• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        免疫荧光染色(间接法)

        互联网

        11427

        1、切片固定后用毛细滴管吸取经适当稀释的免疫血清滴加在其上,置于染色盒中保持一定的湿度,37℃作用30min。然后用0.01mol/l pH7.2PBS洗两次,10min,用吸水吸去或吹干余留的液体。

        2、再滴加间接荧光抗体(如兔抗人 -球蛋白荧光抗体等),同上步骤,染色30min,37℃,缓冲盐水洗两次10min,搅拌,缓冲甘油封固,镜检。

        对照染色:

        ①抗体对照:用正常兔血清或人血清代替免疫血清,再用上法进行染色,结果应为阴性。

        ②抗原对照:即类属抗原染色,亦应为阴性。

        ③阳性对照。

        间接法中上述方法称双层法(Double Layer Method)。另一种称夹心法,即用未标记的特异性抗原加在切片上先与组织中之相应抗体结合,再用该抗原之荧光抗体重叠结合其上,而间接地显示出组织和细胞中抗体的存在,方法步骤如下:

        ①切片或涂片固定后,置于染色湿盒内。

        ②滴加未标记的特异性抗原作用切片于37℃,30min。

        ③缓冲盐水洗2次,每次5min,吹干。

        ④滴加特异性荧光抗体再用切片于37℃,30min。

        ⑤如③水洗。

        ⑥缓冲甘油封固,镜检。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序