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        Senescent-associated b-Gal Assay

        互联网

        1492

         

        Senescent-associated b -Gal Assay

        1. Wash cells with PBS
        2. Fix cells in 0.2% glutaraldehyde for 5’
      • dilute this in PBS
        1. Wash cell with PBS
        2. Stain with X-gal solution (ingredients listed below) for 6 to 24 hours at 37°C

        Chemical Conc.

        Stocks Amount needed for 10 plates (40 ml)
        1 mg/ml X-gal 40 mg/ml  1 ml
        150 mM NaCl 5 M 1.2 ml
        2 mM MgCl2 1M 80 μl
        5 mM K3 Fe(CN)6 100 mM  2 ml
        5 mM K4 Fe(CN)6 100 mM 2 ml
        40 mM NaPi, pH 6.0  0.1M 16 ml

        17.72 ml dd H2 O

        NaPi - 0.1M at pH 6.0

        • 2.5 ml Na2 HPO4
        • 17.6 ml NaH2 PO4
        • dd H2 O to 200 ml

         

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