• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        蛋白质的定量测定方法:紫外吸收法

        互联网

        6631
        实验目的
        1. 学习紫外吸收法测定蛋白质含量的原理。
        2. 掌握紫外分光光度计的操作方法。
        【实验原理】
        大多数蛋白质分子结构中含有芳香族氨基酸(酪氨酸和色氨酸)残基,使蛋白质在280nm的紫外光区产生最大吸收,并且这一波长范围内的吸收值与蛋白质浓度的成正比,利用这一特性可定量测定蛋白质的含量。
        紫外吸收法可测定0.1-0.5mg/ml的蛋白质溶液,此操作简便,测定迅速,不消耗样品,低浓度盐类不干扰测定。因此,此法在蛋白质的制备中广泛应用。
        【实验材料】
        1. 实验器材
        试管及试管架;50毫升容量瓶  2只;移液管;紫外分光光度计。
        2. 实验 试剂
        (1)标准蛋白质溶液:精确配制2mg/ml的酪蛋白溶液。
        (2)样品溶液:配制约0.5mg/ml的酪蛋白溶液作为未知样品溶液。
        实验操作
        1. 绘制标准曲线
        取7支试管按下列各表加入各 试剂 :
                   管号
        试剂 
        0 1 2 3 4 5 6
        标准蛋白质溶液(ml) 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0
        蒸馏 水(ml) 8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0
        蛋白质浓度(mg/ml) 0.000 0.125 0.250 0.375 0.500 0.625 0.750
        试剂加完后摇匀,在紫外分光光度计上,于280nm处以0号管为对照,分别测定各管溶液的光密度值。以光密度为纵座标,标准蛋白溶液浓度为横座标,绘制出标准曲线。
        2. 测定未知样品
        取样品溶液4毫升,加 蒸馏 水4ml混匀,在280nm下测定其光密度值。  
        【实验结果】
        根据样品溶液的光密度值,在绘制好的标准曲线图中查出样品溶液的蛋白质含量。
        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序