研究应用｜使用共聚焦显微镜观察胫骨骨端中的精细神经血管结构

1. 在降低漂白的同时对精细和复杂组织结构进行成像

由于神经和血管在狭窄区域内形成了复杂结构，所以很难对膝关节骨骺中的血管和感觉神经进行成像。FLUOVIEW FV3000 共聚焦显微镜利用其高检测灵敏在低激光下对精细结构进行明亮的高分辨率成像，从而有助于降低对样品的光漂白。利用 FV3000 显微镜这一特点，我们成功对穿透胫骨骨骺椎孔的复杂 3D 结构的感觉神经及其周围血管进行成像。

图 1. 感觉神经和周围脉管系统穿透胫骨骨骺椎孔（3D 图像）。

感觉神经（EYFP，青色）；血管（Alexa Fluor 594，洋红色）；细胞核（DAPI，橙色）。

成像设备：

显微镜：FLUOVIEW FV3000 共聚焦显微镜系统（奥伟登（Evident）现已推出全新 FV4000 共聚焦显微镜）

物镜：100 倍油浸物镜（UPLSAPO100XO）

2. 观察胫骨骨骺的神经血管结构

了解膝关节的血管和神经投射对于缓解膝关节病疼痛非常重要。然而，研究人员至今仍然无法全面观察感觉神经和血管贯穿整个膝关节的精细结构。利用 FV3000 共聚焦显微镜，我们首次清晰地观察到这些结构。我们发现，膝关节感觉神经不仅存在于半月板，也存在于胫骨骨骺内。这些感觉神经与周围血管缠绕在一起，共同组成神经血管结构穿过胫骨骨骺的锥孔。

图 2. 神经和血管孔

3. FV3000 共聚焦显微镜如何助力实验

• 高灵敏度 TruSpectral 检测器可实现低光毒性成像

与传统反射型光栅相比，TruSpectral 全真光谱检测技术所采用的透射型光栅能够以高于 40% 的效率采集荧光信号。因为透射型光栅的光效率更高，仅需较低的激光功率即可采集图像，从而降低了光毒性。

• 低激发光下的高信噪比（S / N）

FV3000 的高灵敏检测单元最多可配四个 GaAsP 高灵敏检测器，以高达 45% 的量子效率捕获微弱的荧光信号。在极低的激发光条件下，Peltier 固体制冷技术可将高信噪比图像的背景噪声降低至 20%。

• 全新激光扫描共聚焦系统 FV4000

奥伟登（Evident）深耕技术研发，不断突破边界，为生命科学领域提供强大支持。目前已推出「全新激光扫描共聚焦系统 FV4000」，采用更先进的成像技术，可实现更高精度的图像，从而使研究人员能够从样品中获得更可靠的数据；以突破性的 SilVIR 探测器作为系统的核心，可以实现更少的噪点、更高的灵敏度和更强的光子分辨能力。使用 FV4000 共聚焦显微镜，研究人员可以在更短的时间内、更轻松地获取更高质量的定量图像数据。

图 3. 奥伟登（Evident）FV4000 激光共聚焦显微镜