• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        【讨论】请问有谁用过这样 MycHis 载体,他具体是什么功能,谢谢

        丁香园论坛

        2537
        今天看文献,看到有人用这样MycHis-tagged载体,不知是何原理,请大家解释一下。

        这是我刚才查到的内容:
        “载体名称:pcDNA3.1/myc-His
        载体类型:哺乳动物细胞表达载体
        : 载体大小:5.5kb (5493 bp)
        载体宿主:大肠杆菌,哺乳动物细胞(E.coli, Mammalian cells)
        细菌抗性:氨苄西林(Ampicillin)
        真核筛选标记:新霉素(Neomycin)
        5' 测序引物:T7 prime
        3' 测序引物:BGH primer
        载体简介:pcDNA3.1/myc-His A 可以在哺乳动物细胞中高表达, 通过G418持续筛选得到目的基因稳定表达的细胞系,载体携带的 myc抗原表位基因表达后能通过HRP(辣根过氧化物酶)标记的抗myc抗体检测融合蛋白,载体C端携带的六组氨酸标签能使表达蛋白通过镍柱纯化”
        这个载体应该是同时带有两个标签(tag),即Myc和His,这两个标签是很常用的纯化和检测标志,也就是说这个载体表达的蛋白应该可以通过myc和his tag两个标记来进行纯化。关于他们的简介可见下面连接:
        http://en.wikipedia.org/wiki/Polyhistidine-tag
        http://en.wikipedia.org/wiki/Myc-tag
        谢谢高手woxingwosu 的指教,就是说his tag可以纯化蛋白,而myc可以坐western检测目的蛋白的表达量,收获,呵呵...
        是的。而且有两个不同的tag可以进行两步纯化(这两种纯化是不同的原理),从而得到更纯的蛋白,我觉得这个质粒用来探索已知蛋白的相互作用蛋白都是可行的。
        恩,有道理,文章就是用his纯化后,myc检测蛋白之间的相互作用的,感谢

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序