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        请问悬浮细胞如何做 transwell 测细胞迁移能力,具体步骤?

        相关实验:🔥 transwell 细胞迁移实验

        最新修订时间:

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        合作专家 | 陈慕华博士

        肿瘤学 北京大学

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        审核专家 | 聂壹峰博士

        纳米生物医学 中国科学院大学

        用途

         

        材料与仪器

        细胞样品、transwell 小室;

        步骤

        (1)悬浮细胞最好在前一天进行饥饿处理(即无血清培养基过夜培养,以便增强细胞迁移能力);

        (2)实验当天,收集细胞,离心去上清,用无血清培养基重悬,计数;

        (3)每组细胞的配制:每组 3 复孔。按照每孔 10^5 个细胞 / 200 μl 的量配制 4 个复孔的用量(多配 1 孔),即 4×10^5 个细胞 / 800 μl;

        (4)transwell 下室加入 700-800 μl 的含 10% 胎牛血清的培养基,上室加入(3)中配制好的 100 μl 细胞;

        (5)细胞培养箱中培养 24-48 小时,具体需要预实验摸索下,每种细胞迁移能力不一致;

        (6)固定,染色,显微镜下拍照,计数,统计。

        来源:丁香实验

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