现在可用的用来处理蛋白质组复合体的方法
互联网
879
现在可用的用来处理蛋白质组复合体的方法
很明显,假设人们要像表5.4列出的那样了解蛋白质组领域的复杂性,并研究这些问题,则需要表5.6列出的方法。很明显,除了经典的电泳处理、二维(two―dimensional,2D)图谱分析之外,在认为O’arrell(1975)
方法的复杂性和劳力密集式操作是不利因素的情况下,今天人们还有很多色谱技术来与O’Farrell原来的好方法竞争,并试图取代它。
现在可用的用来处理蛋白质组复合体的方法(部分)
①经典的二维图谱分析(先IEF然后进行SDS―PAGE)
②色谱法和电泳法分级分离
③多维分离方法
●凝胶阻滞联合RP―HPLC
●离子交换联合RP―HPLC
●25℃/60℃RP-HPLC联合使用
●RP―HPLC联合毛细管电泳(CE)
●金属亲和色谱联合毛细管电泳
④蛋白质芯片
让人好奇的是,色谱学家似乎并不满足于二维图谱分析的处理,它们以有多维图谱分析的方式而自豪,尽管人们看到的所有文章最高的也就是提供二维图谱分析的处理方式。根据编者的预计,多维图谱分析的方案只有一个,即是在Jorgenson实验室调制改装的(H00ker,Jeffrey和Jorgenson,1998):它实际是一个三维图谱分析方案,即一个排阻色谱偶联一个反相流动色谱,随后再连接一个高速毛细管区带电泳。实验的结果也是非常糟糕的,这些作者得出了下面的结论: “这个系统增加的峰容量并不值得付出额外的努力,而且还增加了复杂性”。这还是一种轻描淡写的说法:这项技术的复杂程度使其工作如此艰辛,以至于Jorgenson实验室的大多数博士后研究人员纷纷离去,参加到其他单位,来寻求解脱。