免疫荧光染色如何分析？

相关实验：免疫荧光技术

最新修订时间：2023-03-23

合作专家 | 陈慕华博士

肿瘤学北京大学

审核专家 | 聂壹峰博士

纳米生物医学中国科学院大学

材料与仪器

Image J 软件

步骤

免疫荧光主要判断目的蛋白的定位，实验过程中会染表征细胞核的 DAPI。拿到免疫荧光结果，使用 PS 等软件进行 merge，如果染色结果只在 DAPI（蓝色）周围有一圈，即细胞膜定位；如果染色结果显示 DAPI 周围到处都有，即胞浆定位；如果染色结果和 DAPI 完全 merge，即细胞核定位。

定量化细胞骨架：点击 Image → Type → 8-bit 可以二值化图像转换成黑白，分析骨架 Analyze → Skeleton → Analyze Skeleton (2D/3D)；

面积测定：图像转为 8-bit 后，调整阈值，框选细胞及核，Analyze → Set Measurements，可以 Measure 细胞整体面积或单个面积。

来源：丁香实验

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