DNA，所以免疫原的设计主要从两个方面考虑：免疫原分子的特点抗体应用。结合免疫原分子的特点，抗体的应用可以提供 ...

「叮」的一声，一封邮件不期而至。打开一看，历时近 2 个月的外审结果终于回来了，迅速浏览一下邮件，得到两个信息：1. 这是一个 Major revision；2. 修改意见很详实，4 个 General comments，21 个 Specific comments。默默告诉自己，沉下心来好好干，希望很大，最终返修回去一周即录用。面对审稿人挑剔的目光，我们该怎么做，才能顺利通过外审呢？一. 态度态度很重要。历经千辛万苦完成一篇论文，易稿几十次，投稿被拒数次，自信心重度被创， ...

一.PDF 转为 Word有时，大家需要将一个 PDF 文档转为 Word 文档，首先我们就来学习如何将 PDF 转为 Word 。至于如何将 Word 转为 PDF，只要用 Word 2010 及以上版本打开后另存为 PDF 即可。如果安装了 Adobe Acrobat，也可用虚拟打印机打印成 PDF。OK，回归主题，我们用 Acrobat 打开一个 PDF 文档。然后，「文件」→「另存为」→「Microsoft Word」→「Word 文档或 Word 97－2003 文档」。就这么简单，等待软件将 PDF 转换为 Word 吧。我们来看看效果：看，基本 ...