• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        过氧化物酶TMB法

        互联网

        17555

        过氧化物酶 TMB 法
        TMB法:原理同DAB法,但反应产物呈深蓝色沉淀。
        1)孵育液配制

        A液:亚硝基铁氰化钠(硝普钠) 100mg

        H2 0 92.5ml

        0.2mol/L醋酸缓冲液(pH 3.3) 5ml

        B液:TMB 5mg

        无水乙醇 2~4ml
        临用前将A液和B液混合即为预孵育液。在每100ml预孵育液中加0.3%H2 02 1~ 5ml即为孵育液。
        2)染色程序:

        ①组织固定于0.1mol/LPBS配制的3%戊二醛固定液中37℃ 30分钟;

        ②浸洗:用0.1mol/LPBS浸洗3次以上,每次15分钟或浸洗过夜,以除去内源性细胞色素C,抑制细胞色素氧化酶的夹杂反应;

        ③冰冻切片:厚5~15um;

        ④预孵育:切片人预孵育液中室温避光孵育20分钟,不断晃动切片;

        ⑤孵育:切片人孵育液中室温避光孵育10~20分钟,不断晃动切片;

        ⑥浸洗:将切片转移到0.2mol/L醋酸缓冲液(pH 3.3)中,0~4℃浸洗6次,每次30分钟;

        ⑦封片:甘油明胶封片。
        3)结果:酶活性部位呈深蓝色沉淀。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序