互联网2013-11-13
1. 动物模型 选用80只250g±20成年雄性Wistar大鼠,随机等量地分为实验组和对照组(正常力)。实验组拔除左侧上颌(B区)所有磨牙。这样,实验组动物的D区磨牙因丧失对颌牙导致力丧失,而C区磨牙功能代偿性增强则构成力增强的动物模型。两组动物分别在实验后6小时、1天、2天、3天、1周、2周、3周和4周各处死5只,共16组。 2. 组织标本制备 实验动物采用4%多聚甲醛心内灌注的方式行内固定。取出下颌相应骨段,保留磨牙区,置于4%多聚甲醛中巩固固定6小时。将标本移至EDTA中脱钙2周。梯度乙醇脱水,石蜡包埋。标本厚5μm,裱于经硅化处理的玻片上。 3. 方法 1) 组织形态学取相应切片进行苏木素一伊红(HE)染色,在光学显微镜下观察牙周形态变化,并用显微标尺对牙周膜宽度进行测量。 2) 组化PGE2单克隆抗体,ABC试剂盒(美国Vector公司)。常规免疫组化染色,DAB显色。设已知有PGE2表达的应激大鼠脾组织作阳性对照,以封闭血清代替一抗作阴性对照。 3) 图像分析与统计学处理 采用MIAS-2000型图像分析仪,对实验组和对照组各时间点牙周膜染色强度进行测量。每个标本均选第一磨牙根为观察对象。结果用t检验进行统计学分析。
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