• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        请求大家帮助!RT-PCR引物设计

        丁香园论坛

        1624
        各位好!我是分子生物学实验的新手。我的课题的第一步是要用RT-PCR获得全长的cDNA(接到pMD-18上),我用如下引物的话是不是无法得到所要的目的序列?因为primer5.0的评分很差的。各位好朋友能否帮帮我?
        Genebank Accession Number :AF144325
        gene:1...1758
        cds: 100....1731


        1 aggagaaaag ggcgctgggg ctcggcggga ggaagtgcta gagctctcga ctctccgctg
        61 cgcggcagct ggcgggggga gcagccaggt gagcccaaga tgctgctgcg ctcgaagcct
        121 gcgctgccgc cgccgctgat gctgctgctc ctggggccgc tgggtcccct ctcccctggc
        181 gccctgcccc gacctgcgca agcacaggac gtcgtggacc tggacttctt cacccaggag
        241 ccgctgcacc tggtgagccc ctcgttcctg tccgtcacca ttgacgccaa cctggccacg
        301 gacccgcggt tcctcatcct cctgggttct ccaaagcttc gtaccttggc cagaggcttg
        361 tctcctgcgt acctgaggtt tggtggcacc aagacagact tcctaatttt cgatcccaag
        421 aaggaatcaa cctttgaaga gagaagttac tggcaatctc aagtcaacca ggatatttgc
        481 aaatatggat ccatccctcc tgatgtggag gagaagttac ggttggaatg gccctaccag
        541 gagcaattgc tactccgaga acactaccag aaaaagttca agaacagcac ctactcaaga
        601 agctctgtag atgtgctata cacttttgca aactgctcag gactggactt gatctttggc
        661 ctaaatgcgt tattaagaac agcagatttg cagtggaaca gttctaatgc tcagttgctc
        721 ctggactact gctcttccaa ggggtataac atttcttggg aactaggcaa tgaacctaac
        781 agtttcctta agaaggctga tattttcatc aatgggtcgc agttaggaga agattttatt
        841 caattgcata aacttctaag aaagtccacc ttcaaaaatg caaaactcta tggtcctgat
        901 gttggtcagc ctcgaagaaa gacggctaag atgctgaaga gcttcctgaa ggctggtgga
        961 gaagtgattg attcagttac atggcatcac tactatttga atggacggac tgctaccagg
        1021 gaagattttc taaaccctga tgtattggac atttttattt catctgtgca aaaagttttc
        1081 caggtggttg agagcaccag gcctggcaag aaggtctggt taggagaaac aagctctgca
        1141 tatggaggcg gagcgccctt gctatccgac acctttgcag ctggctttat gtggctggat
        1201 aaattgggcc tgtcagcccg aatgggaata gaagtggtga tgaggcaagt attctttgga
        1261 gcaggaaact accatttagt ggatgaaaac ttcgatcctt tacctgatta ttggctatct
        1321 cttctgttca agaaattggt gggcaccaag gtgttaatgg caagcgtgca aggttcaaag
        1381 agaaggaagc ttcgagtata ccttcattgc acaaacactg acaatccaag gtataaagaa
        1441 ggagatttaa ctctgtatgc cataaacctc cataacgtca ccaagtactt gcggttaccc
        1501 tatccttttt ctaacaagca agtggataaa taccttctaa gacctttggg acctcatgga
        1561 ttactttcca aatctgtcca actcaatggt ctaactctaa agatggtgga tgatcaaacc
        1621 ttgccacctt taatggaaaa acctctccgg ccaggaagtt cactgggctt gccagctttc
        1681 tcatatagtt tttttgtgat aagaaatgcc aaagttgctg cttgcatctg aaaataaaat
        1741 atactagtcc tgacactg
        上游:5-GC GAA TTC ATG CTG CTG CGC TCG AAG CCT-3(加入EcoRⅠ切点含起始密码)
        下游:5-GG AAG CTT TCA GAT GCA AGC AGC AAG TTT-3(加入HindⅢ切点含终止密码)
        还有一个问题:如果在引物合理的前提下,用invitrogen的SuperscriptTM一步法反转录PCR系统
        容易得到1650bp左右的片段吗?
        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序