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由于细胞已经在生长培养基中悬浮，所以无需酶的作用使其从培养容器表面脱离，方法简单。材料准备：1、装有悬浮细胞的培养容器。2、完全生长培养基，预热至 37℃。3、37℃ 培养箱，充有二氧化碳浓度为 5% 的湿化空气。传代流程：一、直接传代法1、待悬浮细胞长满至 80%～90%（细胞悬液变黄），即可传代；2、用吸管吸弃细胞悬液 1 / 2～1 / 3；3、加入适量的新鲜培养基，继续培养。二、离心传代法（在发现有细胞碎片的情况下）1、将细胞悬液转移到离心管内；2、150 g 离心 5 min，弃 ...

贴壁细胞需要用到一种特定的试剂——蛋白酶，其作用是切断细胞和容器之间，细胞与细胞之间的相互粘连，用蛋白酶处理细胞的过程叫做「消化」，「消化」之后的下拨会形成单细胞并从容器底部掉下来。最常用的蛋白酶是胰蛋白酶。材料准备：1、预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS 液和胰蛋白酶的瓶子放入 37℃ 水浴锅内预热；2、用 75% 酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手；3、正确摆放使用的器械：保证足够的操作空间，不仅便于操作而且减少污染；4 ...

① Heart 揭示 GDF- 15 水平与 PH 成人死亡或移植风险的关系尽管生长分化因子- 15（GDF- 15）对各种疾病的死亡率具有预测价值，但它作为肺动脉高压（PH）的预后生物标志的相关性仍不清楚。近日，心脏病领域权威杂志 Heart 上发表了一篇研究文章，该研究旨在调查 GDF- 15 与 PH 成年患者预后之间的关系。研究人员测量了 103 名患者 GDF- 15 水平（中位年龄为 59.2 岁，65% 为女性，51% 肺动脉高血压）。76 名患者 GDF- 15 水平升高（74%）。中位随访 3.4（IQR 为 2.3 - 4.6）年后，32 名患者（ ...

细胞信号通路图是科研研究过程中最常见也是最常用到的，今天小编给大家安利这个 pathway builder tool 软件，简单易学，即便是零基础的同学，也可以做出漂亮的信号通路！优点：操作简单，任何系统下都能使用。缺点：软件反应比较慢，分子结果不够全面，比如没有 LncRNA 与 microRNA 分子图。一、软件功能简单了解1. 下拉软件右侧 Templetes 对话框，会出现各种信号通路模式图①PATHWAY TEMPLATES 下方四张图为简单的信号通路模 ...

PCR 是一个坑，坑里埋了好多研究僧……PCR 是众位「研究僧」日常实验中最常用的技术，可谓是「研究盛宴」中的一道「小菜」。可也有不少童鞋反映，这道菜不好吃，一不小心就「小河里翻船」。那么，我们该如何把这道菜「吃好」、跳出这个「坑」呢？诸位看官莫急，待我送君「三大法宝」。一、确保 RNA 样本合格常见的 RNA 提取方法有 TRIzol 法、吸附法，这两个方法各有所长，但都不能保证提取的 RNA 样本一定合格。因而，提取完成后应测定 RNA 的浓度及吸光度。通常，在 260，280， ...

① Science：重大突破！根治疟疾有戏！选择性抑制 PfCLK3 蛋白可杀死处于各个发育阶段的疟原虫疟疾是一种由蚊子传播的传染病，目前影响着 2 亿多人，每年造成近 50 万人死亡，其中大多数是儿童。在一项新的研究中，来自苏格兰格拉斯哥大学等研究机构的研究人员取得突破性进展，他们揭示出一种称为 TCMDC- 135051 的新药可能阻止疟疾传播，并且也可能治疗感染着这种致命性寄生虫病的人。这些研究结果为全球抗击疟疾的斗争提供了新的希望。这种新药 ...

