PCR-SSO结果显示与结果分析
互联网
2111
PCR-SSO 结果显示与结果分析
【仪器和试剂 】
（1） 感光胶片
（2） 带有增感屏的暗合
（3） X光片冲洗试剂和设备
【操作步骤 】
（1） 洗膜完毕后，用塑料薄膜将其包好，与感光胶片一起装入带有增感屏的暗合中，在低温冰箱中进行放射自显影。曝光时间需要摸索，通常为数十分钟至数天，视探针的放射性比活和洗膜程度而定。
（2） 曝光完毕后，在暗室中将感光胶片取出，常规方法进行显影和定影，观察结果。
【注意事项】
放射自显影完毕后，尼龙膜上的探针可以用0.1N NaOH溶液洗脱，以便用其他探针杂交，但要求在杂交之后的整个实验过程中，尼龙膜要保持湿润，不能干燥。
结果分析
（1） 在每张尼龙膜上应有相应SSO探针的阳性和阴性DNA作为对照，其杂交信号应该具有明显的差异。
（2） 分析杂交结果时，通过杂交的信号强度（注意与对照DNA的信号比较），一般可以判断阳性杂交的样本。如果样本DNA能够与某种SSO探针杂交，说明样本具有该SSO杂交的DNA序列，即某种（或某几种）HLA型别。注意某一种SSO探针可能与不同型别的DNA样本杂交。
（3） 每一种HLA型别的样本与特定探针组合的杂交格局取决于所用探针的组合，当根据不同实验目的选用不同的SSO探针组合时，分析结果应视具体情况而定。
