【求助】请教是否可以在一种细胞先后进行基因转染和敲除
丁香园论坛
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请教各位分子生物学的高手。现在在一个细胞里有蛋白A，没有蛋白B。
问题是：我想要蛋白B，而不想要蛋白A。
是否可以通过基因转染导入B。那么导入B后，可否在这个细胞内再使用分子生物学技术去除A？如果可以，使用什么技术？
问题是：我想要蛋白B，而不想要蛋白A。
是否可以通过基因转染导入B。那么导入B后，可否在这个细胞内再使用分子生物学技术去除A？如果可以，使用什么技术？
The esaiest way is using RNAi against A.
Though you can also generate A knock-out, it is quite slow and difficult.
I will suggest you co-transfect expression construct and RNAi construct together.
Though you can also generate A knock-out, it is quite slow and difficult.
I will suggest you co-transfect expression construct and RNAi construct together.
根据楼主的意图，A和B性质相近或者能相互作用。
如然：
最具有说服力的法子是选择不表达A的细胞株；
其次是建立A缺陷的细胞株；
再次的方法是将A的抑制剂与转染试剂共同作用于细胞，封闭A的作用。
2楼的方法不是很具有说服力。因为RNAi能否完全阻断A的表达？难说。
如然：
最具有说服力的法子是选择不表达A的细胞株；
其次是建立A缺陷的细胞株；
再次的方法是将A的抑制剂与转染试剂共同作用于细胞，封闭A的作用。
2楼的方法不是很具有说服力。因为RNAi能否完全阻断A的表达？难说。
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