植物过氧化物同工酶的电泳技术
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一、实验目的
学习聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作方法，掌握过氧化物酶的电泳、染色技术和分析方法。
二、实验原理
同工酶指作用于底物相似或完全相同的酶的不同分子形式，即催化同一种反应而结构不同的一簇酶，它们是受遗传决定的酶的不同分子形式。是生物体代谢的调节者，与特殊的生理功能和细胞分化相联系，并且与基因进化及种的演变有着密切的关系，表现出明显的组织、种属和发育的特异性。利用凝胶电泳技术可以比较种属同工酶的差异并将它们分开，用专一的作用底物和特殊染料，把需要分析的酶染色，在凝胶上呈现同工酶谱。
三、实验材料
实验10所提取的材料
四、器具及药品
恒温培养箱， 冰箱，天子天平，微量进样器，电泳仪，电泳槽，长针头注射器，烧杯，移液管，琼脂，三羟甲基氨基甲烷，盐酸，丙烯酰胺，甲叉双丙烯酰胺，甘氨酸，过硫酸铵，联苯胺，过氧化氢，四甲基乙二胺（TEMED），硫酸锰，醋酸钠，愈创木酚。
五、实验步骤
1、 仪器 组装
将玻璃板插入胶条内，再插入电泳槽内，注意，高玻璃对红电极，矮玻璃对黑电极，拧紧螺丝。
2、封胶
配制1％的琼脂密封胶条。
3、加分离胶
按下列配方配制分离胶：
30％Acr-0.8％Bis 4.5ml，1mo/lTris-HCl缓冲液（PH8.8）15ml，1％过硫酸铵0.5ml，TEMED
20ul。混匀后加到两块玻璃之间，高度至标记处，大概距矮玻璃1cm左右，随后注入 蒸馏 水，水面与矮玻璃持平。
4、加浓缩胶
分离胶凝固后（水与胶间出现明显界线时），吸去上层水，配浓缩胶，配方如下：
30％Acr-0.8％Bis 1.3ml，1mo/lTris-HCl缓冲液（PH6.8）1.3ml，重蒸水7.1ml，1％
过硫酸铵0.3ml，TEMED15ul。将配好的浓缩胶混匀后加到分离胶之上，与矮玻璃持平。
5、插梳子
学习聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作方法，掌握过氧化物酶的电泳、染色技术和分析方法。
二、实验原理
同工酶指作用于底物相似或完全相同的酶的不同分子形式，即催化同一种反应而结构不同的一簇酶，它们是受遗传决定的酶的不同分子形式。是生物体代谢的调节者，与特殊的生理功能和细胞分化相联系，并且与基因进化及种的演变有着密切的关系，表现出明显的组织、种属和发育的特异性。利用凝胶电泳技术可以比较种属同工酶的差异并将它们分开，用专一的作用底物和特殊染料，把需要分析的酶染色，在凝胶上呈现同工酶谱。
三、实验材料
实验10所提取的材料
四、器具及药品
恒温培养箱， 冰箱，天子天平，微量进样器，电泳仪，电泳槽，长针头注射器，烧杯，移液管，琼脂，三羟甲基氨基甲烷，盐酸，丙烯酰胺，甲叉双丙烯酰胺，甘氨酸，过硫酸铵，联苯胺，过氧化氢，四甲基乙二胺（TEMED），硫酸锰，醋酸钠，愈创木酚。
五、实验步骤
1、 仪器 组装
将玻璃板插入胶条内，再插入电泳槽内，注意，高玻璃对红电极，矮玻璃对黑电极，拧紧螺丝。
2、封胶
配制1％的琼脂密封胶条。
3、加分离胶
按下列配方配制分离胶：
30％Acr-0.8％Bis 4.5ml，1mo/lTris-HCl缓冲液（PH8.8）15ml，1％过硫酸铵0.5ml，TEMED
20ul。混匀后加到两块玻璃之间，高度至标记处，大概距矮玻璃1cm左右，随后注入 蒸馏 水，水面与矮玻璃持平。
4、加浓缩胶
分离胶凝固后（水与胶间出现明显界线时），吸去上层水，配浓缩胶，配方如下：
30％Acr-0.8％Bis 1.3ml，1mo/lTris-HCl缓冲液（PH6.8）1.3ml，重蒸水7.1ml，1％
过硫酸铵0.3ml，TEMED15ul。将配好的浓缩胶混匀后加到分离胶之上，与矮玻璃持平。
5、插梳子
