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        核糖核酸酶保护测定

        互联网

        3302
        1. 加入适当体积的RNA(<12 μl)+探头(<3 μl)。

        尝试5和10μg 的RNA加600或800页高辛标记的探针。

        2. 包括2-3的酵母RNA样品/探针使用。

        3. 加入20 μl SOLN。 A到所有涡管(FV =30 μl)和自旋向下。

        4. 孵育90-95℃,5分钟使之变性。冰降速。

        5. 在42-45'C在干燥的孵化器或水浴孵育O / N。

        6. 核糖核酸酶消化:稀SOLN。 R在SOLN。 Bx的1:100。每个样品中添加200 μl 。1:300稀释增加66.7 μl 以上的SOLN133.4 μl。 BX。Bx的单独以酵母RNA样品。

        7. 涡的所有样本,然后降速。

        8. 孵育在37℃长达30分钟。涡然后停止运转。

        9. 添加300 μlSOLN。 DX。涡然后停止运转。

        10. 储存于-20'C15分钟。

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