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        胰岛素耐受实验

        相关实验:胰岛素功能相关检测实验

        别名:ITT

        最新修订时间:

        材料与仪器

        器材:血糖仪、血糖试纸

        试剂:

        ① 人胰岛素

        ② 生理盐水

        步骤

        胰岛素耐受实验的基本过程可分为如下几步:


        A. 小鼠准备每组实验(如不同基因型或给药组)小鼠数量不得少于 6 只,对照组必须是同年龄、同性别的小鼠。于上午 9 点将小鼠换入干净的笼子禁食 6 小时,至下午 3 点。禁食期间,小鼠保持正常的饮水。


        B. 下午 3 点,开始胰岛素耐受实验。称取每只小鼠的体重,并用标记笔在小鼠尾巴的根部标记序号,以便在实验过程中能快速辨认所测小鼠。


        C. 将小鼠从笼子中取出,轻放于铁网格之上,用剪刀剪去小鼠尾巴末端约 0.5~1 mm,轻轻挤压小鼠尾巴,让血液富集成一滴,用血糖仪测定血糖,测定值认定为 0 分钟的血糖值。操作尽量轻柔,使小鼠不至于过度惊吓。


        D. 小鼠适应 10 分钟之后,开始准备腹腔注射胰岛素溶液。


        E. 将小鼠轻轻抓起,按照标准的腹腔注射操作用 1 ml 注射器给小鼠注射胰岛素溶液。注射的体积根据小鼠的体重决定,每克体重注射 0.01 ml。从注射完毕一刻起开始计时。一般情况下,每只小鼠的操作间隔在 1 分钟,这样可以准确地按照所规定时间完成对每只小鼠的血糖测定。


        F. 在 15 分钟,30 分钟,45 分钟,60 分钟,90 分钟按照步骤 3 的操作测定每只小鼠各时间点的血糖值。


        G. 实验完毕后,将每笼小鼠补充上饲料。用 Excel 软件分析实验结果。结果示例见图 8-9-6。

        胰岛素耐受实验

        注意事项

        在胰岛素耐受实验中,胰岛素的用量要根据小鼠的年龄和性别来决定,一般来讲理想的胰岛素用量应该使葡萄糖水平在注射 30 分钟后下降到注射前的 40% 左右。小鼠胰岛素耐受实验的胰岛素使用量一般为 0.5~1.2 U/kg,根据具体的实验要求将胰岛素稀释到合适浓度。如胰岛素使用量是 0.5 U/kg,则用生理盐水配制 0.05 U/ml 的胰岛素溶液。

        来源:丁香实验

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