内切酶在反应中的存活性
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长时间反应时内切酶的活性保持情况因酶而异。本表中列出了在16小时内完全酶解底物DNA所需的最小酶量。
实验方法：在50µl的反应体系中，分别加入1µg的单位定义底物DNA和1.00、0.50、0.25和0.13个单位的内切酶，37°C（或要求的最适温度）反应16小时。用琼脂糖凝胶电泳法来确定在16小时内酶解1µg底物DNA所需的最小酶量。
16小时酶解1µg底物需要酶量小于1单位的酶可以用加入较少的酶量和延长反应时间的方法节省酶的用量。实际16小时酶解1µg底物的内切酶最小用量视底物的不同而有所变化。
| 酶 | 16小时反应所需的最小酶量 |
|---|---|
| Aat II | 0.13 |
| Acc I | 0.13 |
| Acc65 I | 0.50 |
| Aci I | 1.00 |
| Acl I | 0.50 |
| Acu I | 1.00 |
| Afe I | 0.25 |
| Afl II | 0.13 |
| Afl III | 0.13 |
| Age I | 1.00 |
| Ahd I | 0.13 |
| Ale I | 0.25 |
| Alu I | 0.25 |
| Alw I | 0.50 |
| AlwN I | 0.13 |
| Apa I @25°C | 0.13 |
| ApaL I | 1.00 |
| ApeK I @75°C | 0.13 |
| Apo I @50°C | 0.13 |
| Asc I | 0.13 |
| Ase I | 0.13 |
| AsiS I | 0.13 |
| Ava I | 0.25 |
| Ava II | 0.25 |
| Avr II | 0.13 |
| Bae I@25°C | 0.50 |
| BamH I | <center> <font><font>0.50</font> </font></center> |
| Ban I | 0.13 |
| Ban II | 0.50 |
| Bbs I | 0.25 |
| Bbv I | 1.00 |
| BbvC I | 0.13 |
| Bcc I | 0.50 |
| BceA I | 0.13 |
| Bcg I | 0.50 |
| BciV I | 1.00 |
| Bcl I @50°C | 0.50 |
| Bfa I | 0.50 |
| BfrB I | 0.50 |
| BfuA I @50°C | 0.25 |
| BfuC I | 1.00 |
| Bgl I | 0.13 |
| Bgl II | 0.25 |
| Blp I | 0.50 |
| Bme1580 I | 0.50 |
| BmgB I | 1.00 |
| Bmr I | 1.00 |
| Bmt I | n/a |
| Bpm I | 1.00 |
| Bpu10 I | 0.50 |
| BpuE I | 1.00 |
| Bsa I @50°C | 1.00 |
| BsaA I | 1.00 |
| BsaB I @60°C | 0.13 |
| BsaH I | 0.13 |
| BsaJ I @60°C | 0.13 |
| BsaW I @60°C | 0.13 |
| BsaX I | <center> <font>0.25</font></center> |
| BseR I | 1.00 |
| BseY I | 0.25 |
| Bsg I | 0.50 |
| BsiE I @60°C | 0.25 |
| BsiHKA I @65°C | 1.00 |
| BsiW I @55°C | 0.50 |
| Bsl I @55°C | 0.13 |
| Bsm I @65°C | 0.50 |
| BsmA I @55°C | 0.25 |
| BsmB I @55°C | 0.50 |
| BsmF I @65°C | 0.13 |
| BsoB I | 0.13 |
| Bsp1286 I | 0.50 |
| BspCN I @25°C | 1.00 |
| BspD I | 0.25 |
| BspE I | 0.13 |
| BspH I | 0.13 |
| BspM I | 0.25 |
| Bsr I @65°C | 0.25 |
| BsrB I | 0.13 |
| BsrD I @65°C | 0.50 |
| BsrF I | 0.13 |
| BsrG I | 0.13 |
| BssH II @50°C | 0.50 |
| BssK I @60°C | 0.25 |
| BssS I | 0.25 |
| BstAP I @60°C | 0.50 |
| BstB I @65°C | 0.13 |
| BstE II @60°C | 1.00 |
| BstF5 I @65°C | 0.25 |
| BstN I @60°C | 1.00 |
| BstU I @60°C | 0.13 |
| BstX I @55°C | 0.25 |
| BstY I @60°C | 0.13 |
| BstZ17 I | 1.00 |
| Bsu36 I | 0.13 |
| Btg I | <center> <font>0.50</font></center> |
| BtgZ I | <center> <font>1.00</font></center> |
| Bts I | <center> <font>0.50</font></center> |
| Cac8 I | 0.25 |
| Cla I | 0.50 |
| CviA II | 1.00 |
| Dde I | 0.13 |
| Dpn I | 0.13 |
| Dpn II | 0.13 |
| Dra I | 0.25 |
| Dra III | 0.25 |
| Drd I | 0.13 |
| Eae I | 0.13 |
| Eag I | 0.50 |
| Ear I | 0.13 |
| Eci I | <center> <font>1.00</font></center> |
