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        Rapid Isolation of Genomic DNA from Human Oral Mucosa

        互联网

        758

         

        1. Take an oral smear
        2. Dissolve in 50 ml H2 O through vigorous shaking
        3. Pellet cells 5 min at 4000 rpm
        4. Re-suspended the pellet in 400 μl Lysis buffer (50 mM TRIS-Cl pH 8, 10 mM EDTA, 2% SDS)
        5. Incubate for 5 min at 65¡ãC
        6. Add 250 μl 4.5 M NaCl and mix
        7. Pellet cellular debris (13000 rpm for 4 min). Genomic DNA stays in the supernatant
        8. Precipitate DNA by adding 650 μl of isopropanol to the supernatant and centrifuge 5 min at 13000 rpm
        9. Re-suspend the DNA in an appropriate buffer (e.g. TrisCl, pH=8.0)

         

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