组织化学与免疫组织化学定量分析技术
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组织化学与免疫组织化学定量分析技术
组织化学和免疫
组织化学只能对组织细胞内的化学成分或抗原进行定性和定位观察:随着现代物理学的飞速发展,新理论和新技术不断涌现,发明出一批可进行定量分析的仪器,最常应用的有图像分析仪、流式细胞仪、激光扫描共聚焦显微镜及体视学技术等,它们是现代形态学研究不可缺少的工具,它们的出现使形态学研究从定性和定位水平上升到定量分析水平。
显微图像分析系统的特点是计算机能自动精细处理各种有形的标本图像,它不仅能通过各种成像系统获得图像的几何数据、光密度、灰度等信息,还可运用该系统对获得的信息作进一步处理,然后通过数字的形式把标本中的各类信息精确地表达出来。
流式细胞术是一项集激光技术、光电测量技术、计算机技术、流体力学、细胞免疫化学技术及单克隆抗体技术为一体的新型高科技细胞分析技术,该项技术可对单个细胞逐个地进行高速准确的定量分析和分类,每秒可测定数千到万个细胞,且有高度的重复性。
激光扫描共聚焦显微镜是20世纪80年代问世的一种新型分析仪器,是激光、电子摄像和计算机图像处理等现代高科技手段相互渗透的产物,是显微镜技术、光电技术和计算机技术的完美结合,激光共聚焦显微镜不仅能在细胞水平上作多种功能测量和分析,还可对组织和细胞进行三维图像分析,并能进行组织细胞内各种荧光标记物的微量分析,细胞内Ca2+
和pH值等的动态分析测量,检测细胞的受体移动及膜电位变化,酶活性和物质转运的测定等、
体视学是一系列用于获得准确组织结构的三维形态定量特征(如体积、表面积、线性结构的长度和颗粒结构的数量等)的方法。20世纪80年代以来,以Cundersen为代表的丹麦科学家建立了现代无偏体视学方法,为微观形态结构进行准确定量研究提供了有效途径:在实际应用水平上,体视学技术是一系列基于二维切片全面观察而获得显微结构的三维定量信息的精确手段。因此,现代体视学方法的出现使形态学定量研究从二维水平走向三维水平。