• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        免疫酶标技术

        互联网

        1415

         

        免疫酶标技术

         

        1)  直接法

        1. 标本固定。

        2. PBS 洗涤 2 × 3 分钟。

        3. 1 H2 O2 (或 1 H2 O2 甲醇)抑制内源性过氧化物,室温 10 20 分钟。

        4. 正常血清( 1 10 )孵育,室温 20 分钟。

        5. 滴加酶标记的抗体 37 1 小时或 4 ℃过夜。

        6. PBS 洗涤 3 × 3 分钟。

        7. DAB H2 O2 显色 5 10 分钟,镜下控制染色结果。 DAB H2 O2 应用前 15 分钟配制。

        8. 充分水洗后,复染、脱水、透明、封片、镜检。

         

         

        2)  间接法

        1. 标本固定。

        2. PBS 洗涤 2 × 3 分钟。

        3. 1 H2 O2 (或 1 H2 O2 甲醇)抑制内源性过氧化物,室温 10 20 分钟。

        4. 正常血清( 1 10 )孵育,室温 20 分钟。

        5. 滴加第一抗体, 37 1 小时或 4 ℃过夜。

        6. PBS 洗涤 3 × 3 分钟。

        7. 滴加酶标二抗,室温 1 小时。

        8. PBS 洗涤 3 × 3 分钟。

        9. 0.04 DAB 0.03 H2 O2 显色 5 10 分钟。

        10.  充分水洗后,复染、脱水、透明、封片、镜检。

         

         

        3)  PAP 法(过氧化物酶抗过氧化物酶抗体复合物法)

        1. 标定固定后, PBS 洗涤。

        2. 1 H2 O2 (或 1 H2 O2 甲醇)阻断内源性过氧化物,室温 10 20 分钟。

        3. PBS 洗涤 2 × 3 分钟。

        4. 正常血清(二抗的正常血清)孵育,室温 20 分钟。

        5. 滴加一抗,室温 1 小时或 4 ℃过夜。

        6. PBS 洗涤 3 × 3 分钟。

        7. 滴加二抗,室温 30 分钟。

        8. PBS 洗涤 3 × 3 分钟。

        9. PAP 复合物,室温 60 分钟。

        10.  PBS 洗涤 3 × 3 分钟。

        11.  0.04 DAB 0.03 H2 O2 显色 5 10 分钟。

        12.  充分水洗。

        13.  苏木精复染,封片观察。

         

         

        4)  PAP

        1 10 同单 PAP 法。

        11.  二次加酶标二抗。

        12.  PBS 洗。

        13.  二次加 PAP

        14.  PBS 洗。

        15.  0.04 DAB 0.03 H2 O2 显色 5 10 分钟。

        16.  苏木精复染核,封片,镜检。

         

         

        5)  ABC 法(卵白素-生物素-过氧化物酶复合物法)

        1 8 PAP

        9) ABC 液,室温 60 分钟。

        10)  PBS 洗。

        11)  0.04 DAB 0.03 H2 O2 显色 5 10 分钟。

        12)  充分水洗。

        13)  苏木精复染核,封片,镜检。

         

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序