人牙周膜成纤维细胞裂解液

牙周膜成纤维细胞PDLC的传代

倒去培养基，先加入PBS1ml，再加入0.25％胰酶1ml，轻轻晃动培养瓶，使之分布均匀；约10秒。将培养瓶迅速转至镜下观察，镜下见细胞触角变钝，细胞变圆，将瓶侧立回到无菌台内，到掉胰酶，加入2mlDMEM培养基（内涵20%胎牛血清），终止消化，弯管吹打成单细胞，可再在镜下观察，确定是否吹打完全。按1：3或1：2传代，加入适量新鲜培养基后，1.5-2.0ml。放入CO2培养箱。注意：时间宁短勿长。宁愿消化不足也不能消化过，PDLC细胞不能等到细胞长融合再传代，长到80％左右就可以传代

IF=20.3！外泌体热点之牙周组织再生研究

miRNA 来调节受体细胞功能，是干预疾病进展和增强组织修复的有效策略。本研究旨在识别 sEVs 中的关键再生成分，揭示工程化 sEVs 有作为牙周炎个性化再生疗法的潜力。   研究成果及意义： 在本研究中，作者首先分离了 4 种干细胞（DFSCs/ADSCs/BMSCs/UCMSCs）的 sEVs，并检测了牙周膜细胞（PDLCs）摄取效率及成骨效应。结果发现 DFSC-sEVs 被 PDLCs 摄取最快，6 h 摄取率达 81.91%。功能实验证实，DFSC-sEVs 增强了 PDLCs 的 ALP

单细胞凝胶电泳的操作流程与注意事项

： 1. 取100 μl于45 ℃水浴中保温的0.5%NMA，铺于磨沙载玻片上，形成底胶。盖玻片推匀，不能有气泡，4度凝固5至8分钟。 2. 水平取下盖片，取100 μl于37 ℃水浴中保温的0.5%LMA与20μl细胞悬液(约400个细胞)混匀，立即铺片，加上盖玻片，4度凝固5至8分钟。 三、细胞裂解与电泳： 1. 将制备好的胶板去掉盖玻片后，浸于4 ℃预冷的细胞裂解液中，在4 ℃下裂解2.5到3小时。 2. 取出胶板，用双蒸水浸没漂洗