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        流式细胞仪标本的制备的具体步骤是什么?

        相关实验:流式细胞仪标本制备

        最新修订时间:

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        材料与仪器

        胰蛋白酶、PBS

        步骤

        (1)制备活性高的单细胞悬液:用胰酶消化细胞,PBS 清洗 2-3 次,主要去除胰酶,然后使用完全培养基将细胞调整为 5×10^6-5×10^7 个 /ml 即得待检样本;

        (2)取 40 μl 细胞悬液加入预先有特异性 McAb(5-50 μl)的小玻璃管或塑料离心管,再加 50 μl 1:20(用 DPBS 稀释)灭活正常兔血清,置于 4℃ 30 min;

        (3)用洗涤液洗涤 2 次,每次加洗涤液 2 ml 左右,1000 rpm 离心 5 min;

        (4)弃上清,加入 50 μl 工作浓度的羊(或兔)抗鼠荧光标记物,充分振摇,置于 4℃ 30 min;

        (5)用洗涤液洗涤 2 次,每次加液 2 ml 左右,1000 rpm 离心 5 min;

        (6)加 1 ml 固定液制成流式细胞仪标本。

        来源:丁香实验

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