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        IL-2质粒DNA探针制备的试剂与仪器

        互联网

        1280
        IL-2 质粒DNA探针制备的试剂与仪器
         
        (1)含IL-2 DNA探针的质粒以及宿主菌
        (2)STE 溶液:0.1mol/L NaC1
        (3)Tris HC1(PH8.0):10mmo1/L、1mmo1/L
        (4)溶液I  
             50mmo1/L  葡萄糖
             25mmo1/L Tris HCL(PH 8.0)
             10mmo1/L EDTA(PH 8.0)
            可配100ml,高压灭菌15min,贮存于4℃
        (5)溶液II
             0.2mo1/L NaOH(临用前用10mo1/L贮存液稀释)
             1%SDS(配20%贮存液)
        盖紧瓶盖,颠倒离心瓶数次,以充分混匀内容物,于室温放置5-10min.
        (6)溶液III
             5mol/L乙酸钾  60ml
             冰乙酸        11.5ml
             水            28.5ml
        所配成的溶液对钾是3mol/L,对乙酸根是5mo1/L。
        (7)含相应抗生素的LB增养基
        (8)氯霉素(0.25g/2ml)→终浓度170μg/ml
        (9)溶菌酶(10mg/ml,溶于10mm01/L Tris HCL PH8.0)1 ml
        (10)无水乙醇(部分-20℃预冷),异丙醇,75%乙醇(部分4℃预冷)
        (11)TE缓冲液(PH8.0)
        (12)5 mol/L LiC1 1.5ml   
        (13)RNA酶
        (14)3mol/L NaAC,
        (15)饱和酚
        (16)氯仿:异戊醇(24:1)
        (17)质粒提取试剂盒(Promega:Wizard Minipreps DNA,NO117)
        (19)恒温摇床
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