• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        血清可溶性白介素的检测方法

        互联网

        1891
        相关专题
         

        实验目的

        1.了解sIL-2R检测的基本原理

        2.掌握sIL-2R检测的方法的临床意义。

        实验原理

        sIL-2R可与细胞膜 表面的受体(IL-2R)竞争结合IL-2,从而成为一种免疫抑制物质。在正常人血清和尿液中可检出低水平的sIL-2R,在某些疾病发生时如器官移植、排斥反应、病毒性感染、恶性肿瘤、创伤和自身免疫病等,sIL-2R在血清和其他体液中的水平增高,且与病情、病程密切相关。本实验采用双抗体夹心法测定原发性肝癌患者血清sIL-2R水平。(夹心法原理参见实验五免疫酶技术)

        即: 抗体-——待检血清——抗体——酶标抗抗体——显色

        实验用品

        1.材料、试剂:待测人血清、IL-2Rα阳性、阴性参考血清、IL-2Rα单抗、兔抗IL-2Rα多克隆抗体、酶结合物(HRP-抗兔IgG)、显色A液、B液、PBS 洗涤液、终止液。

        2.器具:吸管、滴管、试管、48孔聚苯乙烯反应板、50μl微量移液器 、恒温箱(370C)

        实验方法

        预步骤:先用一定浓度的IL-2Rα单抗包被聚苯乙烯板的小孔,4℃冰箱过夜,次日取出甩尽液体备用。

        (1)微量移液器 分别加待检血清、阳性对照、阴性对照各50μl于1、2、3孔中,370C水浴箱温育40min。

        (2)PBS 液洗板3次,每次3min,甩干。

        (3)每孔加入兔抗IL-2Rα多抗,370C水浴箱温育30min。

        (4)用PBS液洗板3次,每次3min,甩干

        (5)每孔加入酶结合物(HRP-抗兔IgG)2滴,370C水浴箱温育30min。

        (6)每孔分别加入显色A液、B液各1滴,混匀。370C水浴箱温育5-10min。

        取出肉眼观察结果。如待检血清溶液与阳性对照一致均为蓝色,表明待检血清为sIL-2R阳性血清。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序