基因集富集分析（Gene Set Enrichment Analysis, GSEA），根据名称我们就可以知道这是一种对基因进行富集的工具和方法。其基本思想是使用预设定的基因集（通常是基因组注释信息或者来自前人、牛人的实验结果），即将基因富集，把功能相似或者相同的基因进行组合，并最终以基因集的形式进行封装；然后将 case 和 control 组中差异表达的基因进行排序，之后检验两组中差异表达的基因是否在预先设定的基因集合的顶端或者尾端富集。 ...

说起基因组序列数据库，大多数人耳熟能详的是三巨头GenBankEBIDDBJ这些数据库在设计之初虽然考虑了基因组存储的需求，但在基因组分析和数据挖掘上的功能设计则比较欠缺。而 IMG/M 作为新一代基因组数据库的代表，不仅能够完整收录现有数据库的内容，还提供了更完善的数据上传、注释和分析服务，将测序数据储存到 IMG/M 数据库（即将 IMG/M 数据库的登录号填写到文章中）也是被许多顶尖期刊如 Nature Communication 所接受 ...

确定一种蛋白质的结构和功能是现代生物学许多研究的基础。在过去的几十年里，人们开发了许多用于结构预测的计算工具，其中 Phyre2 因其强大的分析能力与简单的操作被生物科研人员广泛使用，据统计每天都有约 1000 个任务提交到 Phyre2 服务器上。Phyre2 分析能力强大，结果界面丰富直观，可以预测和分析蛋白质的结构、功能和突变。相比之前的版本 Phyre v 1.0，Phyre2 使用更先进的远程同源检测方法来构建蛋白质三维模型，预测配体结合位点 ...

① Nature 子刊：内质网定位的 Hrd1 协同细胞膜 TLR4 受体促进炎症反应机制位于细胞表面的 Toll 样受体 4（TLR4）对于细菌引起的 NF-κB 活化和炎症因子分泌非常关键，但是至今很少有报道提出特定细胞器定位的关键分子能参与 TLR4 通路和巨噬细胞的抗细菌感染功能。9 月 2 日，国际学术期刊 Nature Microbiology 在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心（生物化学与细胞生物学研究所）王红艳研究组的最新工作，内质网定位的 E3 泛素连接酶 Hrd1 通 ...

茫茫的实验过程中，你是否遇到过如下的困境：做完 PCR，跑胶发现有多条很诡异的条带……更为可怕的是，做完二代测序发现了一个崭新的突变点，一代测序验证也能开心的验证出来，但发文章时，别人告诉我们，这其实是相似序列引发的假阳性……也就是说，相似序列之间的差异碱基，刚好就是那个所谓的突变点！一代测序也枉然！以上的问题，可能多半都是因为引物不特异。也就是说，同一对引物，能匹配基因组上好几个位置。所以，设计完引物，做一个在线的 PCR，以 ...

① Nature Communications：研究揭示细菌发动蛋白 IniA 调控结核耐药的新机制8 月 29 日，中国科学院院士饶子和率领的上海科技大学科研团队与中国科学院生物物理研究所研究员胡俊杰课题组合作，率先解析了一线抗结核药物——异烟肼诱导蛋白 IniA 的晶体结构，发现其具有典型的细菌发动蛋白（dynamin）构象，并发挥膜分裂的功能，由此揭示了 IniA 蛋白参与药物耐受的新机制。细菌发动蛋白的解析虽然有较多进展，但其生理功能也一直困扰 ...

现在 lncRNA 研究已成热点，每天都有很多的lncRNA被发现。今天我们介绍一款在线数据库：网站链接：http://annolnc.cbi.pku.edu.cn/这个数据库界面特别简洁，小编第一看到他就如获至宝：简单明了不矫情。尤其适合英语 low low 的小编。只要找到你研究的那条 lncRNA 序列就好啦。下面看看它的功能随便找一个 lncRNA：NR_002578.2就他了！查询 lncRNA 序列：复制-粘贴到 Annolnc 主页面的文本框里：GO！不错 ...

