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        芯片常见问题分析

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        1 芯片实验和定量PCR 的优劣比较?
          基因表达 谱芯片实验可以对大量基因一次性进行定量研究,定量PCR则对大量基因需逐一进行定量研究。
        2 在芯片制作过程中的PCR原液是否可以为客户保存?
          可以抽干冷冻保存一年。
        3 可否用DNA和芯片杂交?
          不可以,因为芯片上的样品是cDNA而真核基因DNA中普遍存在內显子,核酸杂交无法顺利进行。
        4 对于临床症状不明显的的遗传病,如何取样?
          可以从病人抽取血样或者骨髓。
        5 如何保存血样?
          将血样中血细胞分离出来,然后-80℃低温保存。
        6 脱落细胞是否都是死亡的细胞, 其中是否可以抽提mRNA?
          不完全是死亡的细胞, 但是mRNA的含量比较少, 建议最好用正常细胞抽提mRNA。
        7 完成一张芯片的实验,需要的细胞的量是多少?
          需要5×106的细胞量
        8 提供的电泳图和OD值如何评价mRNA的质量?
          电泳图可以分析mRNA和总RNA是否降解, OD值可以判断纯度。
        9 是否可以将同一症状的病例混合后抽提,看共性表达?
          可以。

        10 芯片是否可以重复使用?
          不可以。
        11 杂交后的芯片如何保存?
          避光常温保存几个星期。
        12 在实验前期,如何定参照物?
          根据实验设计来确定使用共同参照物还是各自的参照物。
        13 如何消除基因芯片 实验中的个体差异?
          可以使用同一样品重复芯片实验,取其共性,获得可靠的数据结果。
        14 芯片在杂交过程中为什么会发生非特异性杂交, 如何降低?
          这是由于DNA碱基错配造成, 提高芯片杂交后洗脱液的温度可以降低非特异性杂交。
        15 芯片上基因cDNA是从什么组织中取得的?
          芯片上基因cDNA来源于美国I.M.A.G.E.项目,是从人的各种组织中分离确定的,并且每个基因  cDNA具有明确功能定义的,与其它基因不相重复的。

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