• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        DNA测序结果判读及常见问题分析

        互联网

        6792

        测序结果的判读

        测序结果为.abi格式,可用软件chrosmas打开

        一种颜色的峰代表一个碱基,峰的高低表信号的强弱。一个正常的N表示机器没法判读是哪种碱基,原因是:杂峰的信号高于机器默认的值,机器会认为该处有两个峰,因此不能判断确定是哪个峰,需要人工判读。以下三种情况会出现N:有杂合子,有杂峰,反应已结束。

        原因:测序产物纯化不够

        注意:染料峰位于序列的前 100 碱基以内;酒精峰位于序列的 220 ~ 320 碱基之间

        产生的原因是样品或毛细管内有灰尘等固体小颗粒

        原因:测序反应失败。

        解决办法:改进条件,重做反应。注意两个关键因素:引物与模板之间的比例: 3.2 pmol: 200 ng 。模板 DNA 的纯度和用量: 1.6 ~ 2.0

        原因:残余的 Dye 太多,纯化不够。有测序反应,但效率低下信号太弱

        解决办法:纯化充分。避开引物峰,确定新的分析起点

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序