是不是做 Western 的时候，会遇到这样的情况呢？没错，就是背景很脏。造成背景脏的原因有很多，比如一抗没洗干净，或者二抗没洗干净，还有就是封闭的时候不完全。但其实，封闭液也是你们很容易忽略的一个环境哈。封闭液有几种？除了脱脂奶粉和 BSA 还有啥你们能想到的？第一种封闭液就是脱脂奶粉，这是异常便宜的封闭液品种，当然也应该是你们最常用的封闭液配方了。（甚至我们用过特仑苏）但是，你们应该注意到的是，脱脂奶粉中有大量的生物素，也就是说 ...

引物设计是 qPCR 非常重要的环节。今天小编给大家推荐 2 款简单实用的在线 qPCR 引物设计网站，让你分分钟搞定 qPCR 引物！Primer3 Plus推荐指数：五颗星理由：严格的 qPCR 引物设计一般要求其中一条引物要跨外显子，最好在 3' 端设计引物，产物的长度在 300bp 以内等。本在线软件可满足 qPCR 引物设计的要求。网址链接：http://www.primer3plus.com/1、选择 Run latest Versionof Primer3Plus，就进入了设计引物的 ...

SCI期刊那么多，一旦选错，费时费力不说，千辛万苦找到一个期刊投稿后，收到“论文内容与期刊不一致”的拒稿通知，对作者来说也是个不小的打击。更有一些水刊...那么我们该如何又快又精确地找到与论文内容最匹配的期刊呢？今天就给大家推荐一个SCI论文精准高效投稿利器：JournalGuide，只需1s，搜索相似论文，查看最匹配SCI期刊，实现精准投稿！网址：https://www.journalguide.com/优势：1、覆盖面广 ...

撰写学术论文已成为当今高材生们的必修课，除了大名鼎鼎的中国知网之外，你还知道哪些好用的论文网站呢？这次小编给大家推荐几个超 nice 的论文网站，方便大家在撰写论文时能更快地获得相关资料，用于借鉴参考。1. 师大云端下载站， 中文论文、专利检索下载链接：lunwenyizhan.com【师大云端】提供一站式论文、专利下载服务，面向全社会开放，国内网络都支持，校内校外都能高速下载。提供包括中国知网在内的八大文献数据库资源下载服务，数 ...

① 组蛋白修饰「阅读器」ZCWPW1 在雄性减数分裂中有决定性作用不孕不育在我国育龄夫妇中的发生率已达 15%，配子（精子或卵细胞）不能产生或其质量低下是引起不孕不育的重要原因，而精子和卵细胞必须经过减数分裂才能产生，一直以来，减数分裂的分子机制及存在的雌雄差异是研究的热点。来自香港大学深圳医院生殖医学研究中心，山东省立医院等处的研究人员发现组蛋白 H3K4me3 修饰「阅读器」ZCWPW1 对雌雄两性减数分裂具有不同效应，Zcwpw1 ...

① 北京基因组所 Autophagy 揭示去泛素化酶 USP33 调控线粒体自噬新机制PINK1 -Parkin 介导的线粒体自噬在线粒体质量控制过程中发挥着关键作用，其调控异常与人类神经退行性疾病发生相关。已有研究表明 Parkin 蛋白泛素化和去泛素化修饰参与线粒体自噬调控过程，但 Parkin 蛋白的去泛素化酶及其调控线粒体自噬的分子机制尚不清楚。中国科学院北京基因组研究所赵永良研究组首次证明去泛素化酶 USP33 定位于线粒体外膜，利用质谱分析 ...

① 华中科技大学最新研究：免疫机制参与心肌梗死后缺血性心力衰竭华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管内科程翔教授研究团队发现了缺血性心力衰竭患者心脏局部 T 淋巴细胞免疫组库特征及免疫功能表型，在缺血性心力衰竭的免疫发病机制领域取得重要进展。这一研究团队发现在梗死后心力衰竭患者的心脏局部存在显著的 T 细胞应答；心脏局部的 T 细胞具有克隆扩增和组织特异性的表型，分泌促纤维化及促凋亡因子参与不良心室重构，且能再次进入外周循环；C ...