| EcoN I | 0.13 |
| EcoO109 I | 0.13 |
| EcoR I | 0.13 |
| EcoR V | 0.50 |
| Fat I | n/a |
| Fau I @55°C | 0.50 |
| Fnu4H I | 0.25 |
| Fok I | 1.00 |
| Fse I | 1.00 |
| Fsp I | 0.13 |
| Hae II | 1.00 |
| Hae III | 0.13 |
| Hga I | 1.00 |
| Hha I | 0.25 |
| Hinc II | 0.13 |
| Hind III | 0.13 |
| Hinf I | 0.13 |
| HinP1 I | 0.13 |
| Hpa I | 0.25 |
| Hpa II | 0.25 |
| Hph I | 0.25 |
| Hpy99 I | <center> <font>1.00</font></center> |
| Hpy188 I | <center> <font>1.00</font></center> |
| Hpy188 III | <center> 0.13</center> |
| HpyCH4 III | <center> <font>0.13</font></center> |
| HpyCH4 IV | <center> <font>0.25</font></center> |
| HpyCH4 V | <center> <font>0.25</font></center> |
| I-Ceu I |
0.25
|
| I-Sce I |
0.25
|
| Kas I | 1.00 |
| Kpn I | 0.25 |
| Mbo I | 0.50 |
| Mbo II | 1.00 |
| McrBC | 1.00 |
| Mfe I | 0.25 |
| Mlu I | 0.13 |
| Mly I | <center> <font><font>1.00</font> </font></center> |
| Mme I | 1.00 |
| Mnl I | 0.25 |
| Msc I | 0.50 |
| Mse I | 0.13 |
| Msl I | 1.00 |
| Msp I | 0.50 |
| MspA1 I | 0.25 |
| Mwo I @60°C | 0.13 |
| Nae I | 0.50 |
| N.Awl I | 0.13 |
| Nar I | 1.00 |
| N.BbvC IA | 0.13 |
| N.BbvC IB | 0.13 |
| Nci I | 0.50 |
| Nco I | 0.25 |
| Nde I | 0.13 |
| NgoM IV | 0.13 |
| Nhe I | 0.25 |
| Nla III | 0.50 |
| Nla IV | 0.50 |
| Not I | 0.25 |
| Nru I | 0.13 |
| Nsi I | 0.50 |
| Nsp I | 0.25 |
| Pac I | 0.13 |
| PaeR7 I | 0.13 |
| Pci I | <center> <font><font>0.25</font> </font></center> |
| PflF I | 0.13 |
| PflM I | 1.00 |
| Pho I | 0.13 |
| PI-Pso I @65°C | 0.13 |
| PI-Sce I | 0.13 |
| Ple I | 1.00 |
| Pme I | 1.00 |
| Pml I | 0.50 |
| PpuM I | 0.13 |
| PshA I | 1.00 |
| Psi I | <center> <font><font>0.25</font> </font></center> |
| PspG I @75°C | <center> <font><font>0.25</font> </font></center> |
| PspOM I | 0.13 |
| Pst I | 0.50 |
| Pvu I | 1.00 |
| Pvu II | 0.13 |
| Rsa I | 0.13 |
| Rsr II | 0.25 |
| Sac I | 0.13 |
| Sac II | 0.13 |
| Sal I | 0.13 |
| Sap I | 1.00 |
| Sau3A I | 0.50 |
| Sau96 I | 0.25 |
| Sbf I | 0.50 |
| Sca I | 0.25 |
| ScrF I | 0.25 |
| SexA I | 0.25 |
| SfaN I | 0.50 |
| Sfc I | 1.00 |
| Sfi I @50°C | 0.25 |
| Sfo I | 0.50 |
| SgrA I | 1.00 |
| Sma I @25°C | 0.13 |
| Sml I @55°C | 0.25 |
| SnaB I | 0.50 |
| Spe I | 0.50 |
| Sph I | 0.13 |
| Ssp I | 0.25 |
| Stu I | 0.25 |
| Sty I | 0.25 |
| StyD4 I | 0.13 |
| Swa I @25°C | 0.25 |
| Taq I @65°C | 0.50 |
| Tfi I @65°C | 0.25 |
| Tli I @75°C | <center> <font><font>0.25</font> </font></center> |
| Tse I @65°C | 0.25 |
| Tsp45 I @65°C | 0.50 |
| Tsp509 I @65°C | 0.13 |
| TspR I @65°C | 0.13 |
| Tth111 I @65°C | 0.25 |
| Xba I | 0.13 |
| Xcm I | 0.13 |
| Xho I | 0.13 |
| Xma I | 0.50 |
| Xmn I | 0.25 |
| Zra I | n/a |
