去污剂对红血球细胞膜稳定性的影响

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目的和要求
1.了解各种去污剂对红血球细胞膜 稳定性的影响
2 .学会制备红血球细胞

原理
多种去污剂可以溶解细胞膜上的磷脂化合物，从而使细胞膜破裂，释放出细胞内物质。
血红蛋白在540nm有特异吸收峰。去污剂作用后的无细胞膜溶液于540nm处的A值大小可以表示其红血球细胞对不同去污剂的敏感性。

步骤
1.红血球等渗溶液的制备
取已加抗凝剂的猪血2.5mL，加生理盐水10.0mL，离心20方针（2000rpm），收集沉下的红血球，用生理盐水洗涤一次（5mL），再离心20分钟（2500rpm），收集沉淀，加10mL生理盐水，悬浮红血球，即为红血球等渗溶液，备用。
2.取4支试管各加0.2mL红血球等渗溶液，分别对应加入10.0g/L的Triton X-100，Brij58，CTAB，SDS 5mL，小心混匀，2500rpm离心20分钟，收集上清液，测540nm的A值（以相同操作，不含红血球的去污剂作参比）。
以Triton X-100的A值作为100%的溶解作用，计算其它去污剂的相对溶解作用。
3.不同浓度的中性去污剂对细胞膜的溶解作用
取6支试管，各加生理盐水5mL，红血球等渗液1.0mL，向各管对应加入10.0g/L、8.0g/L、6.0g/L、4.0g/L、2.0g/L、1.0g/L的Triton X-100 50Ul，小心混匀，置于37度恒温水浴中20分钟，2500rpm离心20分钟，取上清液于540nm处测吸收值，计算相对溶解作用（参比液：5.0mL生理盐水+50uL不同浓度的Triton X-100）。
以Triton X-100的不同浓度为X轴，相对溶解作用为Y轴，作图。
4 .计算公式